蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)研究

1、蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)研究蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)研究【摘要】自古以來，人們都有發(fā)現(xiàn)美、欣賞美的藝術(shù)追求。花卉等具有“美”的特質(zhì)的植物理所當然的成為了養(yǎng)殖、欣賞的對象。在幾十年以前，我國人民尚徘徊在生存的邊緣，無暇追求美麗事物，隨著我國社會經(jīng)濟的發(fā)展，人們生活水平的也逐漸提升，人們越來越重視生活中的美?；ɑ茏鳛槿藗冃蕾p美的載體，不論是各類慶典、宴會，還是環(huán)境綠化建設(shè)等都是不可或缺的。蝴蝶蘭的花形奇特，類似蝴蝶，色彩艷麗鮮明，花期持久，是最適合作為觀賞植物的花種之一。【關(guān)鍵詞】蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培育材料培育方法激素配方蝴蝶蘭具有極高的觀賞價值和經(jīng)濟價值，是當今國際上商業(yè)價值最大的熱帶蘭花之一。但因為蝴蝶蘭屬于單莖

2、性氣生蘭，其再生能力不強，因此要進行分株繁殖顯得異常困難。蝴蝶蘭的種子十分細小，在一般的自然條件下很難發(fā)芽，這也導致其增殖系數(shù)極低。雖然其有較高的觀賞價值，但是因為不易養(yǎng)殖，所以在市場上的蝴蝶蘭顯得極為珍貴。為了提高蝴蝶蘭的繁殖力，相關(guān)的專家人員利用組織培養(yǎng)法進行蝴蝶蘭的快速繁殖，并取得了成功。蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)程序為：選取外植體一一誘導形成不定芽一一增殖不定芽一一分化小植株一一生根壯苗培養(yǎng)一一溫室移栽。這整個程序都是根據(jù)蝴蝶蘭的生長習性而設(shè)計的，對蝴蝶蘭的培育有著顯著效果，解決了以前在蝴蝶蘭工廠化快速繁殖中遇到的技術(shù)問題，增加了蝴蝶蘭的成活率。本文就蝴蝶蘭的組培方案進行了分析，首先闡述了蝴蝶蘭

3、組織培育中必須要準備的材料，然后闡述了蝴蝶蘭組織培育的方法。期望通過本文的分析，能夠讓讀者對蝴蝶蘭的組培方案有更加深刻的認識。1蝴蝶蘭組織培育中必須要準備的材料在蝴蝶蘭組織培育中可以作為外植體的有蝴蝶蘭的嫩莖、花梗、葉片、莖段、莖尖等。必須要確保所取外植體的原蝴蝶蘭沒有蟲害、沒有病害，生長狀態(tài)要極好。本文所選蝴蝶蘭是白瓣紅唇蝴蝶蘭。若取花梗作為材料，則要剪去上端無須的花梗，剪成長度為五至十厘米的小段。若取葉片為材料，則要先取花梗進行誘導，當獲得蝴蝶蘭無菌苗后，待其成長為2葉苗時，再取其葉片或是莖尖作為培育材料。2蝴蝶蘭組織培育的方法2.1不同外植體的消毒不同外植體的消毒可分為三個步驟，下面就對

4、這三個步驟進行仔細分析。（1）第一步：在取得蝴蝶蘭的培育材料以后，需要先對其進行清理，去除多余的部分，將主要的部分清洗干凈。然后將材料剪成適當大小，以能放入滅菌容器中的大小為宜。將剪好的培育材料放在水龍頭下沖洗，沖洗的時間要根據(jù)材料的清潔程度而定，可能是幾分鐘，也可能是幾小時。在污染嚴重的情況下，流水清洗是最有效的清潔方式。在清洗的過程中，可以適當加入少量的洗衣粉，洗衣粉能夠很容易的去除附著在材料上的污物，尤其是脂質(zhì)性的污物。再用自來水將洗衣粉水清洗干凈。為了使清洗的效果更好，還可以適當?shù)募尤氡砻婊钚晕镔|(zhì)一一“吐溫”。（2）第二步：培育材料的表面浸潤滅菌。首先要準備好滅菌的器械，比如玻璃棒、燒

5、杯、無菌水、70%精、消毒液等等。先在燒杯中倒入消毒溶液，并加幾滴消毒助劑Tween-80,在消毒的過程中要不斷的用玻璃棒進行輕輕攪動，這樣有助于消毒液與培育材料的充分接觸，能夠驅(qū)除氣泡，使消毒更為徹底。在設(shè)計的消毒時間結(jié)束之前的一到兩分鐘，就可以將消毒液慢慢傾入另一個燒杯，切記不要將材料也倒入另一個燒杯。在消毒液倒完以后，立即注入無菌水進行涮洗，涮洗結(jié)束以后，再用自來水沖洗3060min。接著在超凈工作臺上，將已經(jīng)切割好的材料用準備好的酒精清洗半分鐘時間，再用無菌水進行沖洗，完成以后，如果所取材料是葉片，則將其放入0.1%HgCI溶液中浸泡八到十二分鐘左右的時間，再用無菌水沖洗五到八次；如果

6、所取材料是花梗，則將其放入0.1%HgCI溶液中浸泡十到二十分鐘，再使用無菌水沖洗三到五次。（3）第三步：使用無菌水涮洗。無菌水涮洗的主要目的是免除消毒劑對材料細胞的副作用，在使用無菌水涮洗的過程中，必須要堅持涮洗五到十次，每次清洗都要確保持續(xù)時間在30s以上。其中必須要注意的幾點：1）在酒精中浸泡的時間要短，避免因浸泡過久導致材料失綠；2）對于老熟材料，比如種子等，要在酒精中浸泡久一點；3）升汞的滲透力較弱，可以多浸泡一些時間；4）在消毒液中加入濃度在0.08%012應(yīng)間的Tween-20或是Tween-80,能夠降低植物材料表面的張力，使消毒效果更加明顯。2.2培養(yǎng)基激素配方初代培養(yǎng)的目的

7、是為了誘導類不定芽（PLB或叢生芽，基本培養(yǎng)基為2/3MS培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中均要加入蔗糖、瓊脂、碳粉等，蔗糖的加入量為20mg.L-1，瓊脂的加入量為5mg.L-1，碳粉的加入量為AC1.0mg.L-1。接種之后，將其放入暗培養(yǎng)室2530小時，再改為光照培養(yǎng)，此時溫度應(yīng)該控制在2325c之間，日光燈照明的強度為2000Lux,光照時間設(shè)定為10h/d。其具體配方如下表1所示。一般情況下，30小時以后，就會分化出新芽。在30小時以后，再開始統(tǒng)計，選擇出分化最好的培養(yǎng)基。2.3不定芽增殖將花梗初代培養(yǎng)萌發(fā)的不定芽切下，轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上，如表2所示。每隔4050天就繼代增殖一次，次數(shù)不宜超過15次

8、,隨著繼代增殖次數(shù)的增加，6-BA的濃度也隨著降低。在接種的過程中，要確保材料不受到傷害。培養(yǎng)室的溫度要控制在2428c之間，光照強度要控制在19002100Lux之間，光照時間以10h/d最合適。培養(yǎng)基的附加材料與基本培養(yǎng)基一致。2.4生根在生根培養(yǎng)期間，其溫度要控制在2428C,光照強度要設(shè)置在400010000Lux,時間要設(shè)置為12h/d。若是直接利用太陽散射光也可以。當芽生長到有兩三片葉子，葉長有一到兩厘米時，此時可將芽單個分開，按大小分級接種到生根培養(yǎng)基中。2.5煉苗移栽當苗長至23cmi有13根條卞和34片葉子時，便可進行煉苗。先取掉瓶蓋，將其置于常溫室內(nèi)的散射光下，煉苗六天左右

9、，然后再取出試管苗，將其附著的瓊脂清洗干凈，放入1000倍的多菌靈溶液中浸泡20s,再取出晾干，接著將其栽到不同的基質(zhì)中。基質(zhì)可以使用水苔、樹皮塊以及水苔和蕨根按1：1配合這三種。在移栽以前，必須要對基質(zhì)進行消毒處理。具體的管理方法宜采用溫室內(nèi)小拱棚的方式。首先是環(huán)境設(shè)計，必須要將拱棚內(nèi)的溫度控制在1828c之間，棚內(nèi)必須要有太陽散射光，光照強度為50008000Lux其次是管理方面，移栽以后，每天都要對其進行噴霧澆水兩次左右，前兩周時間，要將濕度控制在80%-90尤間，后面幾周要將濕度保持在70%-80%瓶苗質(zhì)量的要求必須做到：根系粗壯、品種純正、無污染、不徒長、變異率小于5%。見表3。表3瓶苗質(zhì)量分級3結(jié)語總而言之，蝴蝶蘭組織培育方式是當前最為有效的培育方式，雖然其中還有很多方面需要完善，但是只要通過試驗和努力，必定會將該方法打造得更加完美和可行。參考文獻：1王玲，陳發(fā)棣，陳鳳等.蝴蝶蘭花梗芽的初代誘導J.江蘇農(nóng)業(yè)科學，2021，40（12）：68-71.2楊華庚.高溫脅迫對蝴蝶蘭幼苗葉綠素及其熒光參數(shù)的影響J.中國農(nóng)學通報，2021，28（19）：177-183.3劉學慶，孫紀霞，丁朋松等.低溫脅迫對蝴蝶蘭內(nèi)源激素的影響J.江西農(nóng)業(yè)大學學報，2021，34（3）：464-469.4蔣瑞萍，李蘋，徐培智等.花卉緩/控釋復(fù)合肥對盆栽蝴蝶蘭生長發(fā)育及其