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1、不同產(chǎn)地加工的金銀花中綠原酸含量的研究比擬【摘要】目的以綠原酸含量為指標(biāo),比擬不同產(chǎn)地加工的金銀花品質(zhì)。方法采用高效液相色譜法,使用DiansilT18(2504.6,5)色譜柱;以乙腈-0.4%磷酸溶液1585為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為327n;柱溫30;流速1.0l/in。結(jié)果蒸制后枯燥的產(chǎn)地加工法優(yōu)于直接枯燥的加工方法。結(jié)論不同產(chǎn)地加工方法的金銀花中綠原酸含量有較大差異。【關(guān)鍵詞】金銀花;綠原酸;產(chǎn)地加工;高效液相色譜法parisnnthehlrgeniAidntentinFlsLnieraePressedinDifferentPrduingAreasAbstrat:bjetiveTparet
2、hequalityfFlsLnieraepressedindifferentprduingareas.ethdsThententfhlrgeniaidinFlsLnieraeasdeterinedbyHPL.DiansilT18(2504.6,5)asusedandthebilephaseasAetnitrile-0.4%Phsphriaid(1585).Theavelengthfdetetras327n,thelunteperatureas30andtheflrateas1.0l/in.ResultsSteaingandvendryingerebetterthandiretdrying.nl
3、usinThententfhlrgeniaidisdifferentintheFlsLnieraepressedbydifferentpressinginprduingareas.Keyrds:FlsLnierae;hlrgeniaid;Pressinginprduingareas;HPL金銀花具有廣泛的藥用價(jià)值,可以清熱解毒、涼血化淤,主治外感風(fēng)熱、瘟病初起、瘡瘍疔毒、紅腫熱痛、便膿血、增強(qiáng)免疫功能等。金銀花的常見藥用制品有銀翹解毒丸、梔子金花丸、銀翹解毒片、銀翹散、五味消毒飲、祛感靈膠囊、咽炎沖劑、外陰洗劑等1,2,另外金銀花也可以起到防風(fēng)固沙、保持水土、改進(jìn)土壤、改善生態(tài)、綠化環(huán)境的多重
4、效用。金銀花其藥用價(jià)值主要由其所含化學(xué)成分來表達(dá)。通過研究得知,金銀花化學(xué)成分復(fù)雜,已鑒別出的就有60多種,其中具有生物活性,并已搞清楚構(gòu)造的化合物主要有:綠原酸、異綠原酸、黃酮類的木犀草素和揮發(fā)油類的芳樟醇等35。中藥的使用注重產(chǎn)地加工及炮制,不同的加工炮制方法對(duì)中藥的使用有著不同的意義。而金銀花在?中國(guó)藥典?2000年版部及?浙江省中藥炮制標(biāo)準(zhǔn)1994年版?中均未提及產(chǎn)地加工中應(yīng)蒸制后再枯燥1,2,翻閱以往文獻(xiàn)也未有所獲;但在民間采收過程中常有蒸制后再枯燥的加工習(xí)慣。由于在金銀花各化學(xué)成分中綠原酸具有抗菌、抗病毒、止血、抗肝炎等特殊作用,因此普遍把綠原酸含量的上下作為衡量金銀花質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)5
5、。本論文的主要內(nèi)容就是以金銀花中綠原酸的含量為指標(biāo),以HPL法為手段,比擬兩種不同產(chǎn)地加工的金銀花的品質(zhì)。1材料1.1儀器aters510色譜系統(tǒng),490E紫外檢測(cè)器。HS色譜數(shù)據(jù)工作站V4.0+杭州英譜科技開發(fā)。1.2試藥對(duì)照品:綠原酸hlrgeniaid購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)為753-200111;高純水,其他試劑均為色譜純。1.3樣品取自金華瑯琊,經(jīng)鑒定為忍冬科植物金銀花LnieranfusaD.的枯燥花蕾或帶初開的花。1號(hào)樣品采收后直接枯燥,2號(hào)樣品采收后經(jīng)蒸制再枯燥。2方法與結(jié)果2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)色譜柱為DiansilT18(2504.6,5),流動(dòng)相為乙腈-0
6、.4%磷酸溶液1585,流速1.0lin-1,檢測(cè)波長(zhǎng)327n,柱溫30,AUFS0.3;進(jìn)樣量20l;理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算不低于5000。2.2供試品溶液的制備分別取1號(hào)和2號(hào)樣品研成細(xì)粉,精細(xì)稱取細(xì)粉各約0.5g,置具塞錐形瓶中,精細(xì)參加50%甲醇50l,稱定重量,超聲處理30in,放冷,再稱定重量,用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,精細(xì)取續(xù)濾液5l,置25l棕色量瓶中,加50%甲醇至刻度,搖勻即得。2.3對(duì)照品溶液的制備精細(xì)稱取綠原酸對(duì)照品0.0106g,置棕色容量瓶中加50%甲醇溶解并稀釋至50.0l,即為對(duì)照品溶液。2.4線性關(guān)系考察精細(xì)汲取對(duì)照品溶液1.0,2.0,3.0,
7、4.0,5.0l,置棕色量瓶中加50%甲醇稀釋至10.0l,搖勻,按上述色譜條件測(cè)定綠原酸的峰面積,以峰面積積分值為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程Y2.19108X1.52105,r=0.9996,綠原酸進(jìn)樣濃度在21.20106.0gl-1內(nèi)峰面積積分值與濃度呈線性關(guān)系。2.5進(jìn)樣精細(xì)度實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取對(duì)照品溶液2.0l,置棕色量瓶中加50%甲醇稀釋至10.0l,搖勻,作為對(duì)照液,連續(xù)進(jìn)樣5次,測(cè)定峰面積,RSD=0.71%。2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取24項(xiàng)下對(duì)照液,每隔1h進(jìn)樣1次,測(cè)定綠原酸峰面積積分值,RSD=0.77%,結(jié)果說明在5h內(nèi)穩(wěn)定性較好。2.7加樣回收實(shí)驗(yàn)分別取樣品
8、適量,精細(xì)參加對(duì)照品溶液2.0l(0.212gl-1),按22項(xiàng)下方法制備供試品溶液,測(cè)定并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。表1樣品中綠原酸回收率測(cè)定結(jié)果略2.8樣品測(cè)定分別精細(xì)汲取22項(xiàng)下對(duì)照液與1號(hào)和2號(hào)供試品溶液各20l分別進(jìn)樣測(cè)定。用外標(biāo)法計(jì)算樣品中綠原酸的百分含量。結(jié)果見圖1及表2。A.對(duì)照品B.藥材a.綠原酸圖1藥材和對(duì)照品的HPL略表2不同產(chǎn)地加工金銀花中綠原酸的含量測(cè)定結(jié)果略3討論綠原酸的50%甲醇溶液應(yīng)避光陰涼處保存,否那么峰面積會(huì)有所改變而影響測(cè)定的準(zhǔn)確性。從表2可見,不同產(chǎn)地加工成的金銀把戲品中綠原酸含量差異較大,產(chǎn)地加工中經(jīng)蒸制后再枯燥的樣品含量要比直接枯燥的樣品高出5倍多。建議產(chǎn)地加工方法寫入標(biāo)準(zhǔn)中,以確保綠原酸的含量。通過對(duì)不同產(chǎn)地加工的金銀花中綠原酸的含量測(cè)定的比擬,未經(jīng)蒸制直接枯燥的金銀花中綠原酸含量?jī)H為1.0%,而蒸后枯燥的那么有5.7%,就綠原酸的含量來說,蒸制后枯燥的產(chǎn)地加工方法優(yōu)于直接枯燥的加工方法。本課題還需對(duì)不同產(chǎn)地加工的金銀花進(jìn)展指紋圖譜研究、譜效關(guān)系的研究等,進(jìn)一步從更全面的角度說明產(chǎn)地加工的優(yōu)劣?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】1國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典,部S.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000:177.2浙江省衛(wèi)生廳.浙江省中藥炮制標(biāo)準(zhǔn)S.杭州:浙江省
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