動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體(教師)

1、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體【考點(diǎn)要求：】1、比較動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同2、理解和掌握動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、過程和意義。3、理解和掌握單克隆抗體制備的過程的步驟和應(yīng)用【考點(diǎn)解析】1、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流淌性植物細(xì)胞的全能性用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動(dòng)、聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)克服遠(yuǎn)源雜交不親和，獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流淌性用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外，還有用滅活病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體【例1】動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的

2、是誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所接受的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞A.B.C.D.2、單克隆抗體的制備（1）單克隆抗體：一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群，其產(chǎn)生的抗體就是單克隆抗體?！纠?】下列哪項(xiàng)屬于克隆A將雞的某個(gè)DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi)C將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞 D將某腫瘤細(xì)胞在體外培育繁殖成一個(gè)細(xì)胞群體制備過程：第一步：將 注射到小鼠體內(nèi)進(jìn)行免疫；其次步：從該小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的細(xì)胞，與小鼠的細(xì)胞在，或聚乙二醇的誘導(dǎo)下融合；

3、第三步：在特定的培育基中，篩選出細(xì)胞；第四步：克隆化培育雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行抗體檢測(cè)，從中選擇出的細(xì)胞群，連續(xù)培育；第五步：將該雜交瘤細(xì)胞在 條件下大規(guī)模培育或注射到小鼠 內(nèi)增殖，然后再?gòu)呐嘤夯蛐∈蟾顾刑崛?，分離純化單克隆抗體；（2）產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是：漿細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是：雜交瘤細(xì)胞（3）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能無限增殖，又能分泌特異性抗體（4）第一次篩選是為了獲得：雜交瘤細(xì)胞 其次次篩選時(shí)為了獲得：既能無限增殖，又能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞（5）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備（6）單克隆抗體可以作為診斷試劑，精確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，與抗原的特異性結(jié)合具有精確、高效、

4、簡(jiǎn)易、快速的特點(diǎn)。單克隆抗體還可以用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥。單克隆抗體作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，精確殺傷癌變細(xì)胞。【例3】利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是 A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體 B.體外培育單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體 C.將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞 D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者【高考回顧】1、（01天津、山西卷）科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種

5、細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培育可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 A經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 C經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞2、（04全國(guó)一）用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獵取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交積累細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培育后提取單克隆抗體3、（05高考）關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是A可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療C

6、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)4、（06廣東卷）單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)商量中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是 A特異性強(qiáng)、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C體外培育B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體 D由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌5、（08全國(guó)卷一）5下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是A電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合B去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理C小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制務(wù)單克隆抗體D某種植物甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種與甲乙兩品種雜交后代

7、的染色體數(shù)目相同6、（11江蘇）關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是 A蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì) B體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體 C植物組織培育技術(shù)可用于植物莖尖脫毒 D動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育【反饋練習(xí)】1在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）A結(jié)果是相同的B雜種細(xì)胞的形成過程基本相同C操作過程中酶的作用相同D誘導(dǎo)融合的手段相同2、單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培育基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培育基上不能存活增殖的細(xì)胞是（ ） 淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)

8、胞 雜交瘤細(xì)胞A BC D 3、試管嬰兒、試管苗、克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果,下面對(duì)其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述正確的是 ( ) A都屬于無性生殖,能保持母本性狀 B都是細(xì)胞工程的技術(shù)范圍C都充分體現(xiàn)了體細(xì)胞的全能性 D都不會(huì)發(fā)生基因重組和變異4、如圖表示用于預(yù)防和治療禽流感的單克隆抗體生產(chǎn)過程,請(qǐng)回答下列問題： (1)若A細(xì)胞是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞,則B細(xì)胞取自 體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞,促進(jìn)d過程的 誘導(dǎo)劑是 。 (2)假設(shè)僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合,則可形成 種類型的C細(xì)胞,因此需用 _篩選出具有 特點(diǎn)的D細(xì)胞用于 培育。D細(xì)胞的名稱是 。 (3)在細(xì)胞培育所用的培育基中除需要加入糖、氨基酸、促生

9、長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽和微量元素外,通常還需加入 等一些天然成分。 (4)目前注射禽流感疫苗是預(yù)防禽流感的一種措施。決定禽流感病毒在人體細(xì)胞中增殖變化的物質(zhì)是 參考答案：(1)感染禽流感病毒的動(dòng)物或人 聚乙二醇或滅活的病毒 (2)3 選擇培育基 既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 雜交瘤細(xì)胞 (3)血清、血漿 (4)禽流感病毒的RNA 【創(chuàng)新應(yīng)用】右圖為某同學(xué)依據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。據(jù)圖回答：（1）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？。緣由是_。（2）圖中為_過程，常用_作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了_，因此不僅能分泌_，還有_本事。（3）該方案的目的是_。參考答案：（1）不能 沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞（2）細(xì)胞融合 滅活病毒（或PEG） 雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì) 特異性抗體 在體外培育條件