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1、細菌的染色與形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察細菌的染色與形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察細菌染色法死菌正染色負染色莢膜染色法等簡單染色法鑒別染色法革蘭氏染色法抗酸性染色法芽孢染色法姬姆薩染色法活菌用美藍或TTC(氧化三苯基四氮唑)等染色R+R發(fā)色基團發(fā)色基團助色基團助色基團 R+:堿性染料,美藍、結(jié)晶紫、孔雀綠、堿性復(fù)紅、番紅等堿性染料,美藍、結(jié)晶紫、孔雀綠、堿性復(fù)紅、番紅等R- :酸性染料,伊紅、剛果紅、酸性復(fù)紅等酸性染料,伊紅、剛果紅、酸性復(fù)紅等革蘭氏染色丹麥醫(yī)生Hans Christian Gram于1884年發(fā)明的一種鑒別不同類型細菌的染色方法。1用堿性染料結(jié)晶紫對菌液涂片進行初染用堿性染料結(jié)晶紫對菌液涂片進行初染2用碘
2、溶液進行媒染用碘溶液進行媒染,其作用是提高染料和細,其作用是提高染料和細 胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固。胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固。3用乙醇或丙酮沖洗進行脫色。用乙醇或丙酮沖洗進行脫色。在經(jīng)歷脫色后在經(jīng)歷脫色后 仍將結(jié)晶紫保留在細胞內(nèi)的為革蘭氏陽性細仍將結(jié)晶紫保留在細胞內(nèi)的為革蘭氏陽性細 菌,而革蘭氏陰性細菌的結(jié)晶紫被洗掉,細菌,而革蘭氏陰性細菌的結(jié)晶紫被洗掉,細 胞呈無色。胞呈無色。4用一種與結(jié)晶紫具有不同顏色的堿性染料對用一種與結(jié)晶紫具有不同顏色的堿性染料對 涂片進行復(fù)染。涂片進行復(fù)染。例如沙黃,它使原來無色的例如沙黃,它使原來無色的 革蘭氏陰性細菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而
3、革革蘭氏陰性細菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而革 蘭氏陽性細菌繼續(xù)保持深紫色蘭氏陽性細菌繼續(xù)保持深紫色革蘭氏染色(的過程)革蘭氏染色一、實驗?zāi)康?學習微生物涂片、染色的基本技術(shù),掌握細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法的基本原理及其染色技術(shù) 認識微生物的基本形態(tài) 了解革蘭氏染色法在細菌分類中的重要性二、實驗方法1. 簡單染色法涂片干燥固定染色水洗干燥鏡檢2. 革蘭氏染色法二、實驗方法涂片干燥固定初染水洗媒染水洗脫色水洗復(fù)染水洗鏡檢1min1min0.5min三、實驗內(nèi)容 細菌的簡單染色法染色 細菌的革蘭氏染色法染色四、實驗報告 結(jié)果報告:根據(jù)細菌革蘭氏染色觀察結(jié)果,繪出兩種或兩種以上細菌的形態(tài)圖(說明各菌的形狀、顏色和革蘭氏染色反應(yīng),需要當場完成上交)。 思考題(下次實驗前上交)1. P28 思考題中的第1,
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