21微生物的實驗室培養(yǎng)優(yōu)教共39張學習教案

1、會計學121微生物的實驗室培養(yǎng)優(yōu)教共微生物的實驗室培養(yǎng)優(yōu)教共39張張新課導入霉 菌細 菌第1頁/共38頁新課導入酵母菌放線菌第2頁/共38頁新課導入 上圖都是一些常見的微生物，微生物是結(jié)構(gòu)簡單、形體微小的單細胞、多細胞或沒有細胞結(jié)構(gòu)的低等生物，與人類關(guān)系密切。人工的培養(yǎng)和分離，使得我們更進一步認識微生物。 今天我們就來學習如何培養(yǎng)和分離大腸桿菌！第3頁/共38頁新課導入 1.通過閱讀教材，結(jié)合觀看培養(yǎng)基的相關(guān)素材，認識有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識。 2.通過觀看無菌操作視頻，結(jié)合教師詳細講解，能夠掌握無菌操作技術(shù)。 3.通過觀看實驗視頻，結(jié)合實際實驗操作，能夠完成純化大腸桿菌的操作。第4頁/共38頁新

2、課導入微生物1培養(yǎng)基2無菌技術(shù)31 1基礎(chǔ)知識基礎(chǔ)知識第5頁/共38頁新課導入微生物11.特點：結(jié)構(gòu)都相當簡單,個體多數(shù)十分微小，通常要用光學顯微鏡或電子顯微鏡才能看到，有的甚至沒有細胞結(jié)構(gòu)，且體內(nèi)一般不含有葉綠素，不能進行光合作用。第6頁/共38頁新課導入2.微生物包括五類病 毒細 菌放線菌真 菌原生動物第7頁/共38頁新課導入培養(yǎng)基培養(yǎng)基2 培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。第8頁/共38頁新課導入固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基1.1.培養(yǎng)基的類型培養(yǎng)基的類型成分區(qū)別：瓊脂第9頁/共38頁新課導入2.培養(yǎng)基的用途液體培養(yǎng)基：增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體

3、培養(yǎng)基：純化（分離），鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種半固體培養(yǎng)基：動力檢測第10頁/共38頁新課導入3.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方大腸桿菌配方 酵母提取物：0.25g 蛋白胨：0.5g Nacl：0.5g 瓊脂：1g 水：50ml第11頁/共38頁新課導入4.培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì)一般營養(yǎng)物質(zhì)水、碳源、氮源、無機鹽其他物質(zhì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì),例如:生長因子(即細菌生長必需，而自身不能合成的化合物)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。 第12頁/共38頁新課導入無菌技術(shù)31.無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。 無菌操作是培養(yǎng)微生物成功的關(guān)鍵！第13頁/共38頁新課

4、導入（1）消毒定義：2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別 （2）滅菌的定義：是指殺滅病原微生物的方法。 是指殺滅或清除環(huán)境中一切微生物（包括芽胞、孢子）的方法第14頁/共38頁(1)(1)消毒的方法：消毒的方法：常用的消毒與滅菌的方法常用的消毒與滅菌的方法1 1、煮沸消毒法煮沸消毒法:100:100煮沸煮沸5-6min5-6min；2 2、巴氏消毒法巴氏消毒法：70-7570-75下煮下煮30min30min或或 8080下煮下煮15min15min；3 3、化學藥劑消毒法化學藥劑消毒法: :用用75%75%酒精、新潔爾酒精、新潔爾 滅等進行皮膚消毒滅等進行皮膚消毒; ;氯氣消毒水源；氯氣消毒水源

5、；4 4、紫外線消毒紫外線消毒；第15頁/共38頁新課導入1.灼燒滅菌(2)(2)常用滅菌的方法常用滅菌的方法第16頁/共38頁新課導入2.干熱滅菌：160-170 下加熱1-2h。3.高壓蒸氣滅菌：100kPa、121 下維持15-30min.第17頁/共38頁新課導入制備培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基1純化大腸桿菌純化大腸桿菌2實驗操實驗操作作2 2第18頁/共38頁新課導入制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基1第19頁/共38頁新課導入倒平板操作2滅菌后的培養(yǎng)基在無菌操作臺上倒入4個培養(yǎng)皿中，倒后立即置于水平位置上，輕輕晃動，使培養(yǎng)基鋪滿平皿底部，待凝，使之形成平面。第20頁/共38頁新課導入 1.培養(yǎng)基滅菌后，需

6、要冷卻到50 左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？ 答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。第21頁/共38頁新課導入 2.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？ 答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。第22頁/共38頁新課導入二 純化大腸桿菌1.1.平板劃線法：平板劃線法： 1）灼燒接種環(huán)； 2）接種環(huán)冷卻后，蘸取帶菌培養(yǎng)物； 3）在近火焰處，讓帶菌接種環(huán)在固體培養(yǎng)基上劃線。第23頁/共38頁新課導入1 1.線

7、條不重疊 2 2-3.從上次的末端開始，交叉23條線3 4 4.最后的劃線不能與第一區(qū)相連。第24頁/共38頁新課導入 注意事項:1.接種環(huán)只蘸一次菌液，但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次。2.劃線首尾不能相接。3.劃線后，培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)1224h。第25頁/共38頁新課導入分離后，一個菌體便會形成一個菌落，這是消除污染雜菌的通用方法，也是用于篩選菌株的最簡便方法之一。第26頁/共38頁新課導入2.2.稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法稀釋操作第27頁/共38頁新課導入 注意：移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時，試管口和移液管離火焰12cm處.第28頁/共38頁新課導入大腸桿菌分離后保存51.臨時保藏：接種到

8、固體斜面培養(yǎng)基，菌落長成后置于4冰箱保存。2.長期保存：甘油冷凍管藏法第29頁/共38頁新課導入（一）培養(yǎng)基的制作是否合格 如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12 d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。實驗操作成果評價實驗操作成果評價3 3第30頁/共38頁新課導入（二）接種操作是否符合無菌要求 如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達到要求，需要分析原因，再次練習。第31頁/共38頁新課導入（三）是否進行了及時細致的觀察與記錄 培養(yǎng)12 h與24 h

9、后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同，及時觀察記錄的同學會發(fā)現(xiàn)這一點，并能觀察到其他一些細微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學生良好的科學態(tài)度與習慣。第32頁/共38頁新課導入微生物的實驗室培養(yǎng)培養(yǎng)基培養(yǎng)基的類型培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)無菌技術(shù)實驗室常用的消毒方法實驗室常用的滅菌方法制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板純化大腸桿菌平板劃線法稀釋涂布法結(jié)果分析與評價課題延伸第33頁/共38頁1關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是（ ）A.是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機物只提供無機鹽 D.無機氮源也能提供能量D第34頁/共38頁新課導入解析：A、B選項的表達是不完整的。有的碳源只能是碳源；有的碳源可同時是氮源；有的碳源同時是能源；有的碳源同時是氮源，也是能源。對于C選項，除水以外的無機物種類繁多，功能也多樣。對于D選項，無機氮源提供能量的情況還是存在的，如NH3可為硝化細菌提供能量和氮源。第35頁/共38頁新課導入2下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是（ ）A.防止雜菌污染 B.接種前菌種要進行滅菌C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌 D.滅菌必須在接種前B第36頁/共38頁新課導入解析：發(fā)酵所用的菌種大多是單