樣本采集運(yùn)輸及送檢

1、對基層醫(yī)務(wù)人員的培訓(xùn)對基層醫(yī)務(wù)人員的培訓(xùn) 提高對人禽流感的發(fā)現(xiàn)報(bào)告能力提高對人禽流感的發(fā)現(xiàn)報(bào)告能力標(biāo)本采集、保存與送檢 自治區(qū)疾控中心 李新蘭 2008.4. 流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)?，F(xiàn)場標(biāo)本采集準(zhǔn)備工作標(biāo)本采集和現(xiàn)場檢測用品1)人感染高致病性禽流感病例或密切接觸者采樣登記表;2)采血用品:1Oml外螺旋帶密封墊圈螺口塑料管、醫(yī)用5ml或lOml一次性注射器針管或5ml真空針管、2ml血清管、帶有冰排的冰壺或冰包、止血帶、棉拭子、酒精、腆酒;3)采集鼻咽拭子用物品:鼻咽拭子保存管、15ml螺口管、3-5ml樣本運(yùn)送液（常用普通肉湯培養(yǎng)基、MEM、

2、等滲鹽溶液或磷酸鹽緩沖）、15ml螺口管,棉拭子;4）糞便、痰液、尸檢組織保存管:5Oml螺旋帶密封墊圈螺口塑料管;5)其他:油性記號筆;一次性紙杯、一次性紙漏斗、冰壺;污物袋;樣品編號標(biāo)簽紙或條碼紙。采集物品包v裝好VTM的樣品采集管v聚酯纖維拭子v無菌生理鹽水 (0.85% NaCl)v痰或粘液吸取管v壓舌板v采樣杯或平皿v吸管v其它樣品管v冰袋v采血的物品vPPEv防水的Marker筆,用于標(biāo)本的標(biāo)記現(xiàn)場標(biāo)本采集準(zhǔn)備工作 現(xiàn)場個(gè)人防護(hù)用品:手套、防護(hù)眼鏡、符合N95標(biāo)準(zhǔn)的防護(hù)口罩、全面型呼吸防護(hù)器、鞋套、白大衣、隔離衣、洗手液、75%酒精等消毒液等。采樣對象v單個(gè)不明原因肺炎病例當(dāng)縣級衛(wèi)

3、生行政部門組織的專家組會診后，仍不能排除SARS或人禽流感時(shí)v聚集性不明原因肺炎病例發(fā)現(xiàn)后立即采樣送檢標(biāo)本種類和采集時(shí)間（1）v臨床標(biāo)本呼吸道標(biāo)本v上呼吸道標(biāo)本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、深咳痰液v下呼吸道標(biāo)本：呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、肺組織活檢標(biāo)本v盡早采集上述標(biāo)本，發(fā)病一至兩周也可采集血清標(biāo)本v第一份血清應(yīng)盡早（最好在發(fā)病后7天內(nèi)）采集v第二份血清應(yīng)在發(fā)病后第34周采集v在病愈出院或死亡前采集血標(biāo)本1份糞便標(biāo)本v發(fā)病后盡可能早的采集糞便標(biāo)本標(biāo)本種類和采集時(shí)間（2）v尸檢標(biāo)本病人死亡后應(yīng)盡早進(jìn)行解剖，在嚴(yán)格按照生物安全防護(hù)的條件下，進(jìn)行尸檢主要采集肺、氣管、肝、腎、脾、心臟、腦

4、、胃、腸、淋巴結(jié)等可疑組織標(biāo)本同時(shí)采集血標(biāo)本、分泌物或滲出物沒有條件進(jìn)行尸體解剖的，可采集呼吸道灌洗液或經(jīng)皮穿刺采集肺組織標(biāo)本 v其他標(biāo)本可采集胸水、肺活檢標(biāo)本，還可采集枸櫞酸鹽抗凝血標(biāo)本采集方法-1v鼻拭子：將1根帶有聚丙烯纖維頭的拭子輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以另一拭子拭另側(cè)鼻孔。將拭子頭浸入采樣液中，尾部棄去，旋緊蓋管。v咽拭子：用2根帶有聚丙烯纖維頭的拭子擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，同樣將拭子頭浸入采樣液中，尾部棄去，旋緊蓋管。 注：注：亦可將鼻、咽拭子收集于同一采樣管中，以便提高分離率，減少工作量。v鼻咽抽取物：用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸

5、道分泌物。先將收集器頭部插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液3-5ml涮洗收集器3次。標(biāo)本采集方法-2v漱口液：用10 ml生理鹽水漱喉。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。然后，用平皿或燒杯收集洗液v鼻洗液：患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5 ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。然后讓患者低頭使生理鹽水流出，用平皿或燒杯收集洗液。重復(fù)此過程洗兩側(cè)鼻孔。標(biāo)本采集方法-3v深咳痰液：要求病人深咳后，將咳出的痰液收集于50ml含3ml采樣液的螺口塑料管中。v呼吸道灌洗液：將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管約30cm

6、深處，注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器（亦可用小孩道尿管接在50ml注射器上代替收集）。v胸水：在B超定位下進(jìn)行胸腔穿刺，抽取胸水5ml，至于無菌的塑料螺口管中。標(biāo)本采集方法-4v肺組織活檢標(biāo)本：在超聲或X線定位下，經(jīng)皮穿刺取肺組織活檢標(biāo)本，置于含3ml采樣液的塑料螺口管中。v尸檢標(biāo)本：每一個(gè)采集部位分別使用不同消毒器械，以防交叉污染；每種組織應(yīng)多部位取材，各部位應(yīng)取20-50g，淋巴節(jié)取2個(gè)。v糞便標(biāo)本：采集5-10g糞便置于含5-10ml采樣液的無菌螺口管中，嚴(yán)格密封。v血清標(biāo)本：用真空負(fù)壓采血管采集血液標(biāo)本5ml，室溫靜置

7、換30分鐘，1500-2000rpm離心10分鐘，收集血清于2ml無菌螺口塑料管中。咽拭子v容易操作v在可疑的病例中發(fā)現(xiàn)禽流感病毒的可能性較高v請病人盡量把嘴張開 v當(dāng)拭子觸及咽后時(shí)病人不要往后躲，應(yīng)該抵住咽拭子例子correctwrong2. 鼻咽拭子1.插入干的拭子到鼻孔伸入鼻咽部2.停留片刻3.緩慢旋轉(zhuǎn)退出鼻咽拭子4.另一個(gè)鼻孔使用另一個(gè)棉簽5.將棉簽的尾部折斷后放入含有VTM的采樣管中。3. 鼻咽吸取液的收集1.將吸液管與真空泵相連2.將軟管與上腭平行插入鼻孔3.使用真空泵4.緩慢的移出同時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)5.使用同一個(gè)管子采集另一鼻孔的液體6.收集的液體用3 ml VTM 沖洗出，放入采樣管中采集血液樣本Serum separator tubes (SST)標(biāo)本保存v醫(yī)院內(nèi)檢測的標(biāo)本可按本院規(guī)章對樣品進(jìn)行留樣及消毒處理。v用于病毒分離和核酸檢測的標(biāo)本應(yīng)盡快送樣進(jìn)行檢測24小時(shí)內(nèi)能檢測的標(biāo)本可置于4保存24小時(shí)內(nèi)無法檢測的標(biāo)本則應(yīng)置于-70或以下保存v如無70保存條件，則于20冰箱暫存v血清