講：課題12：DNA的粗提取與鑒定

1、目的要求1 1、了解從細(xì)胞中提取、了解從細(xì)胞中提取DNADNA的基本原的基本原理理2 2、初步掌握、初步掌握DNADNA的粗提取和鑒定的粗提取和鑒定的方法的方法3 3、觀察提取出來的、觀察提取出來的DNADNA實驗思路1、DNA從哪提取？2、怎樣將DNA與細(xì)胞中的其他物質(zhì)分離？3、怎樣鑒定我們提取的DNA？實驗原理1. DNA1. DNA在在NaClNaCl溶液中的溶解度，是隨著溶液中的溶解度，是隨著NaClNaCl的濃的濃度的變化而改變的。當(dāng)度的變化而改變的。當(dāng)NaClNaCl的物質(zhì)的量濃度為的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol0.14 molL L時時,DNA,DNA的溶解度最低。的溶解度最低

2、。利用這一原利用這一原理，可以使溶解在理，可以使溶解在NaClNaCl溶液中的溶液中的DNADNA析出。析出。2.DNA2.DNA不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，可以進一則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的步提取出含雜質(zhì)較少的DNADNA。3.DNA3.DNA遇二苯胺（沸水?。境伤{色遇二苯胺（沸水?。境伤{色，因此，因此，二苯胺可以作為鑒定二苯胺可以作為鑒定DNADNA的試劑。的試劑。實驗材料和用具實驗材料：實驗材料：1 1、雞血細(xì)胞液（、雞血細(xì)胞液（510ml510ml）；）；2 2、體

3、積分?jǐn)?shù)為、體積分?jǐn)?shù)為95%95%的冷酒精溶液（實驗前置于的冷酒精溶液（實驗前置于冰箱內(nèi)冷卻冰箱內(nèi)冷卻24h24h）；）；3 3、蒸餾水；、蒸餾水；4 4、質(zhì)量濃度為、質(zhì)量濃度為0 0g/mlg/ml的檸檬酸鈉溶液；的檸檬酸鈉溶液； （抗凝劑）（抗凝劑）5 5、物質(zhì)的量濃度分別為、物質(zhì)的量濃度分別為2mol/L2mol/L和和0 0015mol/L015mol/L的的NaClNaCl溶液；溶液；6 6、二苯胺試劑。、二苯胺試劑。實驗用具：實驗用具：鐵架臺；鐵環(huán)；鑷子；三鐵架臺；鐵環(huán)；鑷子；三角架；酒精燈；石棉網(wǎng)；載玻片；玻角架；酒精燈；石棉網(wǎng)；載玻片；玻璃棒；濾紙；滴管；量筒（璃棒；濾紙；滴管；量筒（100ml100ml，一，一個）；燒杯；（個）；燒杯；（100ml100ml，一個，一個，50ml50ml、500ml500ml各二個）；試管（各二個）；試管（20ml20ml，二個）；，二個）；漏斗；試管夾；紗布。漏斗；試管夾；紗布。 本實驗中，本實驗中，要往雞血中加入抗凝劑要往雞血中加入抗凝劑(1)(1)先將新鮮的雞血離心，獲得雞血細(xì)胞先將新鮮的雞血離心，獲得雞血細(xì)胞(2)(2)在雞血細(xì)胞中加入一定量的蒸餾水，同時用在雞血細(xì)胞中加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪