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文檔簡介
1、生物化學與分子生物學考博歷年真題及答案2012生化分子一、名詞解釋1 .氧化磷酸化【答案】伴隨電子從底物到氧的傳遞,ADP被磷酸化形成ATP的酶促過程即是氧化磷酸化作用(oxidativephosphorylation)。氧化磷酸化的全過程可用方程式表示如下:NADH+H+3ADP+3Pi+1/2O2NAD+4H2O+3ATP2 .操縱子【答案】操縱子即基因表達的協(xié)調(diào)單位(coordinationunit),它們有共同的控制區(qū)(controlregion)和調(diào)節(jié)系統(tǒng)(regulationsystem)。操縱子包括在功能上彼此有關(guān)的結(jié)構(gòu)基因和控制部位,后者由啟動子(promoter,P)和操縱基
2、因(operator,O)所組成。一個操縱子的全部基因都排列在一起,其中雖然包括若干個結(jié)構(gòu)基因,可是通過轉(zhuǎn)錄形成的確是一條多順反子mRNA(polycistronicmRNA)。操縱子中的控制部位可接受調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物的調(diào)節(jié)。3 .非編碼RNA【答案】非編碼RNA(Non-codingRNA)是指不編碼蛋白質(zhì)的RNA其中包括rRNA,tRNA,snRNAsnoRNA和microRNA等多種已知功能的RNA,還包括未知功能的RNA這些RNA的共同特點是都能從基因組上轉(zhuǎn)錄而來,但是不翻譯成蛋白,在RNA水平上就能行使各自的生物學功能了。非編碼RNA從長度上來劃分可以分為3類:小于50nt,包括micr
3、oRNA,siRNA,piRNA;50nt至U500nt,包括rRNA,tRNA,snRNAsnoRNASLRNASRPRN曲等;大于500nt,包括長的mRNA-like的非編碼RNA長的不帶polyA尾巴的非編碼RNA等等。4 .表觀遺傳調(diào)控【答案】表觀遺傳學(epigenetics)則是指在基因的DN際列沒有發(fā)生改變的情況下,基因功能發(fā)生了可遺傳的變化,并最終導致了表型的變化。調(diào)節(jié)機制包括:DN砥飾指DNA共價結(jié)合一個修飾基團,使具有相同序列的等位基因處于不同修飾狀態(tài)非編碼RN頌控非編碼RN頌控是通過某些機制實現(xiàn)對基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控,如RNA干擾組蛋白修飾真核生物DNA被組蛋白組成的核小體緊
4、密包繞,組蛋白上的許多位點都可以被修飾,尤其是賴氨酸。組蛋白修飾可影響組蛋白與DNA鏈的親和性,從而改變?nèi)旧|(zhì)的疏松和凝集狀態(tài),進而影響轉(zhuǎn)錄因子等調(diào)節(jié)蛋白與染色質(zhì)的結(jié)合,影響基因表達染色質(zhì)重塑染色質(zhì)重塑是由染色質(zhì)重塑復合物介導的一系列以染色質(zhì)上核小體變化為基本特征的生物學過程核小體定位核小體是基因轉(zhuǎn)錄的障礙,被組蛋白緊密纏繞的DN蝠無法與眾多轉(zhuǎn)錄因子以及活化因子結(jié)合的。因此,核小體在基因組位置的改變對于調(diào)控基因表達有著重要影響。5 .代謝組【答案】代謝組是指生物體內(nèi)源性代謝物質(zhì)的動態(tài)整體。而傳統(tǒng)的代謝概念既包括生物合成,也包括生物分解,因此理論上代謝物應(yīng)包括核酸、蛋白質(zhì)、脂類生物大分子以及其他
5、小分子代謝物質(zhì)。代謝組學(metabonomics/metabolomics)是效仿基因組學和蛋白質(zhì)組學的研究思想,對生物體內(nèi)所有代謝物進行定量分析,并尋找代謝物與生理病理變化的相對關(guān)系的研究方式,是系統(tǒng)生物學的組成部分。其研究對象大都是相對分子質(zhì)量1000以內(nèi)的小分子物質(zhì)。單選1 .蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)包括:a螺旋3折疊3轉(zhuǎn)角和3凸起無規(guī)卷曲2 .鑒別精氨酸常用坂口反應(yīng)精氨酸與a-蔡酚在堿性次澳酸鈉(或次澳酸鉀)中發(fā)生反應(yīng),得到紅色產(chǎn)物3 .G+C含量越高,Tm值越高的原因是:G與C配對,形成3個氫鍵。4 .僅一個手性碳原子的構(gòu)型不同的非對映異構(gòu)體成為差向異構(gòu)體(epimer),如葡萄糖和甘露糖
6、,葡萄糖和半乳糖5 .多糖根據(jù)是由一種還是多種單糖單位組成可分為同多糖和雜多糖。同多糖包括淀粉,糖原,右旋糖酎,菊粉,纖維素,殼多糖;雜多糖包括果膠,半纖維素,瓊脂,角叉聚糖,藻酸或褐藻酸,樹膠或膠質(zhì)6 .外周蛋白可以用高濃度尿素或鹽溶液從生物膜上分離下來。這是因為外周蛋白通過與膜脂的極性頭部或內(nèi)在膜蛋白的離子相互作用和形成氫鍵與膜的內(nèi)、外表面弱結(jié)合的膜蛋白。(氫鍵結(jié)合力較弱且在外側(cè)易分離。)而整合蛋白是部分或全部鑲嵌在細胞膜中或內(nèi)外兩側(cè),以非極性氨基酸與脂雙分子層的非極性疏水區(qū)相互作用而結(jié)合在質(zhì)膜上(鑲嵌在細胞膜中或內(nèi)外兩側(cè),較難分離)跨膜蛋白是以疏水區(qū)跨越脂雙層的疏水區(qū),與脂肪酸鏈共價結(jié)合
7、,而親水的極性部分位于膜的內(nèi)外表面。這種蛋白質(zhì)跨越脂雙層,也稱跨膜蛋白(共價結(jié)合,較難分離)共價結(jié)合的糖類是以共價鍵結(jié)合于細胞膜外側(cè),由于是共價鍵所以結(jié)合比較牢固,不易分離7 .酶促反應(yīng)中決定酶專一性的部分是酶蛋白。8 .在人體內(nèi)可由膽固醇轉(zhuǎn)化來的維生素是維生素D9 .泛酸是輔酶A的一種成分,參與轉(zhuǎn)酰基作用。10 .胰島素對肌肉,脂肪,肝臟,皮膚等組織的各類細胞都有直接作用,在胰島素的生理濃度條件下,引起了糖異生作用的減弱。(糖異生是提高了血糖的含量)11 .位于線粒體內(nèi)膜上酶系統(tǒng)是電子傳遞呼吸鏈12 .輔酶Q又稱泛醍,以不同的形式在電子傳遞鏈中起傳遞電子的作用。在電子傳遞鏈中處于中心地位。1
8、3 .在糖酵解中,決定酵解速度關(guān)鍵反應(yīng)的步驟是其單獨具有的不可逆反應(yīng),即關(guān)鍵步驟,就是磷酸果糖激酶催化的由果糖-6-磷酸形成果糖-1,6-二磷酸的反應(yīng)。14 .檸檬酸TCA循環(huán)共有四個脫氫步驟,其中3對電子經(jīng)NADH專遞給電子傳遞鏈,最后和氧結(jié)合生成水。每循環(huán)一次形成10個ATP分子。15 .在脂肪酸的合成中,碳鏈的延長需要丙二酸單酰輔酶A16 .細菌和人共有的代謝途徑是役足核甘酸的合成,糖的有氧氧化,脂肪酸的8氧化17 .紫外光照射可以使DNA分子中同一條鏈兩相鄰胸腺喀咤堿基之間形成二聚體18 .逆轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板合成DNA逆轉(zhuǎn)錄酶是多功能酶,既能利用RNA為模板合成互補的DNA鏈,還可
9、以在新合成的DNAB1上合成另一條互補的DNA鏈,并且除了聚合酶活力外,它尚具有水解RNA的活力。當以其自身病毒類型的RNA作為模板時,逆轉(zhuǎn)錄酶表現(xiàn)出最大的逆轉(zhuǎn)錄酶活力,但是帶有適當引物的任何種類RNAIB能作為合成DNA的模板。19 .在糖酵解途徑中,由己糖激酶,磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶催化的反應(yīng)實際上都是不可逆反應(yīng),因此,這三種酶都具有調(diào)節(jié)糖酵解途徑的作用。它們的活性受到變構(gòu)效應(yīng)物(allostericeffectors)可逆地結(jié)合以及酶共價修飾的調(diào)節(jié)20 .順式作用元件(cis-actingelement)存在于基因旁側(cè)序列中能影響基因表達的序列。包括啟動子,增強子,調(diào)控序列和可誘導元件
10、等,它們的作用是參與基因表達的調(diào)控。是非判斷題1 .蛋白質(zhì)在其水溶液中表現(xiàn)出溶解度最小時的pH值通常就是它的等電點。2 .重復二、中的第19題3 .三竣酸循環(huán)本身不需要氧氣參與,但是循環(huán)過程中需要還原型輔酶(如NADH,FADH等),而這些輔酶會在呼吸進入三竣酸循環(huán)前通過電子傳遞鏈被氧化,所以三竣酸循環(huán)被認為是一個耗氧途徑。4 .生物膜的流動性,既包括膜脂,也包括膜蛋白的運動狀態(tài)。流動性是生物膜結(jié)構(gòu)的主要特征。膜脂的基本組分是磷脂。膜脂運動的方式主要有a磷脂分子在膜內(nèi)作側(cè)向擴散或側(cè)向移動。b磷脂分子在脂雙層中作翻轉(zhuǎn)運動。c磷脂煌鏈圍繞C-C鍵旋轉(zhuǎn)導致異構(gòu)化運動。d磷脂分子圍繞與膜平面相垂直的軸
11、左右擺動。e磷脂分子圍繞與膜平面相垂直的軸作旋轉(zhuǎn)運動。5 .物質(zhì)從高濃度的一側(cè),通過膜運輸?shù)降蜐舛鹊囊粋?cè),即順濃度梯度的方向跨膜運輸?shù)倪^程稱為被動運輸。如一些離子或分子通過簡單的擴散作用進入或出膜。凡物質(zhì)逆濃度梯度的運輸過程稱為主動運輸。其特點是專一性,運輸速度可以達到飽和,方向性,選擇性抑制,需要提供能量。主動運輸過程的進行,需要兩個體系的存在,一是參與運輸?shù)膫鬟f體(多肽或蛋白質(zhì)構(gòu)成的載體或通道),二是由酶或酶系組成的能量傳遞系統(tǒng)。6 .在有催化劑參與反應(yīng)時,由于催化劑能瞬時地與反應(yīng)物結(jié)合成過渡態(tài),因而降低了反應(yīng)所需的活化能。7 .為區(qū)別傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)催化劑的酶,具有催化活性的RN原名為rib
12、ozyme。、8 .酶抑制劑分不可逆的抑制作用和可逆的抑制作用。前者抑制劑與酶以共價鍵結(jié)合,后者以非共價鍵結(jié)合??赡嬉种朴址譃槿N,競爭性抑制使酶的活性部位不能同時既與底物結(jié)合又與抑制劑結(jié)合,非競爭性抑制底物和抑制劑同時與酶結(jié)合但三元復合物不能進一步分解為產(chǎn)物,反競爭抑制酶與底物結(jié)合后,才能與抑制劑結(jié)合。9 .核酸的紫外吸收與溶液的pH值有關(guān)。在不同pH溶液中喋吟、喀咤堿基互變異構(gòu)的情況不同,紫外吸收光也隨之表現(xiàn)出明顯的差異,它們的摩爾消光系數(shù)也隨之不同.所以,在測定核酸物質(zhì)時均應(yīng)在固定的pH溶液中進行.10 .花椰菜花葉病毒是典型的植物病毒,屬于植物雙鏈DNAW毒。11 .維生素B1維持人體
13、正常的新陳代謝和神經(jīng)系統(tǒng)的正常生理功能。缺乏會引起神經(jīng)炎,食欲不振,消化不良和腳氣病。12 .生物素(維生素H):由曝吩環(huán)和尿素結(jié)合而成的一個雙環(huán)化合物。生理功能:生物素在種種酶促竣化反應(yīng)中作為活動竣基載體。13 .當溶液的PH值升高時,ATP水解釋放的自由能明顯增高。在pH為6時,磷酸基團比在pH為5時更容易離子化,結(jié)果增強了它們的靜電排斥,因此增加了水解的AG(即釋放的自由能更多)14 .化學中“鍵能”的含義是指斷裂一個化學鍵所需要提供的能量。生物化學中所說的高能鍵是指該鍵水解時所釋放出的大量自由能。15 .PH值下降時,氫離子對磷酸果糖激酶的活性有抑制作用。16 .乙醛酸循環(huán)在植物和微生
14、物中替代了檸檬酸循環(huán)。乙醛酸循環(huán)主要出現(xiàn)在植物和微生物。乙醛酸循環(huán)和三竣酸循環(huán)中存在著某些相同的酶類和中間產(chǎn)物.但是,它們是兩條不同的代謝途徑.乙醛酸循環(huán)是在乙醛酸體中進行的,是與脂肪轉(zhuǎn)化為糖密切相關(guān)的反應(yīng)過程.而三竣酸循環(huán)是在線粒體中完成的,是與糖的徹底氧化脫竣密切相關(guān)的反應(yīng)過程。油料植物種子發(fā)芽時把脂肪車t化為碳水化合物是通過乙醛酸循環(huán)來實現(xiàn)的.這個過程依賴于線粒體、乙醛酸體及細胞質(zhì)的協(xié)同作用。17 .脂肪酸3氧化酶系存在于細胞之中,降解始發(fā)于竣基端第二位碳原子。18 .動物細胞中的脂肪酸合成發(fā)生在細胞質(zhì)內(nèi),其合成途徑不同于氧化途徑。脂肪酸合成的原料是乙酰CoA,它是通過檸檬酸轉(zhuǎn)運系統(tǒng)由線
15、粒體轉(zhuǎn)運到細胞質(zhì)中。檸檬酸轉(zhuǎn)運系統(tǒng)和戊糖磷酸途徑提供脂肪酸生物合成所需要的NADPH19 .在細菌中,天冬氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(ATCase)是喀咤核甘酸從頭合成的主要調(diào)節(jié)酶。在大腸桿菌中,ATCase受ATP的變構(gòu)激活,而CTP為其變構(gòu)抑制劑。而在許多細菌中、UTP是ATCase的主要變構(gòu)抑制劑。20. DNA聚合酶和RNAm合酶的催化作用都需要模板和引物。相同點:都能以DNA為模板,從5'向3'進行核甘酸或脫氧核甘酸的聚合反應(yīng)。不同點:1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTPDNA聚合酶底物是dNTR2、RNAm合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合
16、酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶沒有,當需要解開雙鏈的時候要解旋酶和拓撲異構(gòu)酶的幫助。4、RNA聚合酶只具有5'到3'端的聚合酶活性,而DNA聚合酶不僅有5'到3'端的聚合酶活性,還具有3'到5'端的外切酶活性。保證DNAM制時候校對,所以復制的忠實性高于轉(zhuǎn)錄的。5、RNAM合酶通常作用于轉(zhuǎn)錄過程;DNA聚合酶通常作用于DNAM制過程21 .真核生物的tRNA前體的3'端不含CCA序列,成熟分子中的是后來加上去的。22 .氨基酸的極性通常由密碼子的第二位堿基決定,而簡并性由第三位堿基決定。23 .喋吟霉素(Puromycin)結(jié)構(gòu)
17、與酪氨酰-tRNA相似,從而取代一些氨基酰tRNA進入核糖體的A位,當延長中的肽轉(zhuǎn)入此異常A位時,容易脫落,終止肽鏈合成。由于喋吟霉素對原核和真核生物的翻譯過程均有干擾干擾作用,故難于用做抗菌藥物,有人試用于腫瘤治療。24 .信號肽序列通常在被轉(zhuǎn)運多肽鏈的N端,這些序列在10-40個氨基酸殘基范圍,氨基酸至少含有一個帶正電荷的氨基酸,在中部有一段長度為10-15個氨基酸殘基的由高度疏水性的氨基酸組成的肽鏈。25 .細胞代謝途徑具有單向性,即分解代謝和合成代謝各有其自身的途徑,因而有利于代謝調(diào)節(jié)機制。26 .與乳糖代謝有關(guān)的酶合成常常被阻遏,只有當細菌以乳糖為唯一碳源時,這些酶才能被誘導合成。2
18、7 .逆轉(zhuǎn)錄酶和DNAm合酶一樣,都以4種dNTP為底物,合成DNA寸需要引物,都具有校對功能。28 .基因表達的調(diào)節(jié)可以再不同水平上進行,在轉(zhuǎn)錄水平(包括轉(zhuǎn)錄前、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后),或在翻譯水平(包括翻譯和翻譯后).原核生物和真核生物的基因表達調(diào)控是不同的.原核生物的基因表達調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平上.最主要的機制是Jacob和Monod提出的操縱子模型.而在翻譯水平上的調(diào)節(jié)主要有:不同mRNAffl譯起始頻率和速度差異,翻譯阻遏,反義RNA勺作用等.真核生物基因不組成操縱子,不形成多順反子MRNASC核生物的基因表達受到多級調(diào)控系統(tǒng)的調(diào)節(jié).轉(zhuǎn)錄前:DNA斷裂、刪除、擴增、重排、修飾和異染色質(zhì)化等
19、改變基因結(jié)構(gòu)和活性.轉(zhuǎn)錄水平:染色質(zhì)的活化(組蛋白修飾使染色質(zhì)疏松化)和基因的活化(順式作用原件,反式作用因子).轉(zhuǎn)錄后:轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工和轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié).翻譯水平:控制mRN陸穩(wěn)定性和有選才i地進行翻譯.翻譯后:控制多肽鏈的加工和折疊.29 .增強子能大大增強啟動子的活性。增強子有別于啟動子處有兩點:1增強子對于啟動子的位置不固定,而能有很大的變動;2它能在兩個方向產(chǎn)生相互作用。一個增強子并不限于促進某一特殊啟動子的轉(zhuǎn)錄,它能刺激在它附近的任一啟動子。30 .高等動物的基因表達具有更加精細的調(diào)節(jié),其中,可變剪切和翻譯后修飾不是其特異的調(diào)節(jié)方式。表觀遺傳和蛋白質(zhì)翻譯后修飾在細菌耐藥中的作用。四、簡答題
20、1 .簡述所有的順式調(diào)控元件及其功能在真核基因中存在很多的順式調(diào)控序列,這些DNA列被稱為順式作用元件(Cis-actingelements),指與結(jié)構(gòu)基因表達調(diào)控相關(guān),能夠被調(diào)控蛋白特異性識別和結(jié)合的DN際列,包括啟動子、增強子、上游啟動子元件、反應(yīng)元件、加尾信號等。順式作用元件通過與反式作用因子(trans-actingfactors)的相互作用來調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性,但并非都位于轉(zhuǎn)錄起始點上游。2 .轉(zhuǎn)錄因子的幾種結(jié)構(gòu)基序(motif)?鋅指基序組成DNA結(jié)合域:鋅指包含約23個氨基酸殘基組成的環(huán),它伸出鋅結(jié)合位點,該結(jié)合位點由半胱氨酸和組氨酸組成。鋅指蛋白常有多個鋅指,鋅指的C端形成“螺旋
21、,它結(jié)合一圈DNA大溝。類同醇受體,是一組功能相關(guān)的蛋白質(zhì),每個受體都通過與一個特定的類固醇結(jié)合而被激活。它們的通用模式是:在結(jié)合小分子配體之前,這些蛋白質(zhì)都處于失活狀態(tài)。亮氨酸拉鏈包括一連串氨基酸,其中每第七個為一個亮氨酸,兩條肽鏈通過亮氨酸拉鏈相互作用,形成二聚體,拉鏈相鄰的是一段參與結(jié)合DNA勺正電殘基。3 .如何看待RNAJ能的多樣性,它們的核心作用是什么?RNA勺功能主要有:遺傳信息的加工;控制蛋白質(zhì)的合成;作用于RNA轉(zhuǎn)錄后加工與修飾;參與細胞功能的調(diào)節(jié);生物催化與其他細胞持家功能;可能是生物進化時比蛋白質(zhì)和DNAM早出現(xiàn)的生物大分子。其核心作用是既可以作為信息分子,又可以作為功能
22、分子。4 .某一個基因的編碼序列中發(fā)生了一個堿基的突變,那么這個基因的表達產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)上,功能上可能發(fā)生哪些改變?1) .突變后的編碼序列仍然編碼同一個氨基酸。沒有任何變化2) .突變形成終止密碼,產(chǎn)物在變異處中斷,產(chǎn)生一個縮短的產(chǎn)物,失去功能3) .突變后編碼了一個氨基酸。根據(jù)氨基酸的性質(zhì),可以有不同的變化。如果非極性氨基酸變?yōu)闃O性氨基酸,或者相反,那么得到的氨基酸結(jié)構(gòu)就會被破壞。有可能沒有功能。如果是同一性質(zhì)的氨基酸,而且又不在蛋白活性的中心,那該產(chǎn)物還會保持原有的活性。5.簡述檸檬酸循環(huán)的概況及其作用檸檬酸循環(huán)(citricacidcycle):也稱為三竣酸循環(huán)(tricarboxylic
23、acidcycle,TCA循環(huán),TCA),Krebs循環(huán)。是將乙酰CoA中的乙?;趸啥趸己瓦€原當量的酶促反應(yīng)的循環(huán)系統(tǒng),該循環(huán)的第一步是由乙酰CoA與草酰乙酸縮合形成檸檬酸。反應(yīng)物乙酰輔酶A(Acetyl-CoA)是糖類、脂類、氨基酸代謝的共同的中間產(chǎn)物,進入循環(huán)后會被分解最終生成產(chǎn)物二氧化碳并產(chǎn)生H,H將傳遞給輔酶I-尼克酰胺腺喋吟二核甘酸(NAD+)(或者叫煙酰胺腺喋吟二核甘酸)和黃素腺喋吟二核甘酸(FAD),使之成為NADH+H+和FADH2NADH+H+和FADH2攜帶H進入呼吸鏈,呼吸鏈將電子傳遞給O2產(chǎn)生水,同時偶聯(lián)氧化磷酸化產(chǎn)生ATP,提供能量。真核生物的線粒體基質(zhì)和原核
24、生物的細胞質(zhì)是三竣酸循環(huán)的場所。它是呼吸作用過程中的一步,之后高能電子在NAHDH+和FADH對輔助下通過電子傳遞鏈進行氧化磷酸化產(chǎn)生大量能量。五、問答題1 .重組DNA的基本步驟一個典型的DNA1組包括五個步驟:(1)目的基因的獲取目前,獲取目的基因的方法主要有三種:反向轉(zhuǎn)錄法、從細胞基因組直接分離法和人工合成法。反向轉(zhuǎn)錄法是利用mRN版轉(zhuǎn)錄獲得目的基因的方法。從細胞基因組中直接分離目的基因常用,因為這種方法猶如用散彈打鳥,所以又稱"散彈槍法"。用分離目的基因,具有簡單、方便和經(jīng)濟等優(yōu)點。許多病毒和原核生物、一些真核生物的基因,都用這種方法獲得了成功的分離?;瘜W合成目白基
25、因是20世紀70年代以來發(fā)展起來的一項新技術(shù)。應(yīng)用化學合成法,可在短時間內(nèi)合成目的基因??茖W家們已相繼合成了人的生長激素釋放抑制素、胰島素、干擾素等蛋白質(zhì)的編碼基因。(2)DNA子的體外重組體外重組是把載體與目的基因進行連接。例如,以質(zhì)粒作為載體時,首先要選擇出合適的限制性內(nèi)切酶,對目的基因和載體進行切割,再以DNA1接酶使切口兩端的脫氧核甘酸連接,于是目的基因被鑲嵌進質(zhì)粒DNA重組形成了一個新的環(huán)狀DNA子(雜種DNA分子)。(3)DNA重組體的導入把目的基因裝在載體上后,就需要把它引入到受體細胞中。導入的方式有多種,主要包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導、顯微注射、微粒轟擊和電擊穿孔等方式。轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導主要適用
26、于細菌一類的原核生物細胞和酵母這樣的低等真核生物細胞,其他方式主要應(yīng)用于高等動植物的細胞。(4)受體細胞的篩選由于DNAt組體的轉(zhuǎn)化成功率不是太高,因而,需要在眾多的細胞中把成功轉(zhuǎn)入DNA重組體的細胞挑選出來。應(yīng)事先找到特定的標志,證明導入是否成功。(5)基因表達目的基因在成功導入受體細胞后,它所攜帶的遺傳信息必須要通過合成新的蛋白質(zhì)才能表現(xiàn)出來,從而改變受體細胞的遺傳性狀。目的基因在受體細胞中要表達,需要滿足一些條件。例如,目的基因是利用受體細胞的核糖體來合成蛋白質(zhì),因此目的基因上必須含有能啟動受體細胞核糖體工作的功能片段。2 .真核基因表達調(diào)控的特點盡管我們現(xiàn)在對真核基因表達調(diào)控知道還不多
27、,但與原核生物比較它具有一些明顯的特點。真核基因表達調(diào)控的環(huán)節(jié)更多。如前所述:基因表達是基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯、產(chǎn)生有生物活性的蛋白質(zhì)的整個過程。同原核生物一樣,轉(zhuǎn)錄依然是真核生物基因表達調(diào)控的主要環(huán)節(jié)。但真核基因轉(zhuǎn)錄發(fā)生在細胞核(線粒體基因的轉(zhuǎn)錄在線粒體內(nèi)),翻譯則多在胞漿,兩個過程是分開的,因此其調(diào)控增加了更多的環(huán)節(jié)和復雜性,轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控占有了更多的分量。圖中標出了真核細胞在分化過程中會發(fā)生基因重排(generearrangement),即胚原性基因組中某些基因會再組合變化形成第二級基因。例如編碼完整抗體蛋白的基因是在淋巴細胞分化發(fā)育過程中,由原來分開的幾百個不同的可變區(qū)基因經(jīng)選擇、組合、變化
28、、與恒定區(qū)基因一起構(gòu)成穩(wěn)定的、為特定的完整抗體蛋白編碼的可表達的基因。這種基因重排使細胞可能利用幾百個抗體基因的片段,組合變化而產(chǎn)生能編碼達108種不同抗體的基因,其中就有復雜的基因表達調(diào)控機理。此外,真核細胞中還會發(fā)生基因擴增(geneamplification),即基因組中的特定段落在某些情況下會復制產(chǎn)生許多拷貝。最早發(fā)現(xiàn)的是蛙的成熟卵細胞在受精后的發(fā)育程中其rRNA基因(可稱為rDNA)可擴增2000倍,以后發(fā)現(xiàn)其他動物的卵細胞也有同樣的情況,這很顯然適合了受精卵其后迅速發(fā)育分裂要合成大量蛋白質(zhì)要求有大量核糖體的需要。又如MTX(methotrexate)是葉酸的結(jié)構(gòu)類似物,能競爭性抑制
29、細胞對葉酸的還原利用,因而對細胞有毒性,但當緩慢提高MTX濃度時,一些哺乳類細胞會對含有利用葉酸所必需的二氫葉酸還原酶(dihydrofolatereductase,DHFR)基因的DNAE段擴增40-400倍,使DHFR勺表達量顯著增加,從而提高對MTX勺抗性?;虻臄U增無疑能夠大幅度提高基因表達產(chǎn)物的量,但這種調(diào)控機理至今還不清楚。真核基因的轉(zhuǎn)錄與染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化相關(guān)。真核基因組DNA色大部分都在細胞核內(nèi)與組蛋白等結(jié)合成染色質(zhì),染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)、染色質(zhì)中DN解口組蛋白的結(jié)構(gòu)狀態(tài)都影響轉(zhuǎn)錄,至少有以下現(xiàn)象:灌T'.1種?*"if:$BL民染色質(zhì)結(jié)構(gòu)影響基因轉(zhuǎn)錄細胞分裂時染色體的
30、大部分到間期時松開分散在核內(nèi),稱為常染色質(zhì)(euchromatin),松散的染色質(zhì)中的基因可以轉(zhuǎn)錄。染色體中的某些區(qū)段到分裂期后不像其他部分解旋松開,仍保持緊湊折疊的結(jié)構(gòu),在間期核中可以看到其濃集的斑塊,稱為異染色質(zhì)(hetrochromatin),其中從未見有基因轉(zhuǎn)錄表達;原本在常染色質(zhì)中表達的基因如移到異染色質(zhì)內(nèi)也會停止表達;哺乳類雌體細胞2條X染色體,到間期一條變成異染色質(zhì)者,這條X染色體上的基因就全部失活??梢娋o密的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)阻止基因表達。組蛋白的作用早期體外實驗觀察到組蛋白與DNA結(jié)合阻止DNA上基因的轉(zhuǎn)錄,去除組蛋白基因又能夠轉(zhuǎn)錄。組蛋白是堿性蛋白質(zhì),帶正電荷,可與DNAB1上帶負
31、電荷的磷酸基相結(jié)合,從而遮蔽了DNA子,妨礙了轉(zhuǎn)錄,可能扮演了非特異性阻遏蛋白的作用;染色質(zhì)中的非組蛋白成分具有組織細胞特異性,可能消除組蛋白的阻遏,起到特異性的去阻遏促轉(zhuǎn)錄作用。發(fā)現(xiàn)核小體后,進一步觀察核小體結(jié)構(gòu)與基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)活躍進行基因轉(zhuǎn)錄的染色質(zhì)區(qū)段常有富含賴氨酸的組蛋白(H1組蛋白)水平降低、H2AH2B組蛋白二聚體不穩(wěn)定性增加、組蛋白乙?;?acetylation)和泛素化(obiquitination)、以及H3組蛋白疏基等現(xiàn)象,這些都是核小體不穩(wěn)定或解體的因素或指徵。轉(zhuǎn)錄活躍的區(qū)域也常缺乏核小體的結(jié)構(gòu)。這些都表明核小體結(jié)構(gòu)影響基因轉(zhuǎn)錄。轉(zhuǎn)錄活躍區(qū)域?qū)怂崦缸髅舾卸仍黾尤旧?/p>
32、質(zhì)DNA受DNasel作用通常會被降解成200、400bp的片段,反映了完整的核小體規(guī)則的重復結(jié)構(gòu)。但活躍進行轉(zhuǎn)錄的染色質(zhì)區(qū)域受DNasel消化常出現(xiàn)100-200bp的DNA片段,且長短不均一,說明其DNA受組蛋白掩蓋的結(jié)構(gòu)有變化,出現(xiàn)了對DNasel高敏感點(hypersensitivesite)。這種高敏感點常出現(xiàn)在轉(zhuǎn)錄基因的5/側(cè)區(qū)(5,flankingregion)、3/末端或在基因上,多在調(diào)控蛋白結(jié)合位點的附近,分析該區(qū)域核小體的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,有利于調(diào)控蛋白的結(jié)合而促進轉(zhuǎn)錄.DNA拓撲結(jié)構(gòu)變化天然雙鏈DNA的構(gòu)象大多是負性超螺旋。當基因活躍轉(zhuǎn)錄時,RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄方向前方DNA的構(gòu)
33、象是正性超螺旋,其后面的DNA為負性超螺旋。正性超螺旋會拆散核小體,有利于RNAm合酶向前移動轉(zhuǎn)錄;而負性超螺旋則有利于核小體的再形成。DNAM基修飾變化真核DNA中的胞喀咤約有5蹴甲基化為5-甲基胞喀咤(5-methylcytidine,mC,而活躍轉(zhuǎn)錄的DNA段落中胞喀咤甲基化程度常較低。這種甲基化最常發(fā)生在某些基因5/側(cè)區(qū)的CpG序列中,實驗表明這段序列甲基化可使其后的基因不能轉(zhuǎn)錄,甲基化可能阻礙轉(zhuǎn)錄因子與DNA寺定部位的結(jié)合從而影響轉(zhuǎn)錄。如果用基因打靶的方法除去主要的DNA甲基化酶,小鼠的胚胎就不能正常發(fā)育而死亡,可見DNA勺甲基化對基因表達調(diào)控是重要的。由此可見,染色質(zhì)中的基因轉(zhuǎn)錄前
34、先要有一個被激活的過程,目前對這激活機制還缺乏認識。真核基因表達以正性調(diào)控為主在真核RNAm合酶對啟動子的親和力很低,基本上不能獨靠其自身來起始轉(zhuǎn)錄,而是需要依賴多種激活蛋白的協(xié)同作用。真核基因調(diào)控中雖然也發(fā)現(xiàn)有負性調(diào)控元件,但其存在并不普遍;真核基因轉(zhuǎn)錄表達的調(diào)控蛋白也有起阻遏和激活作用或兼有兩種作用者,但總的是以激活蛋白的作用為主。即多數(shù)真核基因在沒有調(diào)控蛋白作用時是不轉(zhuǎn)錄的,需要表達時就要有激活的蛋白質(zhì)來促進轉(zhuǎn)錄。換言之:真核基因表達以正性調(diào)控為主導。3 .原癌基因的定義,特點,活化機制和作用。定義:腫瘤是由環(huán)境因素和遺傳因素相互作用所導致的一類疾病,腫瘤的發(fā)生與基因的改變有關(guān)。癌基因和
35、抑癌基因都是在細胞生長、增殖調(diào)控中起重要作用的基因。原癌基因(細胞癌基因)是指存在于生物正常細胞基因組中的癌基因。正常情況下,存在于基因組中的原癌基因處于低表達或不表達狀態(tài),并發(fā)揮重要的生理功能。但在某些條件下,如病毒感染、化學致癌物或輻射作用等,原癌基因可被異常激活,轉(zhuǎn)變?yōu)榘┗?,誘導細胞發(fā)生癌變。特點:1 .普遍性廣泛存在于生物界中。2 .保守性在進化過程中,基因序列具有高度保守性。3 .重要性存在于正常細胞不僅無害,而且對維持正常生理功能、調(diào)控細胞生長和分化起重要作用。4 .危害性在某些因素作用下,原癌基因一旦被激活,發(fā)生數(shù)量或結(jié)構(gòu)上的變化時,就可能導致正常細胞癌變?;罨瘷C制:稱為原癌基
36、因的活化。原癌基因活化的機制主要有從正常的原癌基因轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂惺辜毎D(zhuǎn)化功能的癌基因的過程,四種:獲得強啟動子與增強子;染色體易位;基因擴增;點突變。產(chǎn)物和功能:1 .細胞外生長因子作用于細胞膜上的受體或直接被傳遞至細胞內(nèi),通過蛋白激酶活化轉(zhuǎn)錄因子,引發(fā)一系列基因的轉(zhuǎn)錄激活。2 .跨膜生長因子受體接受細胞外的生長信號并將其傳入細胞內(nèi)。3 .細胞內(nèi)信號傳導分子將接收到的信號由胞內(nèi)傳至核內(nèi),促進細胞增殖。4 .核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子某些癌基因表達蛋白定位于細胞核內(nèi),與靶基因的順式調(diào)控元件相結(jié)合直接調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄活性。4.喋吟和喀咤的從頭合成途徑有何區(qū)別,分別有什么氨基酸參與喋吟核甘酸從頭合成的特點是:喋吟核
37、甘酸是在磷酸核糖分子基礎(chǔ)上逐步合成的,不是首先單獨合成喋吟堿然后再與磷酸核糖結(jié)合的。喋吟核甘酸的從頭合成指,在肝臟、小腸粘膜和胸腺等器官中,以磷酸核糖、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、一碳單位及CO冷為原料合成喋吟核甘酸的過程。主要反應(yīng)步驟分為兩個階段:首先合成次黃喋吟核甘酸(IMP),然后IMP再轉(zhuǎn)變成腺喋吟核甘酸(AMP與鳥喋吟核甘酸(GMP。喋吟環(huán)各元素來源如下:N1由天冬氨酸提供,C2由N10-甲酰FH4提供、C8由N5,N10-甲快FH4提供,N&N9由谷氨酰胺提供,C4CSN7由甘氨酸提供,C6由CO2提供??搴烁仕岷铣梢灿袃蓷l途徑:即從頭合成和補救合成。本節(jié)主要論述其從頭合
38、成途徑。(一)喀咤核甘酸的從頭合成與喋吟合成相比,喀咤核甘酸的從頭合成較簡單,同位素示蹤證明,構(gòu)成喀咤環(huán)的N1、C4C5及C6均由天冬氨酸提供,C3來源于CO2N3來源于谷氨酰胺喀咤核甘酸的合成是先合成喀咤環(huán),然后再與磷酸核糖相連而成的。1 .尿喀咤核甘酸(UMP)的合成,由6步反應(yīng)完成:1)合成氨基甲酰磷酸(carbamoylphosphate):喀咤合成的第一步是生成氨基甲酰磷酸,由氨基甲酰磷酸合成酶n(carbamoylphosphatesynthetasen,CPS-n)催化CO2與谷氨酰胺的縮合生成。正如氨基酸代謝中所討論的,氨基甲酰磷酸也是尿素合成的起始原料。但尿素合成中所需氨基甲
39、酰磷酸是在肝線粒體中由CPS-I催化合成,以NH3為氮源;而喀咤合成中的氨基甲酰磷酸在胞液中由CPSn催化生成,利用谷氨酰胺提供氮源。CPS-I和CPSn的比較見下表1。(2)合成甲酰天冬氨酸(carbamoylaspartate):由天冬氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(aspartatetranscarbamoylase,ATCase)催化天冬氨酸與氨基甲酰磷酸縮合,生成氨基甲酰天冬氨酸(carbamoylaspartate)。此反應(yīng)為喀咤合成的限速步驟。ATCase是限速酶,受產(chǎn)物的反饋抑制。不消耗ATP,由氨基甲酰磷酸水解供能。閉環(huán)生成二氫乳清酸(dihydroortate):由二氫乳清酸酶(dih
40、yolroorotase)催化氨基甲酰天冬氨酸脫水、分子內(nèi)重排形成具有喀咤環(huán)的二氫乳清酸。(4)二氫乳清酸的氧化:由二氫乳清酸還原酶(dihydroorotatedehyolrogenase)催化,二氫乳清酸氧化生成乳清酸(orotate)。此酶需FM明口非血紅素Fe2+,位于線粒體內(nèi)膜的外側(cè)面,由醍類(quinones)提供氧化能力,喀咤合成中的其余5種酶均存在于胞液中。(5)獲得磷酸核糖:由乳清酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶催化乳清酸與PRPP反應(yīng),生成乳清酸核甘酸(orotidine-5'-monophosphate,OMP)由PRPPtK解供能。(6)脫竣生成UMP由OMFB竣酶(ompde
41、carboxylase)催化OMFB竣生成UMPJones等研究表明,在動物體內(nèi)催化上述喀咤合成的前三個酶,即CPSn,天冬氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶和二氫乳清酸酶,位于分子量約210kD的同一多肽鏈上,是一個多功能酶;因此更有利于以均勻的速度參與喀咤核甘酸的合成。與此相類似,反應(yīng)(5)和(6)的酶(乳清酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶和OMP兌竣酶)也位于同一條多肽鏈上。喋吟核甘酸合成的反應(yīng)(3)、(4)、(6),反應(yīng)(7)和(8)及反應(yīng)(10)和(11)也均為多功能酶。這些多功能酶的中間產(chǎn)物并不釋放到介質(zhì)中,而在連續(xù)的酶間移動,這種機制能加速多步反應(yīng)的總速度,同時防止細胞中其它酶的破壞。2 .UTP和CTP的合成
42、三磷酸尿甘(UTP)的合成與三磷酸喋吟核昔的合成相似三磷酸胞甘(CTP)由CTP合成酶(CTPsynthetase)催化UTP加氨生成。(圖3)動物體內(nèi),氨基由谷氨酰胺提供,在細菌則直接由NH3提供。此反應(yīng)消耗1分子ATP。3 .喀咤核甘酸從頭合成的調(diào)節(jié)在細菌中,天冬氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(ATCase)是喀咤核甘酸從頭合成的主要調(diào)節(jié)酶。在大腸桿菌中,ATCase受ATP的變構(gòu)激活,而CTP為其變構(gòu)抑制劑。而在許多細菌中、UTP是ATCase的主要變構(gòu)抑制劑。在動物細胞中,ATCase不是調(diào)節(jié)酶??搴烁仕岷铣芍饕蒀PS-n調(diào)控。UDfflUTP抑制其活性,而ATP和PRPP為其激活劑。第二水平
43、的調(diào)節(jié)是OMP兌竣酶,UMP口CM斯其競爭制劑。(圖4)此外,OMP勺生成受PRPP勺影響4 .乳清酸尿癥(Oroticaciduria)乳清酸尿癥是一種遺傳性疾病,主要表現(xiàn)為尿中排出大量乳清酸、生長遲緩和重度貧血。是由于催化喀咤核甘酸從頭合成反應(yīng)(5)和(6)的雙功能酶的缺陷所致。臨床用尿喀咤或胞喀咤治療。尿喀咤經(jīng)磷酸化可生成UMP抑制CPSn活性,從而抑制喀咤核甘酸的從頭合成2013年一、名詞解釋核小體nucleosome染色體的結(jié)構(gòu)單位,由組蛋白和200bp的DNA5(螺旋組成的重復結(jié)構(gòu)單位。小體的核心由4種組蛋白的8個分子組成八聚體即H2AH2BH3、H44種組蛋白,每種兩個分子。組蛋
44、白核心的外面纏繞了1.75圈的DNA雙螺旋,約165個堿基對,其進出頭處結(jié)合有H1組蛋白。核小體的直徑約10nmi米氏常數(shù)Michaelisconstant定濃度底物與酶反應(yīng)的動力學常數(shù)。其數(shù)值等于在全部底物飽和濃度下,產(chǎn)生最大反應(yīng)速率一半時的底物濃度。酮體:由乙酰輔酶A產(chǎn)生的三種化合物(乙酰乙酸、丙酮和3-羥丁酸);饑餓、糖尿病或糖代謝障礙可使酮體過量積聚。逆轉(zhuǎn)錄酶reversetranscriptase:由逆轉(zhuǎn)錄病毒在其生命周期中產(chǎn)生并利用的酶,該酶以RNA為模板催化DNA的復制。逆轉(zhuǎn)錄酶已被廣泛用于基因工程和分子生物學研究,用來從各種RNA制備互補DNA(cDNA)以便利用DNA重組技術(shù)
45、對RNAg基序列進行克隆和操作。Genefamily:指許多結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的真核基因組成的一個集合。家族中的成員可以緊密排布,成為一個基因簇;也可以分散排布在同一染色體的不同位置上;甚至可以位于不同的染色體上。、單選1 .甘氨酸的a-碳原子連接的4個原子和基團中有2個是氫原子,所以不是不對稱碳原子,沒有立體異構(gòu)體,所以不具有旋光性.2 .核酸所含喋吟和喀咤分子具有共軻雙鍵,在260nm波長處有最大吸收峰。3 .還原糖是指具有還原性的糖類.在糖類中,分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性.還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等,蔗糖雖是二糖但不是還原性糖。4
46、 .生物膜的主要功能有1 .維持穩(wěn)定代謝的胞內(nèi)環(huán)境,又能調(diào)節(jié)和選擇物質(zhì)進出細胞.2 .在細胞識別、信號傳遞、纖維素合成和微纖絲的組裝等方面,生物膜也發(fā)揮重要作用.3 .與其他細胞進行信息交流,但是這些物質(zhì)并不是和細胞膜上的受體結(jié)合的,而是穿過細胞膜,與細胞核內(nèi)或細胞質(zhì)內(nèi)的某些受體相結(jié)合,從而介導兩個細胞間的信息交流.5 .根據(jù)酶所催化的反應(yīng)性質(zhì)的不同,將酶分成六大類:氧化還原酶類(oxidoreductase)轉(zhuǎn)移酶類(transferases)水解酶類(hydrolases)裂合酶類(lyases)異構(gòu)酶類(isomerases)合成酶類(ligase)6 .一類能溶于水的有機營養(yǎng)分子。其中
47、包括在酶的催化中起著重要作用的B族維生素以及抗壞血酸(維生素C)等。7 .第一類是含氮類激素,包括肽類、蛋白質(zhì)類(如胰島素、甲狀旁腺素、促腎上腺皮質(zhì)激素等)和胺類(如腎上腺素、甲狀腺激素等),這一類激素容易被胃腸道消化酶所分解而破壞,因此,臨床應(yīng)用時一般采用注射方法,不宜口服。第二類是類固醇激素,包括腎上腺皮質(zhì)?t素和性激素(如雌激素、孕激素、雄性激素等)等,這一類激素口服后可以被吸收。第三類是固醇類激素,如膽鈣化醇等。8 .核酶(ribozyme)是具有催化功能的RNA分子,是生物催化劑,可降解特異的mRNA列??贵w酶,又稱催化抗體,是一類具有催化能力的免疫球蛋白,即通過一系列化學與生物技術(shù)
48、方法制備出的具有催化活性的抗體,它既具有相應(yīng)的免疫活性,又能像酶那樣催化某種化學反應(yīng)。酶工程從應(yīng)用目的出發(fā),主要研究酶的生產(chǎn)、分離純化、固定化技術(shù)、酶分子結(jié)構(gòu)的修飾和改造、酶反應(yīng)器等以及在工農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生環(huán)保和理論研究等方面的應(yīng)用。9 .物質(zhì)代謝的特點:(1)體內(nèi)各種物質(zhì)代謝過程相互聯(lián)系形成一個整體;(2)機體物質(zhì)代謝不斷收到精細調(diào)節(jié);(3)各組織、器官物質(zhì)代謝各具特色;(4)體內(nèi)各種代謝物都具有共同的代謝池;(5) ATP是機體儲存能量和消耗能量的共同形式;(6) NADP眼供合成代謝所需的還原當量10 .二糖有蔗糖乳糖麥芽糖,還有纖維二糖。11 .三竣酸循環(huán)又是三大物質(zhì)分解代謝的共同歸宿:
49、乙酰CoA不僅是糖有氧分解的產(chǎn)物,同時也是脂肪酸和氨基酸代謝的產(chǎn)物。因此,三竣酸循環(huán)是三大營養(yǎng)物質(zhì)的最終代謝通路。據(jù)估計,動物體內(nèi)2/3的有機物質(zhì)通過三竣酸循環(huán)被分解,三竣酸循環(huán)成為各種營養(yǎng)物質(zhì)分解代謝的共同歸宿12 .體內(nèi)貯存的脂肪主要來源于葡萄糖。脂肪酸的合成或是以乙酰CoA為原料,而乙酰CoA主要來自糖的氧化分解。13 .喋吟核甘酸的分解代謝產(chǎn)物是尿酸。尿素是氨的代謝產(chǎn)物。胺是氨基酸脫竣基的產(chǎn)物。肌酸是由甘氨酸、精氨酸、S-腺甘蛋氨酸合成。3-丙氨酸是胞喀咤、尿喀咤的代謝產(chǎn)物。14 .RNA分很多類型,如rRNA、mRNAtRNA等,其中tRNA為含稀有堿基最多的RNA(占10%-20%
50、)。稀有堿基包括雙氫尿喀咤(DHU)、假尿喀咤()、甲基化的喋吟(mGmA)15 .蛋白質(zhì)合成是指生物按照從脫氧核糖核酸(DNA轉(zhuǎn)錄得到的信使核糖核酸(mRNA上的遺傳信息合成蛋白質(zhì)的過程。16 .處于活化狀態(tài)的真核基因?qū)Nasel是高敏感性。17.18.原核生物基因轉(zhuǎn)錄起始的正確性取決于RNA聚合酶a因子段寡聚核糖核甘酸TBCGm'ACmm5Cfi中含有三個修飾堿基:W,m'A,mm5C.事嗎?:KZq.i在匿;肝*;心GUA劃心UA-咸I19.20.DNA聚合酶是細胞復制DNA勺重要作用酶。聚合酶“定位于細胞核,參與DNA勺復制引發(fā)。3位于細胞核內(nèi),主要參與DNA啰復。丫
51、定位于線粒體,主要參與線粒體中DNA勺復制。三、判斷題1 .糖類是是多羥基醛或多羥基酮及其縮聚物和某些衍生物的總稱。Cn(H2O)m2 .氮的含量較為恒定,而且在糖和脂類中不含氮,所以常通過測量樣品中氮的含量來測定蛋白質(zhì)含量。3 .組成蛋白質(zhì)的20種基本氨基酸都是a氨基酸4 .變性DNAt發(fā)生一些理化及生物學性質(zhì)的改變:1)溶液粘度降低。DNA雙螺旋是緊密的剛性結(jié)構(gòu),變性后代之以柔軟而松散的無規(guī)則單股線性結(jié)構(gòu),DNA粘度因此而明顯下降。2)溶液旋光性發(fā)生改變。變性后整個DNA分子的對稱性及分子局部的構(gòu)性改變,使DN崎液的旋光性發(fā)生變化。3)增色效應(yīng)(hyperchromiceffect)。指變
52、性后DNA§液的紫外吸收作用增強的效應(yīng)。DNAb子中堿基間電子的相互作用使DN酚子具有吸收260nm波長紫外光的特性。在DNA螺旋結(jié)構(gòu)中堿基藏入內(nèi)側(cè),變性時DNAZ螺旋解開,于是堿基外露,堿基中電子的相互作用更有利于紫外吸收,故而產(chǎn)生增色效應(yīng)。14)浮力密度升高。5)生物活性改變。5 .除了二羥基丙酮,其他單糖都具有旋光性,因為其他單糖的C原子都是手性的6 .多糖(polysaccharide)是由糖昔鍵結(jié)合的糖鏈,至少要超過10個的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物,可用通式(C6H10O5)n表示。由相同的單糖組成的多糖稱為同多糖,如淀粉、纖維素和糖原;以不同的單糖組成的多糖稱為雜
53、多糖,如阿拉伯膠是由戊糖和半乳糖等組成。多糖不是一種純粹的化學物質(zhì),而是聚合程度不同的物質(zhì)的混合物。多糖類一般不溶于水,無甜味,不能形成結(jié)晶,無還原性和變旋現(xiàn)象。多糖也是糖甘,所以可以水解,在水解過程中,往往產(chǎn)生一系列的中間產(chǎn)物,最終完全水解得到單糖。7 .組成生物膜的主要成分是磷脂8 .1個酶活力單位是指在特定條件(25C,其它為最適條件)下,在1分鐘內(nèi)能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量,或是轉(zhuǎn)化底物中1微摩爾的有關(guān)基團的酶量。比活力(性)(SpecificActivity)是酶純度的量度,即指:單位重量的蛋白質(zhì)中所具有酶的活力單位數(shù),一般用IU/mg蛋白質(zhì)來表示.一般來說,酶的比活力越高,酶越純.。
54、9 .維生素B2(化學式:C17H20N4O6式量376.37)又叫核黃素,微溶于水,在中性或酸性溶液中加熱是穩(wěn)定的。為體內(nèi)黃酶類輔基的組成部分(黃酶在生物氧化還原中發(fā)揮遞氫作用),當缺乏時,就影響機體的生物氧化,使代謝發(fā)生障礙。其病變多表現(xiàn)為口、眼和外生殖器部位的炎癥,如口角炎、唇炎、舌炎、眼結(jié)膜炎和陰囊炎等維生素B1又稱硫胺素或抗神經(jīng)炎維生素或抗腳氣病維生素10 .激素按化學結(jié)構(gòu)大體分為四類。第一類為類固醇,如腎上腺皮質(zhì)激素(皮質(zhì)醇、醛固酮等)、性激素(雌激素、孕激素及雄激素等)。第二類為氨基酸衍生物,有甲狀腺素、腎上腺髓質(zhì)激素、松果體激素等。第三類激素的結(jié)構(gòu)為肽與蛋白質(zhì),如下丘腦激素、垂
55、體激素、胃腸激素、胰島素、降鈣素等。第四類為脂肪酸衍生物,如前列腺素。11 .在大鼠上的研究表明,胰島素能通過磷脂酰肌醇三磷酸激酶(phos?phatidylinositolpro?teinkinaseB,PKB)途徑提高iNOS活性,提高NO的產(chǎn)生量12 .在糖酵解反應(yīng)中,磷酸甘油酸激酶催化1,3-二磷酸甘油酸與3-磷酸甘油酸互變,反應(yīng)可逆,因此在糖酵解和糖異生中均起作用。丙酮酸激酶和葡萄糖激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,丙酮酸竣化酶和果糖二磷酸酶是糖異生的關(guān)鍵酶,這些酶催化的反應(yīng)均不可逆,不可能同時在糖的分解和異生中起作用。13 .磷酸戊糖途徑包括完全氧化和不完全氧化兩個途徑。PP睢徑是由葡萄糖直接
56、氧化起始的可單獨進行氧化分解的途徑,也是戊糖代謝的主要途徑。因此可以和EMPTCA相互補充、相互配合,增加機體的適應(yīng)能力。14 .糖肽連鍵的類型糖蛋白中寡糖鏈的還原端殘基與多肽鏈的氨基酸殘基以多種形式共價連接,形成的連鍵稱為糖肽鍵。糖肽鍵主要有兩種類型:N糖肽鍵O糖肽鍵。1.N糖肽鍵N糖肽鍵是指3構(gòu)型的N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)異頭碳與天冬酰胺(Asn)的丫一酰胺N原子共價連接而成的N-糖昔鍵(圖)。2.O糖肽鍵O糖肽鍵是指單糖的異頭碳與羥基氨基酸的羥基O原子共價結(jié)合而成的O糖昔鍵。這類鍵包括3類。15 .氨基酸含有一個或兩個堿性氨基和一個或兩個酸性竣基的有機化合物。在結(jié)構(gòu)上氨基(-NH2
57、)或亞氨基(-NH)與鄰近竣基的碳原子(即“-碳原子)相連接的稱為a-氨基酸。是肽和蛋白質(zhì)的基本組成單位。16 .酮(tmg)體(ketonebody):在肝臟中,脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、3-羥基丁酸及丙酮,三者統(tǒng)稱為酮體。肝臟具有較強的合成酮體的酶系,但卻缺乏利用酮體的酶系。17 .【轉(zhuǎn)化】1 .糖類-血糖(葡萄糖),主要用于氧化分解,過量轉(zhuǎn)化為糖原,再過量轉(zhuǎn)化為脂肪儲存起來,也可將分解中間產(chǎn)物通過氨基轉(zhuǎn)換作用形成氨基酸一一蛋白質(zhì)2 .脂類在機體能量供應(yīng)不足的情況下,氧化分解,或轉(zhuǎn)化為血糖(葡萄糖)3 .蛋白質(zhì)在機體能量供應(yīng)嚴重不足的情況下或病變情況下,氧化分解,轉(zhuǎn)化為糖類和脂肪,或者蛋白質(zhì)攝取過多也會轉(zhuǎn)化為糖類和脂肪儲存起來!【制約】1 .糖類過多,抑制脂肪和蛋白質(zhì)的氧化分解和轉(zhuǎn)化2 .糖類過少,能量供應(yīng)不足,則會促進脂肪和蛋白質(zhì)的氧化分解和轉(zhuǎn)化18 .磷脂代謝(phospholipidmetabolism)是磷脂在生物體內(nèi)可經(jīng)各種磷脂酶作用水解為甘油、脂肪酸、磷酸和各種氨基醇(如膽堿、乙醇胺
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