活體動(dòng)物光學(xué)成像系統(tǒng)在活體熒光成像中的應(yīng)用

1、活體動(dòng)物光學(xué)成像系統(tǒng)在活體熒光成像中的應(yīng)用 第一部分技術(shù)原理一、技術(shù)簡(jiǎn)介隨著活體動(dòng)物光學(xué)成像技術(shù)在國(guó)內(nèi)外的普及和應(yīng)用，越來(lái)越多的科研人員希望能通過該技術(shù) 來(lái)觀察活體動(dòng)物體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)以及對(duì)藥物治療的反應(yīng)，希望能觀察到熒光標(biāo)記的多 肽、抗體、小分子藥物在體內(nèi)的分布和代謝情況NightOWL IILB 983 NC320活體動(dòng)物光學(xué) 成像系統(tǒng)正是為滿足這樣的應(yīng)用需求而設(shè)計(jì)的。該系統(tǒng)通過熒光光路的特殊設(shè)計(jì)，實(shí)現(xiàn)了對(duì) 激發(fā)光的能量控制和調(diào)節(jié)，提高了活體熒光成像的穩(wěn)定性和靈敏度，并且該系統(tǒng)操作簡(jiǎn)單、 費(fèi)用低廉、不涉及放射性，是不錯(cuò)的進(jìn)行活體熒光成像的儀器。與傳統(tǒng)技術(shù)相比，活體熒光 成像技術(shù)不需要?dú)⑺?/p>

2、動(dòng)物，可以對(duì)同一個(gè)動(dòng)物進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間反復(fù)跟蹤成像，既可以提高數(shù)據(jù)的 可比性，避免個(gè)體差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。更重要的是，該技術(shù)可以得到直觀的成像圖片， 了解標(biāo)記物在動(dòng)物體內(nèi)的分布和代謝情況，避免了傳統(tǒng)的體外實(shí)驗(yàn)方法的諸多缺點(diǎn)，特別是 在藥物制劑學(xué)、藥物臨床前研究中有不可估量的應(yīng)用前景。NightOWL IILB 983 NC320活體熒光體內(nèi)成像技術(shù)的基本原理是激發(fā)光源通過特殊的光路設(shè) 計(jì)使其能量穩(wěn)定、強(qiáng)度合適的激發(fā)光使熒光基團(tuán)達(dá)到較高的能量水平，然后發(fā)射出較長(zhǎng)波長(zhǎng) 的散射光，該散射光可以穿透實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的組織并且可由儀器cooling slow scaning CCD以 光子數(shù)量化檢測(cè)到光強(qiáng)度，同時(shí)反

3、應(yīng)出標(biāo)記物的數(shù)量。二、標(biāo)記原理活體熒光成像技術(shù)有三種標(biāo)記方法：熒光蛋白標(biāo)記、熒光染料標(biāo)記和量子點(diǎn)標(biāo)記。熒光蛋白 適用于標(biāo)記腫瘤細(xì)胞、病毒、基因等。通常使用的是GFP、EGFP、RFP (DsRed)等。熒光染 料標(biāo)記和體外標(biāo)記方法相同，常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7,可以標(biāo)記抗體、多肽、小 分子藥物等。量子點(diǎn)標(biāo)記作為一種新的標(biāo)記方法，是有機(jī)熒光染料的發(fā)射光強(qiáng)的20倍，穩(wěn) 定性強(qiáng)100倍以上，具有熒光發(fā)光光譜較窄、量子產(chǎn)率高、不易漂白、激發(fā)光譜寬、顏色可調(diào)，并且光化學(xué)穩(wěn)定性高，不易分解等諸多優(yōu)點(diǎn)。量子點(diǎn)是一種能發(fā)射熒光的半導(dǎo)體納米微 晶體，尺寸在100nm以下，外觀恰似一極小的點(diǎn)狀物

4、。它可以經(jīng)受反復(fù)多次激發(fā)，而不像有 機(jī)熒光染料那樣容易發(fā)生熒光淬滅。已經(jīng)證實(shí)了量子點(diǎn)的成像深度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過標(biāo)準(zhǔn)的熒光素如 果能與抗體結(jié)合配對(duì)，就可以作為跟蹤組織細(xì)胞的探針，或者探測(cè)低濃度的抗體。如果能解 決不同材料的量子點(diǎn)偶聯(lián)、功能化標(biāo)記問題，就可以用量子點(diǎn)代替很多熒光染料分子。三、技術(shù)特性在活體動(dòng)物光學(xué)成像技術(shù)中，相對(duì)于生物發(fā)光成像技術(shù)，熒光成像技術(shù)的優(yōu)勢(shì)主要表現(xiàn)在：熒光染料、蛋白標(biāo)記能力強(qiáng)熒光標(biāo)記物種類繁多，包括熒光蛋白、熒光分子、量子點(diǎn)等，可以與基因、多肽、抗體等生 物分子標(biāo)記，作為分子探針使用范圍廣。同時(shí)不同的熒光蛋白或染料還可對(duì)樣本進(jìn)行多重標(biāo) 記，同時(shí)成像。檢測(cè)的波長(zhǎng)范圍從300nm到1

5、100nm，我們可以提供全光譜的濾光片實(shí)現(xiàn)幾 乎所有熒光標(biāo)記的體內(nèi)成像。信號(hào)強(qiáng)度大由于熒光是在外界光源激發(fā)下產(chǎn)生的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象，其光子強(qiáng)度較其它光學(xué)信號(hào)更強(qiáng)，持續(xù) 時(shí)間長(zhǎng)，信號(hào)所反應(yīng)的樣本信息量更豐富，對(duì)信號(hào)接收儀器的要求相對(duì)較低，節(jié)省更多的實(shí) 驗(yàn)成本。實(shí)驗(yàn)成本低相對(duì)于活體生物發(fā)光成像來(lái)說(shuō)，費(fèi)用低廉，不需要底物。熒光發(fā)光基團(tuán)只要在其合適強(qiáng)度的 激發(fā)光激發(fā)下就可以發(fā)出定波長(zhǎng)的發(fā)射光信號(hào)，整個(gè)反映不需要添加任何昂貴的反應(yīng)成分， 只要保證熒光基團(tuán)穩(wěn)定，就可實(shí)現(xiàn)隨時(shí)激發(fā)隨時(shí)發(fā)光的效果。活體、尸體、器官全部可以進(jìn)行成像5.由于熒光是基于物理能量轉(zhuǎn)移原理，對(duì)實(shí)驗(yàn)樣本的生理狀態(tài)要求較低，可以實(shí)現(xiàn)活體、尸體、

6、 尸解組織器官樣本的光學(xué)成像。操作簡(jiǎn)便，測(cè)量快速，每次檢測(cè)時(shí)間僅為毫秒級(jí)，同時(shí)可檢測(cè)多個(gè)動(dòng)物6.分辨率提高，可達(dá)到2-3mm (生物發(fā)光的分辨率在3-5mm)但是，任何技術(shù)都是優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)并存，熒光成像技術(shù)常出現(xiàn)的問題主要有：自發(fā)熒光實(shí)驗(yàn)樣本尤其是小動(dòng)物會(huì)產(chǎn)生自發(fā)熒光，主要是來(lái)源于皮毛和血液的自發(fā)熒光。對(duì)于皮毛中 的黑色素是皮毛中主要的自發(fā)熒光源，其發(fā)光光線波長(zhǎng)峰值在500-520nm左右，在一般的 綠色熒光作為探針時(shí)，影響最為嚴(yán)重。另外，食物中的葉綠素、動(dòng)物血液都會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的非 特異性自發(fā)熒光。但生物體內(nèi)很多物質(zhì)在受到激發(fā)光激發(fā)后，也會(huì)發(fā)出熒光，產(chǎn)生的非特異 性熒光會(huì)影響到檢測(cè)靈敏度。特別是當(dāng)

7、發(fā)光細(xì)胞深藏于組織內(nèi)部，則需要較高能量的激發(fā)光 源，也就會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的背景噪音。光被動(dòng)物組織吸收特性在小動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，光在動(dòng)物組織內(nèi)傳播時(shí)會(huì)被吸收，而且不同類型的細(xì)胞和組織吸收光子的 特性并不一樣，血紅蛋白(hemoglobin)，黑色素是造成體內(nèi)可見光被吸收的主要因素，其 吸收可見光中藍(lán)綠光波段的大部分。但是在可見光大于600納米的紅光、近紅外波段，血紅 蛋白的吸收作用卻很小，在偏紅光區(qū)域，大量的光可以穿過組織和皮膚而被檢測(cè)到。由此可 見，紅光的穿透性在體內(nèi)比藍(lán)綠光的穿透性要好得多，因此逐漸成為活體熒光成像實(shí)驗(yàn)的熱 點(diǎn)，活體熒光實(shí)驗(yàn)建議選擇發(fā)射較長(zhǎng)波長(zhǎng)的標(biāo)記物，近紅外熒光已經(jīng)成為活體成像標(biāo)記的重

8、 要選擇。背景光干擾在一般epi頂部熒光激發(fā)/檢測(cè)類裝置中，激發(fā)背景光的干擾也是熒光檢測(cè)手段的一個(gè)問題， 目前很多技術(shù)類革新都在試圖降低背景光的干擾，比如利用側(cè)面激發(fā)/頂部接收裝置、底部 透射激發(fā)裝置等改變常規(guī)成像儀器的光路設(shè)計(jì)，達(dá)到降低背景光的目的?，F(xiàn)有技術(shù)采用不同 的原理，盡量降低背景信號(hào)，獲取機(jī)體中熒光的準(zhǔn)確信息。目前以NightOWL IILB 983 NC 320 為活體動(dòng)物可見光成像系統(tǒng)為熒光成像的主要代表。第二部分儀器原理以Berthold公司的NightOWL IILB 983 NC320活體動(dòng)物光學(xué)成像系統(tǒng)所示，體內(nèi)可見光成 像系統(tǒng)主要由四部分組成：一、CCD選擇適當(dāng)?shù)腃CD

9、鏡頭，對(duì)于體內(nèi)可見光成像是非常重要的。更為合適的CCD是制冷型的前照 射CCD。選用的CCD鏡頭對(duì)于波長(zhǎng)600nm左右的光必須具有非常高的靈敏度和量子效率，而 且由于需要探測(cè)的光源在皮下幾厘米處，其噪聲信號(hào)要盡可能的小NightOWLllLB 983 NC 320活體光學(xué)成像系統(tǒng)提供更為合適于熒光檢測(cè)的CCD是制冷型的前照射CCD，NC 320。NightOWL IILB 983 NC320活體動(dòng)物可見光成像系統(tǒng)采用的CCD像素大小達(dá)到6.8旦m，像素 達(dá)到400萬(wàn)，分辨率可達(dá)到5旦m。綜上所述，熒光成像對(duì)CCD相機(jī)選擇的要求是：CCD類型：?jiǎn)喂庾佑?jì)數(shù)冷CCD，光子計(jì)數(shù)類CCD可以進(jìn)行熒光量化

10、分析。CCD像素分辨率：由于熒光背景光較強(qiáng)，產(chǎn)生非特異性雜光干擾明顯，需要配有高分辨 率CCD的相機(jī)。CCD光譜覆蓋能力：全波長(zhǎng)覆蓋。熒光對(duì)其它常見參數(shù)的要求：CCD量子效率（QE）:熒光反應(yīng)光子能量強(qiáng)，CCD容易捕捉到光子信號(hào)，CCD不需要 對(duì)QE有過高的要求。CCD感光類別（前部感光/背部感光）：背部感光CCD芯片只有在檢測(cè)極弱光信號(hào)優(yōu)勢(shì) 明顯，但在強(qiáng)光檢測(cè)中與前部感光CCD芯片無(wú)差別，但其成本較高的弱勢(shì)使其不屬于熒光檢 測(cè)常規(guī)要素。CCD讀數(shù)噪音：在強(qiáng)光檢測(cè)中，CCD的噪音影響比起熒光背景光的影響微乎其微，只 有在發(fā)光檢測(cè)時(shí)才會(huì)顯出明顯優(yōu)勢(shì)。CCD暗電流：熒光檢測(cè)不需要對(duì)CCD暗電流有太

11、多要求。二、成像暗箱成像暗箱采用德國(guó)工藝、精鋼鍛造，內(nèi)附高級(jí)光學(xué)避光涂層，可屏蔽宇宙射線及一切光源， 可以使暗箱內(nèi)部保持完全黑暗，CCD所檢測(cè)的光線完全由被檢動(dòng)物體內(nèi)發(fā)出，避免外界環(huán)境 的非特異光污染。CCD鏡頭位于暗箱的頂部，光線通過光圈被CCD收集。暗箱里的CCD相機(jī) 是由軟件控制升降，升降精度可以達(dá)到0.01mm，相機(jī)高度與信號(hào)收集經(jīng)過線性校對(duì)，通過 升降可以獲得寬視野拍照能力，拍照視野（FOV）從3.5厘米到26厘米，最多可同時(shí)檢測(cè)五 只小鼠，并且?guī)в屑訜嵫b置，可以保持觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體溫。三、熒光激發(fā)和接收系統(tǒng)在活體熒光檢測(cè)中經(jīng)常碰到的問題是熒光反射光造成的背景很強(qiáng)，影響信號(hào)的檢測(cè)。因

12、此在 活體熒光檢測(cè)中對(duì)于激發(fā)光能量的控制就顯得非常重要，當(dāng)檢測(cè)樣本小，或檢測(cè)區(qū)域小，適 于用低能量的激發(fā)光，當(dāng)樣本個(gè)體較大，或檢測(cè)位置較深，則高能量的激發(fā)光更適合，或同 時(shí)配合gooseneck鵝頸管激發(fā)裝置使用，效果更佳。同時(shí)，一般的熒光光源的能量會(huì)隨著時(shí) 間和波長(zhǎng)的變化而變化，這對(duì)定量研究的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)是極其不利的。在這樣的應(yīng)用需求下， NightOWL IILB 983 NC 320活體動(dòng)物可見光成像系統(tǒng)率先采用了熒光光源能量反饋控制系 統(tǒng)，并且通過該系統(tǒng)調(diào)節(jié)激發(fā)光的能量在檢測(cè)時(shí)間內(nèi)的穩(wěn)定控制，對(duì)于每一次熒光檢測(cè)都可 保證持續(xù)穩(wěn)定的激發(fā)光，整個(gè)激發(fā)光路能量始終統(tǒng)一、穩(wěn)定，激發(fā)光能量直接關(guān)系到

13、發(fā)射光 信號(hào)強(qiáng)弱，需要確保在整個(gè)長(zhǎng)時(shí)間多次成像中輸出穩(wěn)定的激發(fā)光，達(dá)到檢測(cè)時(shí)間內(nèi)的穩(wěn)定控 制，特別是在多編組樣本分析時(shí)。儀器本身可以通過此系統(tǒng)控制激發(fā)光的能量，0%100%可 調(diào)節(jié)，針對(duì)不同的樣本使用不同強(qiáng)度的激發(fā)光，這就大大提高了活體熒光成像的靈敏度和穩(wěn) 定性，增加了活體熒光成像技術(shù)的應(yīng)用范圍，使儀器成為開放性的檢測(cè)平臺(tái)。在熒光單元，配備典型的熒光激發(fā)/接收裝置，從頂部激發(fā)樣本發(fā)光，當(dāng)相機(jī)對(duì)樣本進(jìn)行調(diào) 焦定位時(shí)，會(huì)同時(shí)檢測(cè)到發(fā)射光信號(hào)，接收信號(hào)強(qiáng)度直接與相機(jī)的調(diào)焦高度相關(guān)，方便獲取 最佳觀測(cè)值。整個(gè)裝置需要配合選擇合適的光源和濾光片來(lái)激發(fā)熒光團(tuán)，檢測(cè)樣本的發(fā)射光。 NightOWL IILB

14、 983 NC320還配有光能在線反饋控制裝置，使整個(gè)激發(fā)光路能量始終統(tǒng)一、 穩(wěn)定，對(duì)于每一次熒光檢測(cè)都可保證持續(xù)穩(wěn)定的激發(fā)光。儀器對(duì)于在不同時(shí)間發(fā)出的同一波 長(zhǎng)的光線，或者不同波長(zhǎng)的光線，光能穩(wěn)定對(duì)于定量研究非常重要，激發(fā)光能量直接關(guān)系到 發(fā)射光信號(hào)強(qiáng)弱，特別是在多編組樣本分析時(shí)，需要確保在整個(gè)長(zhǎng)時(shí)間多次成像中輸出穩(wěn)定 的激發(fā)光。而光源本身能量不是恒定不變的，為此我們的光路配有能量在線反饋控制裝置， 實(shí)時(shí)監(jiān)控光路，反饋補(bǔ)償光源能量變動(dòng)導(dǎo)致的激發(fā)能量突增或缺失，以確保整個(gè)激發(fā)單元的 能量始終統(tǒng)一。光源的光效穩(wěn)定性有利于定量觀察。為了熒光光源發(fā)出的激發(fā)光能穩(wěn)定均勻地照射在待測(cè)樣本上，同時(shí)為了檢測(cè)

15、微小樣本或者進(jìn) 行深度檢測(cè)，NightOWL IILB 983 NC320活體動(dòng)物可見光成像系統(tǒng)設(shè)計(jì)了一系列激發(fā)光組件 實(shí)現(xiàn)上述目的。環(huán)狀照射裝置，激發(fā)高度可調(diào)，其特點(diǎn)是輸出光線均勻統(tǒng)一，使照射在樣品 上的激發(fā)能量始終保持統(tǒng)一。鵝頸管照射裝置，可以得到spot聚光，針對(duì)老鼠等試驗(yàn)動(dòng)物 局部（頭部、四肢、某一內(nèi)臟部等）或小體型物種（蠶、果蠅等）。魚尾型照射裝置的特點(diǎn) 是聚光激發(fā)，高能量激發(fā)光可以提高穿透樣本皮層深度，增強(qiáng)發(fā)射光的強(qiáng)度，適合激發(fā)弱信 號(hào)（由于濃度低或皮下深度原因）。上述激發(fā)裝置采用多模塊即插即用式設(shè)計(jì)，使應(yīng)用更具 針對(duì)性及廣泛性，操作簡(jiǎn)便。另外操作軟件可以直接控制激發(fā)光源的照射能量

16、，它有利于成像系統(tǒng)根據(jù)每一種熒光物質(zhì)、 或?qū)嶒?yàn)樣本種類及其部位作針對(duì)性的調(diào)節(jié)，在同一樣本中對(duì)不同熒光團(tuán)的數(shù)量比較就會(huì)很容 易實(shí)現(xiàn)。軟件控制的濾光片支架提供在一個(gè)測(cè)讀次序中激發(fā)光和發(fā)射光濾光片的快速轉(zhuǎn)換， 特別對(duì)比率制檢測(cè)讀數(shù)的應(yīng)用是非常重要的。操作軟件中靈活的檢測(cè)方案設(shè)定功能可完成在 同一時(shí)間內(nèi)對(duì)不同波長(zhǎng)發(fā)射光的檢測(cè)，發(fā)射光濾光片之間的轉(zhuǎn)換時(shí)間小于500ms，遠(yuǎn)快于相 機(jī)的測(cè)讀時(shí)間。高光阻寬透射率濾光片被安裝在儀器最佳的位置，如果客戶需要，可以很方 便的更換其它種類的濾光片，Berthold提供全波長(zhǎng)濾光片組，多達(dá)幾百中濾光片可供選擇。 通常，我們選擇經(jīng)常使用的6種熒光檢測(cè)配置對(duì)應(yīng)的濾光片，如

17、下所示：GFP:Ex475/20 (53183)Em520/10 (39805)dsRed/RFP:Ex530/20 (38536)Em600/20 (50477)Cy5:Ex630/20 (50097)Em680/30 (49180)Cy5.5:Ex630/20 (50097)Em700/20 (50479)Cy7:Ex700/20 (50475)Em780/20 (50476)ICG Ex740/30 (50480)Em820/30 (50481)(Cardiogreen):為了進(jìn)一步提高靈敏度，也可以配置先進(jìn)的熒光透射儀，用于從樣本底部激發(fā)樣本。激發(fā)光波長(zhǎng)為625nm，強(qiáng)度可調(diào)。透射區(qū)域

18、大小為20cm*20cm。四、軟件系統(tǒng)軟件系統(tǒng)負(fù)責(zé)儀器控制和圖像分析。軟件控制鏡頭的焦距，曝光時(shí)間，濾光鏡的更換，照明 燈的開啟，相機(jī)的升降，操作簡(jiǎn)便。典型的成像過程是：小鼠被麻醉后放入成像暗箱平臺(tái)， 軟件控制相機(jī)的升降到一個(gè)合適的視野，自動(dòng)開啟照明燈拍攝第一次背景圖。下一步，自動(dòng) 關(guān)閉照明燈，在沒有外界光源的條件下拍攝由小鼠體內(nèi)發(fā)出的光，即為活體熒光成像。與第 一次的背景圖疊加后可以清楚的顯示動(dòng)物體內(nèi)光源的位置，完成成像操作。之后，軟件完成 圖像分析過程。使用者可以方便的選取感興趣的區(qū)域進(jìn)行測(cè)量和數(shù)據(jù)處理及保存工作。當(dāng)選 定需要測(cè)量的區(qū)域后，軟件可以計(jì)算出此區(qū)域發(fā)出的光子數(shù)，獲得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。軟

19、件的數(shù)據(jù)處 理和保存功能非常強(qiáng)大，可以加快實(shí)驗(yàn)速度，方便大批量的實(shí)驗(yàn)。原始數(shù)據(jù)與處理后數(shù)據(jù)分開存檔（根據(jù)GLP規(guī)則）多種圖像單位方式，以counts或Photon計(jì)數(shù)均可可以進(jìn)行圖像輸入及輸出（由Winlight生成的TIF文件可很容易的被其它軟件包分析處理，例如Image1 Pro, Media Cybernetics）從而實(shí)現(xiàn)與PET圖像的兼容。去宇宙射線功能，將宇宙射線造成的干擾均化處理三維成像分析多孔板計(jì)算功能-幾何學(xué)圖像分析，可計(jì)算選定區(qū)域的光強(qiáng)度-色彩疊加功能，例如帶有生物發(fā)光圖像的影像合成；帶有雜交信號(hào)的熒光凝膠成像；或其它類型的熒光成像-量化分析-分析結(jié)果以電子表格形式輸出-圖

20、像處理功能強(qiáng)大，帶有圖像對(duì)比、圖像增強(qiáng)工具。-放大功能-插入部分的界定及測(cè)算功能-第三部分應(yīng)用領(lǐng)域通過NightOWL IILB 983活體動(dòng)物光學(xué)成像系統(tǒng)，可以觀測(cè)到腫瘤細(xì)胞的發(fā)展進(jìn)程以及藥物 治療所產(chǎn)生的反應(yīng)，并可用于分子探針、藥物制劑學(xué)、臨床前研究等領(lǐng)域。一、熒光蛋白標(biāo)記的應(yīng)用腫瘤學(xué)應(yīng)用NightOWL IILB 983 NC320活體動(dòng)物光學(xué)成像系統(tǒng)能夠讓研究人員能夠直接快速的測(cè)量各種 癌癥模型中腫瘤的生長(zhǎng)?；铙w熒光成像技術(shù)能夠無(wú)創(chuàng)傷定量檢驗(yàn)小鼠整體的原位瘤、皮下瘤 等?；铙w熒光成像技術(shù)提高了檢測(cè)的敏銳度，可對(duì)癌癥治療中癌細(xì)胞的變化進(jìn)行實(shí)時(shí)觀測(cè)和 評(píng)估。熒光蛋白癌癥模型可應(yīng)用于癌癥體內(nèi)

21、用藥的療法中。利用無(wú)創(chuàng)傷活體熒光成像對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng) 的檢測(cè)，可對(duì)癌癥治療之前和過程中的癌細(xì)胞的變化進(jìn)行實(shí)時(shí)觀測(cè)和評(píng)估。這種方式提供一 個(gè)很好的對(duì)癌細(xì)胞的反應(yīng)和復(fù)發(fā)評(píng)估的預(yù)診斷途徑。該設(shè)備可置于藥物保護(hù)區(qū)域內(nèi)，用于藥 物的常規(guī)檢測(cè)。而且，成像分析軟件更有精確定量的特性，使數(shù)據(jù)分析更容易。定量檢測(cè)整 體老鼠腫瘤，利用無(wú)創(chuàng)傷檢測(cè)手段長(zhǎng)期跟蹤觀察治療方法。二、熒光染料標(biāo)記的應(yīng)用分子探針分子探針的一端聯(lián)有能夠和生物體內(nèi)特異靶點(diǎn)結(jié)合的分子結(jié)構(gòu)（如肽類、酶的底物、配體等）， 另一端則是熒光染料。有科研人員應(yīng)用Cy5.5標(biāo)記的抗體的體內(nèi)代謝實(shí)驗(yàn)，可見肝、腎等處 的分布。這是分子探針應(yīng)用NightOWL HLB 983 NC320活體動(dòng)物光學(xué)成像系系統(tǒng)的先例。熒 光探針本身也需要進(jìn)一步改進(jìn)與提高，需要改進(jìn)探針的通透性，提高活性和特異性，降低毒 性和副作用等。目前這些改進(jìn)都有專門的公司和機(jī)構(gòu)在研究中。藥物治療效果應(yīng)用透射儀從樣本底部激發(fā)光源，可以提高活體熒光成像的靈敏度和檢測(cè)的深度。藥物靶