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文檔簡介
1、課后加強訓練(時間:20分鐘 滿分:100分).提北綺 提考能,操技法 了。分心得1 .有些細菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油 污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答問題。在篩選過程中,應將土壤樣品稀釋液接種到以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講,該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即 和0為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈越大說明該菌株 的降解能力越。(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中,實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、和。無菌技術要求實馬操作應在酒精燈 附近進行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污
2、染。解析(1)本實驗的目的是篩選出可以分解原油的高效菌株,從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株,使用的培養(yǎng)基應是以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。(2)菌種純化培養(yǎng)時,常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種。(3)當固體培養(yǎng) 基上長出單菌落后,可通過比較菌落周圍分解圈的大小,來判斷菌株降解原油能力 的大小。一般來說,分解圈越大說明該菌株的降解能力越強,反之則越弱。(4)滅菌的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。答案原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰2 .(2016湖南衡陽模擬)回答有關微生物的培養(yǎng)與應用問題:微生物的培養(yǎng)需要使用培養(yǎng)基,不同培養(yǎng)基的配
3、方不同,但一般都有 碳源、氮源;在配制從土壤中篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基時,需加入 作為唯一的碳源,該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基;若將樣品接種到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上,在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是 ,當形成菌落以后可以根 據菌落周圍是否產生 來篩選纖維素分解菌。(2)若要統(tǒng)計土壤樣品中纖維素分解菌的數(shù)目, 宜采用法接種,根據土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積,統(tǒng)計平板上的 就能大約推測出樣品中的活菌數(shù)。(3)一同學在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4,則每毫開樣品中的活菌數(shù)是(所用稀釋液的體積為0.2 mL)o 答案(1)水、無機鹽 纖維素 選擇 剛果紅 透明圈稀釋涂
4、布平板菌落數(shù)目(3)1.17X 1063 .實現(xiàn)生態(tài)農業(yè),讓秸稈回歸農田的關鍵是獲得能夠高效分解秸稈的微生物。請回 答下列相關問題:秸稈的主要成分易被 酶分解;從功能上看,篩選能產生該酶的微生物所用的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)甲、乙兩組同學設計了兩種培養(yǎng)基(成分見下表):硝酸俊無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水A十十一十十十十B十十十十十一十注:“ 十 ”表示有;“”表示無;CR為剛果紅。A培養(yǎng)基(K "能”或“不能”)用于分離要篩選的分解菌,原因是;加入剛果紅(CR)的目的是: (3)甲、乙兩組同學分別采用稀釋涂布平板法和平板劃線法接種。甲組同學將1 mL水樣稀釋100倍后,在3個平板
5、上分別接入0.1 mL稀釋液,經適當培養(yǎng)后,3個平 板上的菌落數(shù)分別是39、38和37,據此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為 個;示意圖a和b中,是甲組同學接種培養(yǎng)后得到的結果;乙組同學劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目的是國il(4)甲、乙兩組同學在微生物接種培養(yǎng)過程中,目的是©困h均留下一個未接種的平板同時培養(yǎng),解析(1)秸稈的主要成分是纖維素,易被纖維素酶分解;篩選能產生纖維素酶的微 生物的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)從表中培養(yǎng)基的成分來看,A培養(yǎng)基能用于分離 和鑒別纖維素分解菌,原因是該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基,且以纖維素粉為唯一碳源, 利用剛果紅來鑒定纖維素的分解情況。
6、剛果紅可與纖維素形成紅色復合物,當纖維 素被分解后.無法形成紅色復合物,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明 圈,可據此來篩選纖維素分解菌。(3)從示意圖看,圖b是采用稀釋涂布平板法接種 培養(yǎng)后得到的結果。根據題意得知每升水樣中的活菌數(shù)為384.1 x 100X 103 =3.8X 107(個)。圖a是采用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結果,劃線時總是從上一次劃線的末端開始,這樣做的目的是通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌體的數(shù)目 逐漸減少,以便得到單個菌落。(4)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否徹底,應設置空白對 照:隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。答案(1)纖維素
7、選擇(2)能纖維素粉是唯一碳源CR可與纖維素形成紅色復合物,當纖維素被纖維素酶分解后,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈(合理即可)(3)3.8X107圖b將聚集的菌體逐步稀釋,以便獲得單個菌落作為對照4 .(2016 山東濟寧檢測)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從 熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如下圖所示:挑出菌落 6寸寸寸口中需即良I號培養(yǎng)基II號培養(yǎng)基進行過程的目的是 ,過程所使用的接種方法是 法。從用途上來說,I號培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基,配制時僅以作為唯一碳源;從物理狀態(tài)上來說,R號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時應加入 作 為凝固劑。
8、(3) I、R號培養(yǎng)基配制和滅菌時,滅菌與調節(jié) pH的先后順序是 一般對 配制的培養(yǎng)基采用 法滅菌。培養(yǎng)一段時間后,應從I號培養(yǎng)基上挑出 的菌落,接種到R號培養(yǎng)基上。解析(1)分析題圖可知,過程是梯度稀釋,目的是對樣品進行稀釋;過程是用稀釋涂布平板法進行接種。(2)本題實驗的目的是篩選高效產生耐高溫淀粉酶的嗜熱 菌,從用途上來說,I號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源;從物理狀態(tài)上來說,R號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時應加入瓊脂作為凝固劑。 (3) 培養(yǎng)基配制和滅菌時應先調節(jié) pH,然后再進行滅菌,如果先滅菌再凋節(jié) pH,在調 節(jié)pH時會污染培養(yǎng)基;一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅
9、菌法滅菌。(4)能分解 淀粉的嗜熱菌在I號培養(yǎng)基上生長時可釋放淀粉酶,分解培養(yǎng)基中的淀粉,在菌落 周圍形成透明圈,透明圈越大淀粉酶的活性越強,所以要從 I號培養(yǎng)基上挑出透明 圈大的菌落,接種到R號培養(yǎng)基上0答案(1)稀釋稀釋涂布平板選擇淀粉瓊脂(3)先調節(jié)pH ,后滅菌高壓蒸汽滅菌透明圈大5 .如表所示甲、乙分別是分離兩種土壤中微生物的培養(yǎng)基的配方,圖內所示為相關分離過程,回答下列問題:KH2PO41.4 g纖維素粉5.0 gNa2HPO42.1 gNaNO31.0 gMgSO4 7H2O0.2 gNa2HPO41.2 g葡穩(wěn)糖10.0 gKH 2PO40.9 g尿素1.0 gMgSO4 7H
10、2O0.5 g瓊脂15.0 gKCl0.5 gWO0.5 g水解酪素0.5 g將上述物質溶解后,用蒸儲水定谷至 1000 mL甲乙注:水解酪素,即水解酪蛋白,由酪蛋白水解得到:1 m L W mL id mL 丙(1)從功能上看,甲培養(yǎng)基屬于 。從物理性質上看,甲培養(yǎng)基屬于 C 其中提供氮源的物質是。(2)如果將乙培養(yǎng)基配制成固體培養(yǎng)基,則在該培養(yǎng)基上長出的菌落是否都能分解纖 維素? 。如果培養(yǎng)基中加入:可以篩選出具有分解纖維素能力的菌 株,同時透明圈越(W "大”或“小”),表示該菌分解纖維素的能力越強。(3)為了計數(shù)微生物的數(shù)量,圖內采用 法進行接種培養(yǎng)計數(shù),除此之外,還可以采用
11、 法進行計數(shù)。其中前一種計數(shù)方法所得結果要比后一種計數(shù)方法所得結果 (填“大”或“小”)。(4)一位同學利用圖內的方法步驟在 4個平板培養(yǎng)基上分別接種0.1 mL 土壤稀釋液 ,培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為180、155、176、129個,則1 mL原土壤樣液中微生物 數(shù)量約為。解析(4)4個平板中菌落的平均數(shù)量為160個,濃度為1 600個/mL,由內圖可知, 土壤樣液被稀釋了 125倍,故原始樣液中微生物的密度為 1 600(個/mL) X 125= 2.0X105(j/mL)。答案(1)選擇培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基尿素(2)否剛果紅大(3)稀釋涂布平板血球計數(shù)板計數(shù)小(4)2.0X105 個6 .牛奶是微
12、生物培養(yǎng)的良好培養(yǎng)基,牛奶在飲前都要經過巴氏消毒,以殺死有害微 生物,為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況,做如圖所示操作。用無菌吸管從 錐形瓶中吸取1 mL生牛奶稀釋液至盛有9mL無菌水的試管中,混合均勻,如此再 重復2次。請回答下列有關問題:四mL無菌水+10 mL生牛奶QmL 9 mL 無菌水無菌水9 mL無菌水(1)巴氏消毒的方法是,使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是取最終的牛奶稀釋液0.1 mL滴在培養(yǎng)基上進行涂布,應選擇的涂布工具是圖中 的。ABCD圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法,理想情況下,培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成 菌落。若用該方法培養(yǎng)設置了 3個培養(yǎng)皿,菌落數(shù)分別為35個、33個、34個,則 可以推測生牛奶中每毫升含細菌數(shù)為個,運用這種方法統(tǒng)計的結果往往較實際值(填“偏大”或“偏小”),原因是(4)消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死,若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌 的數(shù)量,則在操作步驟上應做什么改動? o(5)從生牛奶取樣培養(yǎng)得到的菌落中, 混有各種雜菌, 從中檢測出大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加入 ,菌落具有 特征的可以認定為大腸桿菌。答案(1)7075 C煮30分鐘(80 C煮15分鐘)牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞(2)B(3)3.4X106偏小個別菌落可能是由2個或多個細菌形成的(4)稀釋次數(shù)減少(5)伊紅美藍(金
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