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1、 菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)制備制備MS固體培養(yǎng)固體培養(yǎng)基基外植體消毒外植體消毒接種接種培養(yǎng)培養(yǎng)栽培栽培實(shí)驗(yàn)具體操作過程實(shí)驗(yàn)具體操作過程移栽移栽1 1、配置各種母液、配置各種母液無機(jī)物中大量元素濃縮無機(jī)物中大量元素濃縮1010倍,微量元素濃倍,微量元素濃縮縮100100倍,常溫保存倍,常溫保存激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按一般可按1mg/ml1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液用母液配制培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)各種母液用母液配制培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計(jì)算用量的濃縮倍數(shù),計(jì)算用量實(shí)驗(yàn)具體操作過程實(shí)驗(yàn)具體操作過程
2、2 2、配置培養(yǎng)基、配置培養(yǎng)基定容定容調(diào)調(diào)PHPH培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基的分裝 實(shí)驗(yàn)具體操作過程實(shí)驗(yàn)具體操作過程實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果5-7天,外植體膨脹、生長,顏色變淺,若出現(xiàn)染天,外植體膨脹、生長,顏色變淺,若出現(xiàn)染菌,及時(shí)轉(zhuǎn)瓶。菌,及時(shí)轉(zhuǎn)瓶。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果2-3周,愈傷組織開始形成。周,愈傷組織開始形成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果3-5周之后,誘導(dǎo)出的新葉片和芽。周之后,誘導(dǎo)出的新葉片和芽。無菌條件如何保證?無菌條件如何保證?需要保證無菌需要保證無菌條件步驟條件步驟關(guān)鍵操作關(guān)鍵操作培養(yǎng)基及實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基及實(shí)驗(yàn)器材的滅菌器材的滅菌高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌滅菌干燥后直接拿到無菌操作臺中滅菌干燥后直接拿到無菌操作臺
3、中外植體的消毒外植體的消毒酒精、酒精、升升汞汞、無菌水徹底清洗無菌水徹底清洗接種的接種的無菌操作無菌操作始終在酒精燈旁進(jìn)行始終在酒精燈旁進(jìn)行每次使用器械后,都需要浸泡在每次使用器械后,都需要浸泡在95%的酒精中的酒精中每次使用器械前,都需要用火焰灼燒滅菌每次使用器械前,都需要用火焰灼燒滅菌操作過程中避免雙手從培養(yǎng)皿上方移動(dòng)操作過程中避免雙手從培養(yǎng)皿上方移動(dòng)每瓶內(nèi)接種材料不宜過多每瓶內(nèi)接種材料不宜過多培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱中的培中的培養(yǎng)養(yǎng)觀察時(shí)不打開封口膜觀察時(shí)不打開封口膜手持錐形瓶錐形瓶觀察時(shí)正握手持錐形瓶錐形瓶觀察時(shí)正握發(fā)現(xiàn)染菌外植體,及時(shí)轉(zhuǎn)瓶,打開封口膜前先發(fā)現(xiàn)染菌外植體,及時(shí)轉(zhuǎn)瓶,打開封口膜前先高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌三、課題延伸三、課題延伸1 1、一般來說,容易進(jìn)行無性繁殖的植物,也、一般來說,容易進(jìn)行無性繁殖的植物,也容易進(jìn)
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