醫(yī)院物體表面及醫(yī)務(wù)人員手采樣,劉奔華6.8

1、醫(yī)院物體外表及醫(yī)務(wù)人員手采樣一 、醫(yī)院物體外表及醫(yī)務(wù)人員手采樣的意義 1. 引起醫(yī)源性感染的因素很多, 物體外表及醫(yī)務(wù)人員手可以充當(dāng)醫(yī)源性感染的媒介, 手的微生物污染是造成醫(yī)院感染的最直接的傳播途徑,由于醫(yī)務(wù)人員的手傳播細(xì)菌而造成的醫(yī)院感染約占30%。醫(yī)護(hù)人員做好手的清潔消毒是控制醫(yī)院感染重要措施一。u 2. 一些物體外表清潔后的效果監(jiān)測需要通過環(huán)境物表采樣培養(yǎng)數(shù)據(jù)來反映。u3. 促進(jìn)醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生的依從性。u4. 進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。二 、 物體外表采樣u 醫(yī)院物體外表采樣的對象：一切與醫(yī)療活動相關(guān)的物體外表均可以作為采樣的對象：治療臺，治療車，器械車、器械臺、麻醉機、新生兒暖箱、診療儀器，床

2、頭柜、床尾桌、監(jiān)護(hù)儀按鈕、診療儀器操作把手、血壓計袖帶 、聽診器、床欄、床欄按鈕、遙控器、門把手、電腦鍵盤、鼠標(biāo)， 機、病歷夾等。u 采樣時間u常規(guī)：消毒處理后進(jìn)行采樣u爆發(fā)流行：未處理外表，隨機采樣u采樣面積： 常規(guī)： 100cm 2 , 全部外表；100 cm 2 ，取100 cm 2u爆發(fā)流行： 不限，盡可能多采u 采樣方法：u1棉拭子法 ：u 準(zhǔn)備材料u5 cm5cm標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板： 材質(zhì)為牛皮紙或不銹鋼，中間為一 5cm5cm正方形空格，面積是25 cm 2 。u采樣液：無菌磷酸鹽緩沖液或無菌生理鹽水10 mL如果有殘留消毒劑，應(yīng)加相應(yīng)的中和劑；無菌棉簽；酒精燈等。u磷酸鹽緩沖液PB

3、S，0.03mol/L,pH7.2u配方u 蒸餾水加至 1000ml，待完全溶解后，調(diào)upH 至 7.2-7.4 ， 于 121 壓 力 蒸 氣 滅 菌u20min備用。u 采樣步驟u平面物體：用5cm5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板,放在被檢物體外表,用浸有無菌磷酸鹽緩沖液0.03mol/L或生理鹽水采樣液的棉拭子1支, 在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣1-4個規(guī)格板面積,剪去或用酒精燈燒斷手接觸局部, 將棉拭子放入裝l0mL采樣液的試管中送檢。u 對小型物體及不規(guī)那么物體外表，如水龍頭、門把手等，直接用棉拭子涂抹物體，用cfu/件表示u 標(biāo)本接種：u a 涂抹法：充分震蕩采樣管

4、后，用無菌吸管吸取0.5mL待檢樣品接種于營養(yǎng)瓊脂平皿，置361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時，計數(shù)并鑒定細(xì)菌。ub 傾注法：充分震蕩采樣管后，先取采樣液1.0mL加到無菌空平皿，再將冷卻至4045的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL20mL，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù)并鑒定細(xì)菌u 本卷須知：u a 采樣管充分震蕩u b 涂抹法：充分涂抹開u c 傾注法：控制好瓊脂溫度，搖勻。u 結(jié)果的報告及計算u細(xì)菌計數(shù)按cfu/cm 2 報告u小型物件物體外表的結(jié)果計算，用cfu/件表示u如果361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時，無細(xì)菌生長，可報告為： 0cfu/cm 2u 例1 ：棉拭子法對患者床頭柜采樣采樣面積100

5、 cm 2 ，用上述涂抹法接種,采樣液10mL，接種量0.5mL，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時后培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌菌落數(shù)為25個。u 例2：棉拭子法對患者床頭柜采樣面積100 cm 2 ，用上述傾注法接種采樣液10mL，接種量1mL，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時后培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌菌落u數(shù)為10個。u (2) 壓印法 ：用細(xì)菌定量采樣皿對物體外表直接壓印采樣并培養(yǎng)計數(shù)。u 準(zhǔn)備材料：面積25cm 2 的營養(yǎng)瓊脂平皿既是采樣皿，又是培養(yǎng)皿 u 瓊脂平皿的制備及結(jié)果判定后平皿的處理u 制備：u熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 平皿消毒滅菌：翻開平皿蓋，置于超凈臺的紫外線下照射60分鐘，底的內(nèi)面和蓋 的 內(nèi) 面 均 要

6、照 射 或 環(huán) 氧 乙 烷 滅菌，在無菌采樣皿中倒入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，加蓋冷卻凝固,置4 冰箱備用。u注意：加營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的量，要根據(jù)采樣皿邊沿具體厚度，培養(yǎng)基高度略高于平皿邊緣u在瓊脂沒冷卻前不要移動平皿，以免培養(yǎng)基溢出。u標(biāo)本處理后平皿的處理：挑取瓊脂，煮沸消毒，平板浸泡在消毒液中，然后沖洗晾干備用，制備培養(yǎng)皿時再紫外線照射。u 采樣操作：u面積25cm 2 的瓊脂平皿壓印物體外表1020秒, 置361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù)并鑒定細(xì)菌。u 結(jié)果計算u例：某治療臺面采樣，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h后, 4個平皿上的菌落數(shù)分別為14、25、25、36CFUu物體外表消毒合格標(biāo)準(zhǔn)判定：I、II

7、類區(qū)域：物體外表的細(xì)菌菌落5cfu/cm 2uI、II類區(qū)域包括：潔凈手術(shù)部，其他潔凈場所，非潔凈手術(shù)部，非潔凈骨髓移植病房，產(chǎn)房，導(dǎo)管室、新生兒室，器官移植病房，燒傷病房，重癥監(jiān)護(hù)室，血液病病區(qū)等。u III、IV類區(qū)域：物體外表的細(xì)菌菌落數(shù)10 cfu/cm 2u III、IV類區(qū)域：兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供給中心、血液透析中心、急診科、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等。三 醫(yī)務(wù)人員手采樣及檢測方法u 1. 幾個概念u手衛(wèi)生: 洗手、衛(wèi)生手消毒和外科手消毒的總稱。u 洗手: 醫(yī)務(wù)人員用肥皂或者皂液和流動水洗手，去除手部皮

8、膚污垢、碎屑和局部致病菌的過程。u衛(wèi)生手消毒：醫(yī)務(wù)人員使用速干手消毒劑揉搓雙手，以減少手部暫居菌的過程。u 外科手消毒：外科手術(shù)前醫(yī)務(wù)人員用肥皂皂液和流動水洗手，再用手消毒劑去除或者殺滅手部暫居菌和減少常居菌的過程。使用的手消毒劑具有持續(xù)抗菌活性。u常居菌 ：能從大局部人體皮膚上別離出來的微生物，是皮膚上持久的寄居菌，不易被機械的摩擦去除,一般情況下不致病。u暫居菌 ：寄居在皮膚表層，常規(guī)洗手容易被去除的微生物。直接接觸患者或被污染的物體外表時可獲得，可隨時通過手傳播，與醫(yī)院感染密切相關(guān)。u手采樣時間u常規(guī)：洗手后從事診療前在接觸病人、從事醫(yī)療活動前進(jìn)行采樣。u爆發(fā)流行：未洗手時采樣, 當(dāng)發(fā)生

9、醫(yī)院感染爆發(fā)流行時，疑心與醫(yī)務(wù)人員的手污染相關(guān)時，應(yīng)及時采樣。u3. 采樣面積及方法u1棉拭子法u 采樣方法： 被檢人五指并攏，用浸有無菌磷酸鹽緩0.03mol/L或生理鹽水采樣液的棉拭子1支,在雙手指曲面從指根到指端來回涂擦各兩次一只手涂擦面積約30cm 2 ，并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉試子，剪去手接觸部位，將棉試子放入裝有10mL采樣液的試管內(nèi)送檢。假設(shè)手上有消毒劑殘留時，采樣液應(yīng)含相應(yīng)的中和劑。u 標(biāo)本接種：ua涂抹法：充分震蕩采樣管后，用無菌吸管吸取0.5mL待檢樣品接種于營養(yǎng)瓊脂平板，置361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時，計數(shù)并鑒定細(xì)菌。ub傾注法：充分震蕩采樣管后，取采樣液1.0mL接種平皿，將冷確至

10、4045的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL20mL，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù)并鑒定細(xì)菌。u 結(jié)果計算：u2 只手的采樣面積按30 2=60cm 2 計算u例1 ：采用上述棉拭子涂抹法對某醫(yī)務(wù)人員的雙手采樣，用上述涂抹法接種采樣液10mL，接種量0.5mL，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時后培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌菌落數(shù)為6個u 例2 ：采用上述棉拭子涂抹法對某醫(yī)務(wù)人員的雙手采樣，用上述傾注接種采樣液10mL，接種量1mL，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時后培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌菌落數(shù)為18個。u 2壓印法 面積25cm 2 的瓊脂平皿壓印1020秒要采雙手，每只手分別用一個平皿。u結(jié)果計算：u 4. 醫(yī)務(wù)人

11、員手衛(wèi)生合格的判斷標(biāo)準(zhǔn)：u 衛(wèi)生手 清毒 ：監(jiān) 測的細(xì) 菌菌落總數(shù)應(yīng)10cfu/ 2u外科手消毒：監(jiān)測的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)5cfu/ 2u u采樣及檢測原那么: 采樣后必須盡快對樣品進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測,送檢時間不得超過2h,假設(shè)樣品保存于4冰箱, 存放時間不得超過4h。u例：采用上述壓印法對某醫(yī)務(wù)人員的雙手采樣左右手各一個，361培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時后，兩個平皿上生長的細(xì)菌菌落數(shù)分別為24、26個。u 四、 棉拭子法與壓印法的比較u壓印法的優(yōu)點:u1. 試驗材料少、本錢低。u2. 采樣過程簡便,人為影響因素少,可標(biāo)準(zhǔn)化。u 3. 便于大量開展監(jiān)測工作。u壓印法的缺點:u細(xì)菌較多時, 平皿細(xì)菌菌落相互

12、融合u棉拭子法的優(yōu)點:u 1 可用于不規(guī)那么外表門把手，水龍頭u2 方便外科手的采樣加中和劑u棉拭子法的缺點:u1 準(zhǔn)備工作復(fù)雜u2 受人為影響因素多u3 實驗室操作過程復(fù)雜u4 試驗材料多u5 接種過程: 無菌操作u 五 、 監(jiān)測要求u 每季度對手術(shù)室、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、層流潔凈病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、新生兒室、母嬰室、血液透析病房、燒傷病房、感染疾病科、口腔科等部門工作的醫(yī)務(wù)人員手進(jìn)行消毒效果的監(jiān)測；u當(dāng)疑心醫(yī)院感染爆發(fā)與醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生有關(guān)時，應(yīng)及時進(jìn)行監(jiān)測，并進(jìn)行相應(yīng)致病性微生物的檢測u六、 出現(xiàn)的問題及本卷須知：u1. 培養(yǎng)基、采樣液等：無菌試驗,試驗時要設(shè)陰性對照和陽性對照。u 采樣用的棉簽、規(guī)格板等盡量在使用前一周內(nèi)滅菌，不被污染。u