研究生開(kāi)題報(bào)告

1、附件一學(xué)術(shù)學(xué)位研究生學(xué)位論文開(kāi)題報(bào)告要求研究生學(xué)位論文開(kāi)題報(bào)告是研究生培養(yǎng)過(guò)程的重要環(huán)節(jié)，直接關(guān)系到碩士研究生學(xué)位論文的質(zhì)量。為了保證和促進(jìn)學(xué)術(shù)學(xué)位研究生按期完成開(kāi)題報(bào)告，現(xiàn)將有關(guān)事項(xiàng)具體要求如下：一、開(kāi)題報(bào)告的時(shí)間一般在第二學(xué)期結(jié)束后，研究生在導(dǎo)師指導(dǎo)下擬訂論文工作計(jì)劃，在文獻(xiàn)閱讀、科研調(diào)研的基礎(chǔ)上遞交開(kāi)題報(bào)告，由醫(yī)院定期組織學(xué)位論文集中開(kāi)題報(bào)告會(huì)。二、選題的原則選題是要注意以下原則：課題的創(chuàng)新性、科學(xué)性、可行性及實(shí)用性。三、開(kāi)題報(bào)告匯報(bào)的內(nèi)容1、課題的來(lái)源、選題的依據(jù)及意義（包括科學(xué)意義和發(fā)展前景，國(guó)內(nèi)外研究生概況、發(fā)展趨勢(shì)）。2、研究?jī)?nèi)容、技術(shù)路線(xiàn)和預(yù)期結(jié)果（包括具體內(nèi)容、總體安排、進(jìn)度

2、和階段完成目標(biāo)） 。3、研究過(guò)程中可能遇到的問(wèn)題和解決方法。4、已具備的研究條件和經(jīng)費(fèi)使用情況。四、開(kāi)題報(bào)告的要求1、開(kāi)題報(bào)告由醫(yī)院集中組織進(jìn)行，并聘請(qǐng)相關(guān)學(xué)科專(zhuān)家參加論證，廣泛聽(tīng)取意見(jiàn)。2、開(kāi)題報(bào)告后，研究生將開(kāi)題報(bào)告情況和專(zhuān)家提出的修改意見(jiàn)進(jìn)行整理，填入研究生培養(yǎng)手冊(cè)中的“學(xué)位論文開(kāi)題報(bào)告欄”。3、課題計(jì)劃一經(jīng)批準(zhǔn)，一般不再變更，若有特殊情況需要更換課題，必須重新開(kāi)題，并按以上程序進(jìn)行。五、組織與管理1、研究生應(yīng)按照“開(kāi)題報(bào)告的內(nèi)容”逐項(xiàng)撰寫(xiě)不少于3000字的開(kāi)題報(bào)告。2、開(kāi)題報(bào)告評(píng)議專(zhuān)家組一般由三到五名副高及以上職稱(chēng)的專(zhuān)家組成。3、由醫(yī)教部教務(wù)科組織召開(kāi)開(kāi)題答辯會(huì)議，研究生準(zhǔn)備5分鐘的P

3、PT在會(huì)議上作開(kāi)題陳述，開(kāi)題報(bào)告評(píng)議專(zhuān)家對(duì)該生的論文選題進(jìn)行集體評(píng)議并給出建議。4、開(kāi)題報(bào)告通過(guò)者，研究生根據(jù)專(zhuān)家組提出的建議，對(duì)開(kāi)題報(bào)告進(jìn)行完善，并填入研究生培養(yǎng)手冊(cè)中的“學(xué)位論文開(kāi)題報(bào)告欄”。5、開(kāi)題報(bào)告不通過(guò)者，應(yīng)重新選題并由所在學(xué)科點(diǎn)和導(dǎo)師在一個(gè)月內(nèi)重新組織開(kāi)題。6、開(kāi)題答辯會(huì)面向全院公開(kāi)，相關(guān)、相近專(zhuān)業(yè)的導(dǎo)師和研究生必須參加，未參加者不準(zhǔn)予開(kāi)題。附件二新橋醫(yī)院研究生學(xué)位開(kāi)題報(bào)告申請(qǐng)表姓 名孟凡飛年 級(jí)2014培養(yǎng)科室檢驗(yàn)科學(xué) 號(hào)2002014547學(xué)科專(zhuān)業(yè)臨川檢驗(yàn)診斷導(dǎo) 師蒲曉允人員類(lèi)別博士 在職博士研究生 碩士 在職碩士研究生 擬定題目穿孔素適配體的篩選與鑒定內(nèi)容是否涉密學(xué)位類(lèi)別學(xué)

4、術(shù)學(xué)位聯(lián)系方師意見(jiàn)（請(qǐng)推薦5名論證專(zhuān)家。） 導(dǎo) 師：年 月 日推 薦 專(zhuān) 家姓 名部 職 別聯(lián)系電話(huà)科室意見(jiàn)科室主任： 年 月 日 醫(yī)院意見(jiàn) 年 月 日 備 注第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院碩士研究生開(kāi)題論證報(bào)告摘要姓 名孟凡飛學(xué) 號(hào)2002014547導(dǎo)師姓名蒲曉允學(xué)科專(zhuān)業(yè)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)位類(lèi)別科學(xué)學(xué)位（ ）專(zhuān)業(yè)學(xué)位（ ）課題名稱(chēng)穿孔素適配體的篩選與鑒定課題來(lái)源國(guó)家自然科學(xué)基金課題經(jīng)費(fèi)（萬(wàn)元）80萬(wàn)主要研究?jī)?nèi) 容1.構(gòu)建ssDNA文庫(kù)及引物合成：構(gòu)建長(zhǎng)度為81個(gè)nt的隨機(jī)ssDNA文庫(kù)（南京全式金公司）兩端為固定序列，中間35個(gè)nt為隨機(jī)序列，庫(kù)容量大約為1010，庫(kù)的序列

5、為P81ss庫(kù)：CCCCTGCAGGTGATTTTGCTCAAGT-(N35)-AGTATCGCTAATCAGGCGGAT，引物P81-SP: 5 ' -CCCCTGCAGGTGATTTTGCTCAAGT-3'；引物P81-AP: 5 ' Biotin-ATCCGCCTGATTAGCGATACT-3 '. 2.羧基磁珠包被蛋白：定量穿孔素蛋白溶液與定量磁珠孵育，利用蛋白定量試劑盒計(jì)算穿孔素蛋白包被的效率。3.SELEX過(guò)程：適配子篩選主要包括結(jié)合、分離、擴(kuò)增、分離ssDNA、再結(jié)合等重復(fù)步驟，其中篩選過(guò)程主要是在BSA包被的EP管中，ssDNA與酵母tRNA 競(jìng)

6、爭(zhēng)結(jié)合包被了穿孔素蛋白的磁珠，置磁力架吸棄上清，洗去未結(jié)合的ssDNA，重復(fù)3次。 4.轉(zhuǎn)化與測(cè)序：將篩選到的ssDNA序列裝入了TA載體轉(zhuǎn)化入大腸桿菌DH5，挑取單克隆菌株進(jìn)行通用引物 PCR，將PCR產(chǎn)物純化后進(jìn)行DNA測(cè)序。 5.親和力檢測(cè)及二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)：篩選到的幾條ssDNA序列進(jìn)行native-PAGE電泳，以原始ssDNA文庫(kù)為對(duì)照，選取親和力最強(qiáng)的適配體預(yù)測(cè)其二級(jí)結(jié)構(gòu)，不同濃度的適配體同定量的穿孔素蛋白進(jìn)行native-PAGE電泳，得到結(jié)合力最佳的適配體濃度。 6.特異性檢測(cè)：將所得的適配體，同-干擾素、牛血清白蛋白、補(bǔ)體C9在硝酸纖維素薄膜上進(jìn)行適配體印記實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)適配體特異

7、性。預(yù)期研究目 標(biāo)1 篩選出高親和力，高特異性的穿孔素適配體序列。2 獲取同穿孔素蛋白結(jié)合力最佳的適配體濃度。3 研制出實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)的檢測(cè)試劑和規(guī)范的操作流程。4主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)及科學(xué)意 義穿孔素蛋白是機(jī)體內(nèi)具有細(xì)胞毒作用的效應(yīng)分子，儲(chǔ)存在細(xì)胞毒性T細(xì)胞和NK細(xì)胞胞質(zhì)顆粒中，兩種效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞接觸時(shí)，釋放的穿孔素通過(guò)聚合作用而在靶細(xì)胞表面形成小孔，從而介導(dǎo)殺傷作用。因此穿孔素蛋白的檢測(cè)可協(xié)助了解活化T淋巴細(xì)胞的數(shù)量，從而反映出機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，為臨床醫(yī)生選擇最佳的治療方案、觀察治療效果和判斷愈后提供幫助。適配體是一小段經(jīng)體外篩選得到的寡核苷酸序列,能與相應(yīng)的配體進(jìn)行高親和力和強(qiáng)特異性的結(jié)合，具

8、有疾病診斷與治療的應(yīng)用潛力。本研究鑒于穿孔素蛋白檢測(cè)的意義，篩篩選出特異的穿孔素適配體并加以鑒定，為以后穿孔素研究及構(gòu)建新的檢測(cè)方法提供支持。技術(shù)路線(xiàn)及 研 究方案（含主要技術(shù)指標(biāo)與檢測(cè)方法）適配體印記實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)適配體特異性結(jié)合力最佳的適配體濃度檢測(cè)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)native-PAGE電泳，選取親和力最強(qiáng)的適配體產(chǎn)物純化后進(jìn)行DNA測(cè)序轉(zhuǎn)化后挑取單克隆進(jìn)行通用引物 PCRSELEX篩選，產(chǎn)物PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物純化，分離ssDNA文庫(kù)穿孔素蛋白包被羧基磁珠建立ssDNA文庫(kù)及合成引物穿孔素適配體的篩選與鑒定可 行 性分 析1. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)上有需求：適配體特異性強(qiáng)、制備簡(jiǎn)單、無(wú)免疫原性且利于儲(chǔ)存，

9、其獨(dú)特的優(yōu)越性，已成為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)研究的熱點(diǎn)和重要的檢測(cè)工具。2. 有課題實(shí)施經(jīng)驗(yàn):：課題組先后承擔(dān)國(guó)家自然科學(xué)基金、國(guó)家“863”和國(guó)防預(yù)研項(xiàng)目等國(guó)家級(jí)項(xiàng)目，具有豐富的科研項(xiàng)目設(shè)計(jì)、組織、實(shí)施經(jīng)驗(yàn)，能夠保證項(xiàng)目的開(kāi)展。3. 研究團(tuán)隊(duì)有保證：導(dǎo)師及項(xiàng)目組成員長(zhǎng)期從事醫(yī)學(xué)快速檢測(cè)、微流控技術(shù)及適配體傳感器研究工作，掌握本項(xiàng)目有關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法。經(jīng)費(fèi)預(yù)算ssDNA文庫(kù)的建立及引物設(shè)計(jì) 500羥基磁珠 2000 PCR試劑 3000Native-PAGE試劑配制 3000其他試劑 2000DNA測(cè)序 2000穿孔素蛋白 12000導(dǎo)師意見(jiàn)導(dǎo)師簽名：填表說(shuō)明：1.“課題來(lái)源”按自選、國(guó)家、軍隊(duì)或地方課題填寫(xiě)，如“國(guó)家自然基金”；2.“主要研究?jī)?nèi)容”應(yīng)集中，研究預(yù)期目標(biāo)要明確；3.“主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)、科學(xué)意義”及“技術(shù)路線(xiàn)”要簡(jiǎn)明扼要；4.“可行性分析”應(yīng)從立論依據(jù)、技術(shù)