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文檔簡介
1、2016-2018三年高考生物試題分項匯編-現(xiàn)代生物科技(附解析)1.(2018江蘇卷,10)下列關(guān)于采用胚胎工程技術(shù)實現(xiàn)某良種肉用牛快速繁殖的敘述,正確的是A.采取激素注射等方法對良種母牛作超數(shù)排卵處理B.體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進行移植C.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應(yīng)D.利用胚胎分割技術(shù),同卵多胎較同卵雙胎成功率更高【答案】A2.(2018北京卷,5)用XhoI和Sall兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段,酶切位點及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是A.如圖中兩種酶識別的核甘酸序列不同B.如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNAC泳道中是用Sall處理得到
2、的酶切產(chǎn)物D.圖中被酶切的DNAt段是單鏈DNA【答案】D【解析】限制酶識別特定的脫氧核甘酸序列,不同的限制酶能識別不同的核甘酸序列,由電泳圖可知XhoI和Sall兩種酶分別切割時,識別的序列不同,A正確;同種限制酶切割出的DNAt段,具有相同的粘性末端,再用DNAil接酶進行連接,可以構(gòu)成重組DNAB正確;Sall將DNAt段切成4段,XhoI將DNAt段切成3段,根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道為Sall,泳道為XhoI,C正確;限制酶切割雙鏈DNA酶切后的DNAt段仍然是雙鏈DNAD錯誤。3.(2018江蘇卷,22)如圖為細胞融合的示意圖,下列敘述正確的是A.若a細胞和b細胞是植物細胞,需先去分化再
3、誘導融合B.a細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現(xiàn)C.c細胞的形成與a、b細胞膜的流動性都有關(guān)D.c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因【答案】BC4.(2017?工蘇卷.11)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體,篩選胚胎進行移植,以利用乳腺生物反應(yīng)器進行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是A.H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細胞分泌B.應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C.鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D.用H-Y抗原免疫母??色@得相應(yīng)抗體【答案】D【解析】單克隆抗體由雜交瘤細胞分泌,A錯誤;做雌雄性別鑒別應(yīng)選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細胞,B錯誤;由于是利用乳腺生物反應(yīng)
4、器進行生物制藥,則鑒別后的雌性胚胎可直接做胚胎移植,雄性胚胎沒有意義,C錯誤;H-Y抗原免疫母牛,使其體內(nèi)產(chǎn)生體液免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的漿細胞,獲得相應(yīng)抗體,D正確。5.(2017?工蘇卷.14)下列關(guān)于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述,錯誤的是A.精子在獲能液中于37C、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能B.小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng),注射相關(guān)激素有促進超數(shù)排卵的作用C.分割的胚胎細胞有相同的遺傳物質(zhì),因此發(fā)育成的個體沒有形態(tài)學差異D.注射到囊胚腔中的胚胎干細胞可以參與個體器官的發(fā)育【答案】C【解析】精子在獲能液中于37C、5%CO堤件下培養(yǎng),可使精子獲能,A正確;給小鼠注射促性腺激素可促進其超
5、數(shù)排卵,B正確;分割的胚胎細胞具有相同的遺傳物質(zhì),但發(fā)育過程中基因突變或環(huán)境因素影響等,最終發(fā)育成的個體可能會有形態(tài)學差異,C錯誤;胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性,能分化成各種組織器官,D正確。6.(2017?|匕京卷.5)為了增加菊花花色類型,研究者從其他植物中克隆出花色基因C(圖1),擬將其與質(zhì)粒(圖2)重組,再借助農(nóng)桿菌導入菊花中。下列操作與實驗?zāi)康牟环氖茿.用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B.用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織,將C基因?qū)爰毎鸆.在培養(yǎng)基中添加卡那霉素,篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞D.用分子雜交方法檢測C基因是否整合到菊花染色體上【答案】C【解析】用限制性核酸內(nèi)
6、切酶EcoRI處理目的基因和質(zhì)粒,可以使目的基因兩側(cè)和質(zhì)粒產(chǎn)生相同的黏性末端,再用連接酶把切口連起來就能構(gòu)建成重組質(zhì)粒,A正確;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于雙子葉植物或裸子植物,菊花屬于雙子葉植物,故可用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織,將C基因?qū)爰毎珺正確;質(zhì)粒中只有潮霉素抗性基因,被轉(zhuǎn)化的菊花細胞只對潮霉素具有抗性,在培養(yǎng)基中添加卡那霉素,不能篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞,C錯誤;檢測目的基因是否整合到受體細胞的染色體上,可采用DN網(wǎng)子雜交技術(shù),D正確。7.(2016江蘇卷.9)下列有關(guān)細胞工程的敘述,正確的是A.PEG是促細胞融合劑,可直接誘導植物細胞融合B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細胞破裂C.
7、骨髓瘤細胞經(jīng)免疫處理,可直接獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動物,其線粒體DNAt自供卵母體【答案】D8.(2016江蘇卷.11)印度沙漠貓是一種珍惜貓科動物,通過胚胎工程技術(shù),可以讓家貓代孕而繁育,主要步驟如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是A.步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分離B.誘導超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C.受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于營養(yǎng)液D.步驟甲使用的培養(yǎng)液和早期胚胎培養(yǎng)液成分基本相同【答案】B【解析】步驟甲、乙分別指受精作用、胚胎移植,A錯誤;誘導超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素,只能作用于性腺,B正確;受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來自受精卵,C錯誤;受精
8、過程使用的培養(yǎng)液是獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤?,與早期胚胎培養(yǎng)液有區(qū)別,D錯誤。9.(2017碉南卷.31)選修3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)甲、乙兩名同學分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?;卮鹣铝袉栴}:(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在一定條件下進行組織培養(yǎng),均能獲得試管苗,其原理是。(2)甲、乙同學在誘導愈傷組織所用的培養(yǎng)基中,均加入一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到。若要用細胞作為材料進行培養(yǎng)獲得幼苗,該細胞應(yīng)具備的條件是(填“具有完整的細胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)
9、主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是。A中的愈傷組織是葉肉細胞經(jīng)形成的。(4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉,要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉,可用組織培養(yǎng)方法繁殖,在培養(yǎng)時,(填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體,原因是【答案】(1)綠色葉片和白色花瓣的細胞具有全能性,在一定條件下能發(fā)育成完整的植株。(2)葡萄糖、果糖具有完整的細胞核(3)細胞分裂素、生長素脫分化(4)不能對雜合體的植株來說,具體細胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細胞的基因型不同。用花粉粒進行組織培養(yǎng)得到花卉基因型不同于原植株。(3)影響植物組織培養(yǎng)的兩種主要激素
10、是細胞分裂素和生長素。愈傷組織是葉肉細胞經(jīng)脫分化形成的。(4)由于花粉粒的基因型與體細胞的基因型不同,組織培養(yǎng)得到花卉基因型不同于原植株,導致不能保留親本性狀。10.(2017漸課標I卷.38)生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)真核生物基因中通常有內(nèi)含子,而原核生物基因中沒有,原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA#列的機制。已知在人體中基因A(有內(nèi)含子)可以表達出某種特定蛋白(簡稱蛋白A)?;卮鹣铝袉栴}:(1)某同學從人的基因組文庫中獲得了基因A,以大腸桿菌作為受體細胞卻未得到蛋白A,其原因是o(2)若用家蠶作為表達基因A的受體,在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中,不選用作為載
11、體,其原因是o(3)若要高效地獲得蛋白A,可選用大腸桿菌作為受體。因為與家蠶相比,大腸桿菌具有(答出兩點即可)等優(yōu)點。(4)若要檢測基因A是否翻譯出蛋白A,可用的檢測物質(zhì)是(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”)。(5)艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗為證明DN強遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻,也可以說是基因工程的先導,如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示,那么,這一啟示是o【答案】(1)基因A有內(nèi)含子,在大腸桿菌中,其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應(yīng)的RNAff列不能被切除,無法表達出蛋白A(2)噬菌體噬菌體的宿主是細菌,而不是家蠶(3)繁殖快、容易培養(yǎng)(4)蛋白A的抗體(5)DN阿以從一種生物個
12、體轉(zhuǎn)移到另一種生物個體【解析】(1)基因A的編碼區(qū)中有內(nèi)含子,在真核生物細胞內(nèi)把內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄來的RN砌除,而原核生物細胞內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄后不切除,轉(zhuǎn)錄后直接表達,所以翻譯形成的蛋白質(zhì)不是蛋白A。(2)由于噬菌體是專性寄生在細菌體內(nèi)的病毒,無法侵染到真核生物家蠶細胞內(nèi),所以不能用噬菌體作為運載體。而家蠶屬于昆蟲,故可用昆蟲病毒作為運載體。(3)大腸桿菌作為受體菌具有繁殖周期短、易培養(yǎng)。(4)檢測目的基因是否表達通常用抗原-抗體雜交技術(shù)。(5)艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗為證明DN猥遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻,證明了生物的遺傳物質(zhì)是DNA還為基因工程理論的建立提供了啟示,這一啟示是DNAM以從一種生物轉(zhuǎn)移到
13、另一種生物個體。11.(2017漸課標II卷.38)生物選修3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:(1)在進行基因工程操作時,若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA常選用嫩葉而不選用老葉作為實驗材料,原因是提取RNA時,提取液中需添加RNA1抑制劑,其目的是(2)以mRNM材料可以獲得cDNA其原理是33)若要使目的基因在受體細胞中表達,需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細胞,原因是(答出兩點即可)。(4)當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DN旌接酶催化形成的
14、化學鍵是(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是【答案】(1)嫩葉組織細胞易破碎防止RNAI解(2)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNAl模板按照堿基互補配對的原則可以合成cDNA(3)目的基因無復制原點;目的基因無表達所需啟動子(4)磷酸二酯鍵(5)目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常12.(2017漸課標出卷.38)生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)編碼蛋白甲的DNAff列(序列甲)由AB、C、DE五個片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示。回答下列問題:(1)現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙,
15、若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNAff歹U(TTCGCTTCT-CAGGAAGXGAIU所構(gòu)建的表達載體轉(zhuǎn)入宿主細胞后不能翻譯出蛋白乙,原因是(2)某同學在用PCR技術(shù)獲取DNAt段B或D的過程中,在PCR5應(yīng)體系中加入了DNAt合酶、引物等,還加入了序列甲作為加入了作為合成DNA勺原料。(3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細胞增殖的作用,某同學做了如下實驗:將一定量的含T淋巴細胞的培養(yǎng)液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為對照,培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細胞濃度,結(jié)果如圖2。由圖2可知,當細胞濃度達到a時,添加蛋白乙
16、的培養(yǎng)液中T淋巴細胞濃度不再增加,此時若要使T淋巴細胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是2細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO舔度,CO2的作用是僅根據(jù)圖、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少(填“A,“b”,“d,或"e,)片段所編碼的肽段,則會降低其刺激T淋巴細胞增殖的效果?!敬鸢浮浚?)編碼乙的DNAff列起始端無ATG轉(zhuǎn)錄出的mRNAE起始密碼子(2)模板dNTP(3)進行細胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)液是的pHC13.(2016江蘇卷.33)(9分)下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中標注了相關(guān)限制酶的酶切位點,其中切割位點相同的酶不重復標注。請回答下列問題:(1)
17、用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入處于態(tài)的大腸桿菌。(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加,平板上長出的菌落,常用PCR£定,所用的引物組成為圖2中o若BamHI酶切的DN襪端與BclI酶切的DN襪端連接,連接部位的6個堿基對序列為,對于該部位,這兩種酶(填“都能”、“都不能”或“只有一種能")切開。(4)若用Sau3AI切圖1質(zhì)粒最多可能獲得種大小不同的DNAt段?!敬鸢浮浚?)BclI和Hindin連接感受(2)四環(huán)素引物甲和引物丙(3)都
18、不能(4)7【解析】(1)選擇的限制酶應(yīng)在目的基因兩端存在識別位點,但BamHI可能使質(zhì)粒中啟動子丟失,因此只能選BclI和Hindin。酶切后的載體和目的基因片段,通過DNA1接酶酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入處于感受態(tài)的大腸桿菌。14.(2016課標1卷.40)某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNAif入到Ampr或Tetr中會導致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨節(jié)青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamH酶切后,與用BamHI酶切獲得的目的基因混合,加入DNAil接酶進行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌,結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)
19、化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?;卮鹣铝袉栴}:(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有(答出兩點即可)。而作為基因表達載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子。(2)如果用含有氨節(jié)青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的,其原因是;并且J口的細胞也是不能區(qū)分的,具原因是在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有是的固體培養(yǎng)基。(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DN腹制所需的原料來
20、自于【答案】(1)能夠自我復制、具有標記基因、具有一個至多個限制酶切割位點(答出兩點即可)(2)二者均不含氨節(jié)青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上都不能生長含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒(或答含有重組質(zhì)粒)二者都含氨節(jié)青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長四環(huán)素(3)受體細胞15.(2016新課標出卷.40)圖(a)中的三個DNAt段上依次表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三種限制性內(nèi)切酶的識別序列與切割位點,圖(b)為某種表達載體示意圖(載體上的EcoRI、Sau3AI的切點是唯一的)。根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題:(1)經(jīng)BamHI酶切割得到的目的基因可以與上述表達載體被
21、酶切后的產(chǎn)物連接,理由是。(2)若某人利用圖(b)所示的表達載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子,如圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物的有不能表達的原因是。(3)DNA1接酶是將兩個DNAt段連接起來的酶,常見的有口,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是?【答案】(1)Sau3Al兩種梅切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙甲中目的基因插入在啟動子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,兩者目的基因均不能轉(zhuǎn)錄(3)E?coliDNA連接酶T4DNA至接酶T4DNA51接酶16.(2016天津卷.7)(12分)人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值
22、,只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。(1)獲取HSAS因,首先需采集人的血液,提取合成總cDNA然后以cDNA模板,采用PC旺術(shù)擴增HSAS因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴增方向,請用箭頭在方框內(nèi)標出標出另一條引物的位置及擴增方向。(2)啟動子通常具有物種及組織特異性,構(gòu)建在水稻胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA的載體,需要選擇的啟動子是A.人血細胞啟動子B.水稻胚乳細胞啟動子C.大腸桿菌啟動子D.農(nóng)桿菌啟動子(3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細胞的過程中,需添加酚類物質(zhì),其目的是(4)人體合成的初始HS夠肽,需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活
23、性。與途徑II相比,選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值,須確認rHSA與的生物學功能一致?!敬鸢浮浚?2分)(1)總RNA(或mRNA(2)B(3)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化(4)水稻是真核生物,具有膜系統(tǒng),能對初始rHSA多肽進行高效加工(5)HAS(2)根據(jù)啟動子通常具有物種及組織特異性,在水稻胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA需選擇水稻胚乳細胞啟動子。(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細胞的過程中,酚類物質(zhì)可以吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,有利于目的基因的轉(zhuǎn)移。(4)水稻是真核生物,具有膜系統(tǒng),能對初始rHSA多肽進行高效加工,而大腸桿菌是原核生物,細胞中
24、不具有膜結(jié)構(gòu)的細胞器。(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值,須確認rHSA與天然的HS勝物學功能一致。17.(2016新課標2卷.40)生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)圖中A表示正常細胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為過程表示去除細胞核,該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至適當時期再進行,去核時常采用的方法。代表的過程是。(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細胞中的穩(wěn)定性會降低,因此,選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是。(4)與克隆羊“多莉(利)”培
25、養(yǎng)成功一樣,其他克隆動物的成功獲得也證明了?!敬鸢浮浚?5分)(1)XX或XY顯微操作(去核法)胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細胞的細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的形狀產(chǎn)生影響(4)已經(jīng)分化的動物體細胞核具有全能性。(3)克隆動物的細胞核基因來自供體,因此大部分性狀與供體相同,但細胞質(zhì)基因來源于受體(或提供卵母細胞的個體),即卵母細胞的細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的形狀產(chǎn)生影響,這就決定了克隆動物的性狀與供體不完全相同。(4)克隆動物的培育采用的是核移植技術(shù),核移植技術(shù)的原理是:已經(jīng)分化的動物體細胞核具有全能性。18.(2016海南卷.31)基因工程又稱為DNA®組技術(shù),回答相關(guān)
26、問題:(1)在基因工程中,獲取目的基因主要有兩大途徑,即和從中分離。(2)利用某植物的成熟葉片為材料,同時構(gòu)建cDN故庫和基因組文庫,兩個文庫相比,cDN故庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少,其原因是。(3)在基因表達載體中,啟動子是聚合酶識別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞,最常用的原核生物是。(4)將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有口顆粒。【答案】(15分)(1)人工合成生物材料(每空2分,共4分,其他合理答案可酌情給分)(2)cDNA文庫中只含有葉細胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達)的基因,而基因組文庫中含有該植物的全部基因(5分,其他合理答案
27、可酌情給分)(3)RNA(2分)大腸桿菌(或答細菌)(2分)(4)金粉鴇粉(每空1分,共2分)(3)在基因表達載體中,啟動子是RNA!合酶識別并結(jié)合的部位。采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞,由于易于培養(yǎng),最常選用大腸桿菌(或細菌)。(4)將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鴇粉顆粒。19.(2016上海卷.九)回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達的問題。在圖27所示的質(zhì)粒PZHZ11(總長為3.6kb,1kb=1000對堿基因)中,lacZ基因編碼(3-半乳糖甘酶,后者催化生成的化合物能將白色的大腸桿菌染成藍色。68.若先用限制酶BamHI切開pZHZ11
28、然后滅活BamHBS,再加DNA1接酶進行連接,最后將連接物導入足夠數(shù)量的大腸桿菌細胞中,則含3.1kb質(zhì)粒的細胞顏色為;含3.6kb質(zhì)粒的細胞顏色為。69.若將兩端分別用限制酶BamHI和BglHI切開的單個目的基因片段置換pZHZII中0.5kb的BamHI酶切片段,形成4.9kb的重組質(zhì)粒,則目的基因長度為kb。70.上述4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式,若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種,只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNAt段;那么聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質(zhì)粒,則可獲得kb和kb兩種DNAt段。71.若將人的染色體DNAt段先導入大腸桿菌細胞中克隆并鑒定目的基因,然后再
29、將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入植物細胞中表達,最后將產(chǎn)物的藥物蛋白注入小鼠體內(nèi)觀察其生物功能是否發(fā)揮,那么上述過程屬于。A.人類基因工程B.動物基因工程C.植物基因工程D.微生物基因工程【答案】68.白色白色和藍色/白色或藍色69.1.870.1.43.571.C20.(2018海南,31)甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì)。為了改善黃瓜的品質(zhì),科學家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導入黃瓜細胞,得到了轉(zhuǎn)基因植株?;卮鹣铝袉栴}:(1)用農(nóng)桿菌感染時,應(yīng)優(yōu)先選用黃瓜_(填“受傷的”或“完好的”)葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng),選用這種葉片的理由是。(2)若在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白,則表明該重組質(zhì)粒中
30、已轉(zhuǎn)移到植物細胞中且能夠表達;用該轉(zhuǎn)基因黃瓜的某一植株與一株非轉(zhuǎn)基因植株雜交,發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個體數(shù)與不含甜蛋白個體數(shù)之比為1:1,則說明甜蛋白基因已經(jīng)整合到(填“核基因組”“線粒體基因組”或“葉綠體基因組”)中。(3)假設(shè)某種轉(zhuǎn)基因作物因為受到病毒感染而減產(chǎn),若要以該轉(zhuǎn)基因作物為材料獲得脫毒苗,應(yīng)選用作為外植體進行組織培養(yǎng)。(4)通常,基因工程操作主要有4個步驟,即目的基因獲取、重組表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。因此,基因工程的含義可概括為。答案(1)受傷的葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質(zhì),可吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞(2)甜蛋白基因核基因組(3)莖尖(4)按
31、照人們的愿望進行設(shè)計,并通過體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物新的遺傳特性,創(chuàng)造出符合人們需要的新生物類型【解析】(1)用農(nóng)桿菌感染時,應(yīng)優(yōu)先選用黃瓜受傷的葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng),理由是葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質(zhì),可吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞。(2)若在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白,則表明該重組質(zhì)粒中甜蛋白基因已轉(zhuǎn)移到植物細胞中且能夠表達;用該轉(zhuǎn)基因黃瓜的某一植株與一株非轉(zhuǎn)基因植株雜交,發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個體數(shù)與不含甜蛋白個體數(shù)之比為1:1,則說明甜蛋白基因已經(jīng)整合到核基因組中。(3)假設(shè)某種轉(zhuǎn)基因作物因為受到病毒感染而減產(chǎn),若要以該轉(zhuǎn)基因作物為材料獲得脫毒苗,應(yīng)選用莖尖作為外植體進
32、行組織培養(yǎng)。(4)通常,基因工程操作主要有4個步驟,即目的基因獲取、重組表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。因此,基因工程的含義可概括為按照人們的愿望進行設(shè)計,并通過體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物新的遺傳特性,創(chuàng)造出符合人們需要的新生物類型。21.(2018全國II卷,38)某種熒光蛋白(GFP在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GF睡因的5'末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡稱為甲),并將其插入質(zhì)粒P0,構(gòu)建了真核表達載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點的示意圖如下,圖中E
33、1E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同?;卮鹣铝袉栴}:(1)據(jù)圖推斷,該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時,使用了兩種限制酶,這兩種酶是。使用這兩種酶進行酶切是為了保證也是為了保證(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞后,若在該細胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了和過程。(3)為了獲得含有甲的牛,該團隊需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的移入牛的中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。(4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中,某同學用PC昉法進行鑒定。在鑒定時應(yīng)分別以該牛不同組織細胞中的(填“mRNA”總RNA或“核DNA)彳為PCR莫板。【答案】(1)E1和E4甲的完整甲與載體正
34、確連接(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細胞核去核卵母細胞(4)核DNA(2)構(gòu)建的真核表達載體P1中含有GF睡因,而GF睡因的表達產(chǎn)物“某種熒光蛋白(GFP”在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光。若在導入P1的牛皮膚細胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了表達,基因的表達過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。(3)若要獲得含有甲的牛,可采用核移植技術(shù),即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的細胞核移入牛的去核卵母細胞中獲得重組細胞,并將該重組細胞在體外培養(yǎng)成重組胚胎,再經(jīng)過胚胎移植等獲得含有甲的牛。(4)PC譚多聚酶鏈式反應(yīng)的縮寫,是一種在生物體外復制特定DNAt斷的核酸合成技術(shù)。若利用PC昉法檢測甲是否存在于克隆牛的
35、不同組織細胞中,則應(yīng)分別以該牛不同組織細胞中的核DNA乍為PCR莫板。22.(2018江蘇卷,32)為生產(chǎn)具有特定性能的-淀粉酶,研究人員從某種海洋細菌中克隆了-淀粉酶基因(1656個堿基對),利用基因工程大量制備琢-淀粉酶,實驗流程見下圖。請回答下列問題:(1)利用PCRK術(shù)擴增”淀粉酶基因前,需先獲得細菌的。為了便于擴增的DNAt段與表達載體連接,需在引物的端加上限制性酶切位點,且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點,主要目的是。(3)進行擴增時,反應(yīng)的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設(shè)定,下列選項中的設(shè)定與引物有關(guān),的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。(填序號)變性溫度退火溫度延伸溫度變性時間
36、退火時間延伸時間(4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼-淀粉酶的mRNA勺部分堿基序列:圖中虛線框內(nèi)mRNAt段包含個密碼子,如虛線框后的序列未知,預測虛線框后的第一個密碼子最多有一種。(5)獲得工程菌表達的-淀粉酶后,為探究影響酶活性的因素,以濃度為1%勺可溶性淀粉為底物測定酶活性,結(jié)果如下:緩沖液50mmol/LNa2HPO4-KH2PO450mmol/LTris-HCl50mmol/LGly-NaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相對活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8根據(jù)
37、上述實驗結(jié)果,初步判斷該“淀粉酶活性最高的條件為。【答案】(1)基因組DNA(2)5'使DNAt段能定向插入表達載體,減少自連(3)(4)813(5)pH為8.5,緩沖液為50mmol/LTris-HCl【解析】(1)%-淀粉酶基因來自于海洋細菌,因此為了利用PC敬術(shù)擴增-淀粉酶基因,必須先獲得細菌的基因組DNA(3)進行擴增時,退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān),延伸時間的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。(4)根據(jù)題意分析,虛線框內(nèi)mRNAt段內(nèi)含有24個堿基,每3個堿基構(gòu)成一個密碼子,因此包含24+3=8個密碼子;構(gòu)成mRNA勺堿基有4種,若虛線框后的序列未知,預測虛線框后的第一個密碼子最多有4X4-3=13種。(5)根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析可知,在pH為8.5,緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下,口-淀粉酶相對活性為99.5%活性最高。23.(2018全國I卷,38)回答下
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