第十三章巴比妥類藥物分析課件

1、第十三章巴比妥類藥物分析課件 巴比妥類藥物是一類臨床常用的催眠鎮(zhèn)靜藥。由于這類藥物應(yīng)用廣泛，容易因不合理使用而引起中毒。 本章重點(diǎn)介紹巴比妥類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與分析方法間的關(guān)系，介紹鑒別、檢查和含量測定的原理與方法。一、巴比妥類藥物的基本結(jié)構(gòu)通式 5,5-取代的巴比妥類藥物 5區(qū)別各種巴比妥類藥物 環(huán)狀丙二酰脲、1,3-二酰亞胺基團(tuán) 決定巴比妥類藥物的特性 1. 環(huán)狀母核部分2. 取代基部分二、理化性質(zhì)（一）物理性質(zhì) 1. 白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)。 2. 游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。 化學(xué)性質(zhì) 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中都

2、有1,3-二酰亞胺基團(tuán)，能發(fā)生酮式和烯醇式的互變異構(gòu)，在水溶液中可以發(fā)生二級電離。因此，本類藥物的水溶液顯弱酸性（pKa為-），可與強(qiáng)堿形成水溶性的鹽類。 1. 弱酸性與強(qiáng)堿的成鹽反應(yīng)：2. 水解反應(yīng) （1） 與銀鹽的反應(yīng) 3、與重金屬離子的反應(yīng)（2）與銅鹽的反應(yīng) 有色配位化合物（3）與鈷鹽的反應(yīng) 無水; 所用試劑均應(yīng)不含水分。反應(yīng)條件：堿性：異丙胺（4）與汞鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物+汞鹽白色 （可溶于氨試液）4、 與香草醛（vanillin）的反應(yīng) 紫色-藍(lán)色乙醇5、 紫外吸收光譜特征H2SO4溶液(0.05mol/L)緩沖溶液NaOH溶液(0.1mol/L) (pH 13)巴比妥類藥物的紫外吸

3、收光譜Anm硫噴妥的紫外吸收光譜HCl 溶液 (0.1mol/L) NaOH 溶液 (0.1mol/L) 巴比妥類藥物的紫外吸收光譜特征和其電離的程度有關(guān) 5,5-取代的巴比妥類藥物 在pH=2的酸性溶液中，因不電離，幾乎無明顯的紫外吸收。 在pH=10的堿性溶液中，發(fā)生一級電離于240 nm處有最大吸收。 在pH=13的強(qiáng)堿性溶液中，發(fā)生二級電離，最大吸收紅移至255 nm處。硫代巴比妥類藥物在酸性或堿性溶液中，均有較明顯的紫外吸收。 7、顯微結(jié)晶特征藥物本身的晶形巴比妥：長方形； 苯巴比妥：球形花瓣?duì)罘磻?yīng)產(chǎn)物的晶形巴比妥 銅吡啶試液 十字形紫色結(jié)晶苯巴比妥 銅吡啶試液 細(xì)小不規(guī)則或似菱形的

4、淺紫色結(jié)晶6、薄層色譜行為特征 對照品對照鑒別（1） 與銀鹽的反應(yīng)、（二）銅鹽反應(yīng)二、鑒別試驗(yàn)（一）、丙二酰脲類反應(yīng)（二）熔點(diǎn)測定巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比妥類藥物 過濾 洗滌 干燥 測熔點(diǎn)苯巴比妥鈉的鑒別取本品約0.5 g，加水5 ml溶解后，加稍過量稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過；沉淀用水洗凈，在105干燥后，依法測定，熔點(diǎn)為174-178。 司可巴比妥可使溴試液或碘試液褪色不飽和烴取代基的反應(yīng) 與溴試液或碘試液的反應(yīng) 與KMnO4的反應(yīng)可還原紫色的KMnO4為棕色的MnO2（三）、 特殊取代基及元素的反應(yīng) 與NaNO2H2SO4反應(yīng) 苯巴比妥與甲醛H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色 苯巴比妥

5、與NaNO2H2SO4反應(yīng)生成橙黃色橙紅色 與甲醛H2SO4反應(yīng)硝化反應(yīng)芳香取代基的反應(yīng)硫元素的反應(yīng) （四）、鈉鹽的鑒別反應(yīng) 1. 焰色反應(yīng) 取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色 2. 與醋酸氧鈾鋅反應(yīng) 取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色（五）、紅外分光光度法第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查一、苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 酸度 乙醇溶液的澄清度 中性或堿性物質(zhì)二、司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查 溶液的澄清度 中性或堿性物質(zhì) 終點(diǎn)指示：電位法指示（Ag電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極） 自身指示 一、銀量法1.原 理 ：反應(yīng)摩爾比（11）溶劑系統(tǒng)：甲醇+3%無水碳酸

6、鈉第四節(jié) 含量測定 苯巴比妥： 取本品約0.2 g，精密稱定，加甲醇40 ml使溶解，再加新制的3無水碳酸鈉溶液15 m1，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1 mol/L）滴定。每1 ml 硝酸銀滴定液（0.1 mo1/L）相當(dāng)于23.22 mg的C12H12N2O3。 2. 測定方法與計(jì)算原料藥：直接滴定法 3. 注意事項(xiàng)（1）無水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制（2）AgNO3滴定液應(yīng)新鮮配制（3）銀電極使用前應(yīng)進(jìn)行處理 凡取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵可與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法進(jìn)行測定。如司可巴比妥鈉及其膠囊的測定二、溴量法1. 原理 I22Na2S2O32NaINa2S4O

7、6KBrO35KBr6HCl3Br26KCl3H2O Br22KI2KBrI2司可巴比妥鈉： 取本品約，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水10m1，振搖使溶解，精密加溴滴定液（）25ml，再加鹽酸5m1，立即密塞并振搖1min，在暗處靜置15min后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液10m1，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（）滴定，至近終點(diǎn)時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml溴滴定液（）相當(dāng)于的C12H17N2NaO3。2. 測定方法與計(jì)算原料藥：剩余滴定法 3. 注意事項(xiàng)（1）操作中要防止溴和碘的逸失（2）平行條件進(jìn)行空白試驗(yàn)可減少溴和碘逸失帶來的誤差。

8、1. 在水醇混合溶劑中的滴定法 弱酸性 pK8.4 異戊水醇溶解麝香草酚酞NaOH淡藍(lán)色（三）、酸堿滴定法此法終點(diǎn)判斷較困難 取本品約0.5 g，精密稱定，加乙醇20 m1溶解后，加麝香草酚酞指示液6滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1 mo1/L）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每l ml氫氧化鈉滴定液（0.1 mol/L）相當(dāng)于22.63 mg的C11H18N2O3。 異戊巴比妥的含量測定 溶 劑：二甲基甲酰胺 滴定劑：甲醇鈉（鉀） 指示劑：麝香草酚藍(lán) 3、 非水溶液滴定法2、在膠束水溶液中進(jìn)行的滴定法 溶 劑：表面活性劑-溴化十六烷基三甲基芐胺水溶液 滴定劑：氫氧化鈉滴定液 指示劑：麝香

9、草酚肽 四、紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法 本法是將樣品溶解后，根據(jù)溶液的pH值選用其相應(yīng)的max處進(jìn)行直接測定。單組分定量方法：1. 吸收系數(shù)法2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 3. 對照法 取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于硫噴妥鈉），置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用0.4%NaOH溶液定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液；另取硫噴妥對照品，精密稱定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液。照分光光度法，在304nm的波長處分別測定A，根據(jù)每支的平均裝量計(jì)算。每1mg硫噴妥相當(dāng)于的C11H17N2NaO2S。 如注射用硫噴妥鈉的

10、含量測定（2）經(jīng)提取分離后的紫外分光光度法根據(jù)巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機(jī)溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶的特點(diǎn)，本法可消除干擾物質(zhì)對巴比妥類藥物測定的影響。取鈉鹽加水溶解，加酸酸化，用氯仿提取后再加堿反提。排除輔料或雜質(zhì)的干擾。 1、測定方法-取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種不同的化學(xué)環(huán)境（如在其一中加酸、堿或緩沖液改變?nèi)芤旱膒H，或在其一中加能與供試品發(fā)生某種化學(xué)反應(yīng)的試劑），然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當(dāng)波長處，測其吸收度的差值（A值）。（3）多組分混合物不經(jīng)分離的定量方法計(jì)算分光光度法差示分光光度法（A法）2. 必要條件 （1）供試品在不

11、同的化學(xué)環(huán)境中以不同的分子形式存在，它們的吸收光譜有顯著的差異。 （2）干擾物的吸收不受測定時化學(xué)環(huán)境的影響，光譜行為不變。 供試品在兩種不同的化學(xué)環(huán)境中分別以x、y 表示，干擾物用 z 表示3. 定量依據(jù)即，吸收度差值（A）僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，即干擾組分的干擾被消除。 可用對照法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量 保留了通常的分光光度法簡易快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn)，又無需事先分離，并能消除干擾。4. 特點(diǎn)5. 應(yīng)用（1）于波長240 nm處，測定pH10和pH2兩種溶液的吸收度之差（2）于波長260 nm處，測定pH10和強(qiáng)堿溶液的吸收度之差（五）、高效液相色譜HPLC法同時測定人血清中苯巴比妥、苯妥英和卡馬西平的濃度色譜條件：色譜柱 AgilentZORBAX SB- C18柱( 250 4.6mm , 5m) , 流動相為甲醇水乙腈(454510 ） 流速1.0m l/m in, 柱溫30, 檢測波長254nm。血樣處理：取內(nèi)標(biāo)溶液100L，60水浴氮?dú)獯蹈?，?00L待測血清, 加提取液（氯仿：乙酸乙醋=50：50）2ml, 旋渦混合5min, 以4000轉(zhuǎn)/分離心10min, 用吸管吸取