安捷倫1100+1200液相色譜儀日常和維護和故障診斷

1、Agilent Technologies HPLC 日常維護 & 故障診斷 1Agilent 1100/1200系列HPLC 工作原理日常維護 故障診斷技術(shù)支持服務(wù)流程安捷倫科技有限公司生命科學(xué)與化學(xué)分析儀器部1100/1200 HPLC 日常維護 & 故障診斷21.在線脫氣機 (G1322A/G1379A)2.四元二元/單元泵 (G1311A/G1312A/G1310A)3.手動自動進樣器 (G1313A)4.二極管陣列檢測器 (G1315B)5.可變波長紫外檢測（G1314A)1100/1200 HPLC 日常維護 & 故障診斷31100/1200 HPLC 日常維護 & 故障診斷4Agi

2、lent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷5工作原理Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷6何時需要使用Agilent 1100/1200在線脫氣機Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷7標(biāo)準脫氣機（G1322A). 標(biāo)準脫氣機每個通道體積為12ml，建議排液操作：5ml/min 排液6min以上。微脫氣機（G1379A).微脫每個通道體積為1ml，建議排液操作：2ml/min 排液5min。切勿用5ml/min 流速去排液。Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷8使用Agilent 1100/120

3、0 在線脫氣機須知溶劑棕色玻璃瓶會避免藻類的生長。經(jīng)常過濾溶劑以免其中微粒永久性阻塞毛細管。避免使用下述可腐蝕鋼鐵的 溶劑：堿金屬鹵化物及其酸溶液(如：碘化鋰、氯化鉀等)。高濃度無機酸，如硝酸、硫酸.可能含有過氧化物的色譜醇醚(如THF、二氧六環(huán)、二丙基乙醚)。這些在 使用前必須用干燥氧化鋁過濾除去過氧化物。含強絡(luò)合劑的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。四氯化碳與2-異丙醇或四氫呋喃的混合液。Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷9防止堵塞溶劑過濾器污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影 響泵的運行。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液 (pH4 至

4、7) 中尤其如此。下 列建議將會延長溶劑過濾器的使用壽命并維持泵的運行。 使用滅過菌的溶劑瓶來減緩藻類生長。使用新鮮配制的流動相，特別是水溶劑或鹽緩沖液 建議不超過兩天。如果應(yīng)用許可，在溶劑中加人0.00010.001M的疊氮化鈉。避免溶劑瓶暴露在直射陽光下。用氬氣或氦氣置換流動相上層的空氣。Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷10檢查溶劑過濾器擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，并使液面高于出口30cm此時溶劑會因為重力流出，脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出。查看過濾器是否變色臨時取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常清潔溶劑過濾器將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組

5、件中拿下。先用水沖洗殘留之溶劑然后將過濾器放在裝有濃硝酸 （35）的燒杯里浸一小時。用二次蒸餾水徹底沖洗過濾器。建議不使用超聲波清洗機清洗。將過濾器重新裝好。建議定期清洗溶劑過濾器及溶劑瓶，每三個月至少清洗一次。注意：不要使用沒有安裝溶劑過濾器的系統(tǒng)可能會嚴重堵塞系統(tǒng)Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷11Question?1.如何簡單判斷脫氣機脫氣是否正常？2.如何簡單判斷脫氣機腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷12Question?1.如何簡單判斷脫氣機脫氣是否正常？打開Purge閥，設(shè)定泵的流速2ml/m

6、in，提起當(dāng)前所使用溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭，使之脫離液面一小段時間，此時溶劑傳送管內(nèi)會產(chǎn)生一小段氣泡，放下過濾頭，讓此段氣泡通過脫氣機，如果脫氣機正常，氣泡應(yīng)消失或縮小。2.如何簡單判斷脫氣機腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？關(guān)閉泵，擰開脫氣機出口或比例閥入口管線,此時溶劑會因為重力流出，脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出。Agilent 1100/1200 在線脫氣機日常維護,故障診斷13Agilent 1100/1200 四元泵 (G1311A)14Agilent 1100/1200 四元泵工作原理15Authoring Division Name File NameSecurity

7、Notice (if required) DamperPurge valveSealPistonBall Screw DriveMotor with EncoderGearOutlet Ball ValveActive Inlet ValveAgilent 1100/1200 單元泵工作原理16ABMixerRestriction CapillaryMixing CapillaryClampDamperSolvent Selection ValveA1A2B1B2Agilent 1100/1200 二元泵工作原理17DamperPurge valveMixerABInlet valveOutl

8、et valveWasteInlet valveOutlet valveAgilent 1100/1200 二元泵工作原理18Agilent 1100/1200 泵頭(Pump Head)結(jié)構(gòu)圖Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷19Pump head screwsAgilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷Agilent 1100/1200 泵頭(Pump Head)結(jié)構(gòu)圖20Holding/Lock Screw (PEEK)1234567Agilent 1100/1200 泵頭(Pump Head)結(jié)構(gòu)圖Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷21123Agi

9、lent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷Agilent 1100/1200 泵頭(Pump Head)結(jié)構(gòu)圖22Agilent 1100/1200系列密封墊沖洗Seal Wash ( 可選)當(dāng)流動相中鹽濃度0.01M時，可以減小密封墊的磨損。對于Agilent 1100系列泵為可選件。用10%異丙醇水溶液沖洗WasherSupport seal assemblySealAgilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷23Outlet Ball ValvePurge Valve234567Active Inlet Valve(common to all except 1050)Cartri

10、dge 8new style1old style入口主動閥出口單向閥沖洗閥Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷24如何更換溶劑出口過濾芯Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷25嚴重污染的溶劑出口過濾芯Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷26如何更換活塞桿密封圈Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷27Agilent 1100/1200 系列泵使用須知Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷28多通道梯度閥（MCGV）操作要點 當(dāng)鹽溶液和有機溶劑混合時，鹽溶液可能與有機溶劑完全混溶，而不會出現(xiàn) 沉淀。但是在梯度閥的混合點，但是在梯度

11、閥的混合點，重力作用使鹽顆粒 沉淀下來。通常，閥的A通道用于水相/鹽溶液，而泵的B通道用于有機溶 劑。如果使用的是這樣的配置，鹽將落回到鹽溶液中，并被溶解。當(dāng)泵使用 的不同配置（例如，D-鹽溶液，A-有機溶劑）時，鹽可能會落到有機溶劑 中，從而出現(xiàn)問題。 Agilent 1100四元泵中使用鹽溶液和有機溶劑時，建議將鹽溶液接到下面的 口上，有機溶劑接到上面的梯度閥口上。有機溶劑通道最好直接在鹽溶液通 道的上面。建議定期用水沖洗所有MCGV通道，以去除在閥口上可能出現(xiàn)的鹽 沉淀。Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷29更好地使用四元泵將裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上面(或較高處)。當(dāng)在

12、四元泵上使用鹽溶液或有機溶劑時，建議將鹽溶液接 在底部得梯度閥口上，將有機溶劑接在上面得梯度閥口上。有機通道最好 在鹽溶液通道得上面。建議用水定期沖洗所有MCGV通道除去可能在 閥口析出得鹽結(jié)晶。操作泵之前，用至少兩個體積（標(biāo)準脫氣機30ml，對微脫氣機10ml）沖洗 真空脫氣機,特別是當(dāng) 泵關(guān)閉了一段時間后（例如，過夜），以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑 時。防止溶劑過濾器堵塞及長菌 ，當(dāng)慮器表面有黑色或黃色污染層說明慮器發(fā)生了堵塞，請立即清洗或更換之。定期檢查排液閥的慮芯。檢查方法：擰開排液閥，以水作流動相，流速5ml/min，若壓力大于10bar,則須立即更換。Agilent 四元二元/單

13、元泵日常維護,故障診斷30更好地使用泵當(dāng)使用低流速時（不高于0.2ml/min）檢查所有1/16英寸接頭有無滲漏（用壓力測試或漏液測試）。每當(dāng)更換泵密封墊時 排液閥慮芯也應(yīng)更換。更換活塞密封墊時檢查活塞桿上是否有劃痕。有劃痕的活塞將導(dǎo)致輕度滲漏，并 降低密封墊的使用壽命。應(yīng)盡早更換有劃痕的活塞。使用緩沖溶液時，關(guān)泵前先用水沖洗系統(tǒng)。當(dāng)需要長時間使 用0.1摩爾或更高濃度得緩沖液時，最好選用密封墊清洗附件，以減少對密封墊及活塞桿的磨損。更換活塞密封墊后應(yīng)按照密封墊安裝步驟對其進行磨合，但磨合不適用于 正相密封墊。Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷31 當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件時，由于

14、該附件中也有密封墊，這樣就會增加活塞桿運動時的阻力。所以開泵前一定要用10異丙醇，并將其流速調(diào)至約20滴/分鐘使這溶液流過沖洗裝置。 10異丙醇有助于降低水的表面張力，并有抑菌作用。不要用其它溶劑代替。 當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件而不使用，會使密封墊及活塞桿的壽命減短。Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷32密封墊磨合操作：1.以異丙醇作為溶劑并將其管道直接連接到主動閥(四元泵需一接頭，部件號01001847）。2.連接阻尼管（部件號50222159）于排液閥的出口，阻尼管的另一端置于廢液瓶中。3.打開排液閥，并用異丙醇以2ml/min的流速沖洗系統(tǒng)10分鐘。4.關(guān)閉排液閥，設(shè)置流速使

15、壓力達到350bar，并使系統(tǒng)在此壓力下保持15分鐘。5.關(guān)閉泵，緩慢打開排液閥釋放壓力，重新連接管路，然后沖洗系統(tǒng)中的異丙醇。注意，只有反相密封墊（50636589）才需此操作，而正相密封墊（09051420）因其最高只耐受200bar,所以此操作會損害它。Agilent 四元二元/單元泵日常維護331.更換排液閥慮芯2.清洗,更換主動閥閥芯3.清洗球形單向閥3更換密封墊，活塞桿Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷總結(jié)34Question?1.如何簡單判斷比例閥是否內(nèi)漏？2.何時應(yīng)該更換Purge閥內(nèi)的過濾白頭？3.泵壓力不正?？赡苡赡切┰蛞穑緼gilent 四元二元/單元

16、泵日常維護,故障診斷35Question?1.如何簡單判斷比例閥是否內(nèi)漏？設(shè)定泵使用一個單獨通路（A），打開Purge閥，流速5ml/min，提起其他溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭直至離開液面，觀察這些通路（B、C、D）內(nèi)的溶劑是否隨著流動，正常時均不應(yīng)流動。2.何時應(yīng)該更換Purge閥內(nèi)的過濾白頭？使用純水作流動相，打開Purge閥，流速5ml/min，觀察系統(tǒng)壓力，如果超過10bar，應(yīng)該更換。3.泵壓力不正?？赡苡赡切┰蛞?？氣泡，主動閥故障，出口閥故障，密封墊或柱塞桿磨損，滲漏或堵塞，比例閥故障，傳感器故障，使用比例閥混合時鹽濃度太高Agilent 四元二元/單元泵日常維護,故障診斷36Agi

17、lent 1100/1200 自動進樣器(G1313A)37Agilent 1100/1200 自動進樣器工作原理38Agilent 1100/1200 自動進樣器工作原理39Agilent 1100/1200 自動進樣器結(jié)構(gòu)40Agilent 1100/1200 自動進樣器結(jié)構(gòu)41Agilent 1100/1200 自動進樣器結(jié)構(gòu)42Agilent 1100/1200 自動進樣器使用須知43Agilent 1100/1200 自動進樣器使用須知使用自動洗針功能自動洗針功能可以把程序設(shè)置為“帶有洗針的進樣”,或?qū)⒆詣酉瘁樄δ馨?含在進樣器程序中。當(dāng)使用自動洗針功能時，進樣針在取樣后會轉(zhuǎn)移到洗針

18、 步驟。造成攜留效應(yīng)的主要原因是殘留在進樣針外的少量樣品。通過進樣后 的洗針功能可以立即洗去針外表面上殘留的樣品。當(dāng)進樣閥轉(zhuǎn)回到主流路 時，定量管和針內(nèi)所有的樣品都被沖洗到色譜柱中。這種結(jié)合洗針和沖洗管 路的設(shè)計可以把攜留效應(yīng)減低到最小的程度。去掉洗滌瓶蓋為了獲得最佳的分析結(jié)果，裝有溶劑的洗滌瓶是不加蓋的，而且洗滌瓶中的 溶劑對樣品組分有較好的溶解作用。如果洗滌瓶有蓋將會有少量樣品留在密 封墊上，這樣會把殘留的樣品帶到下一個樣品中。帶有洗針的進樣程序進樣程序中包括了NEEDLE WASH（洗針）命令，當(dāng)這一命令設(shè)置在進樣程序 中時，則在進樣前會進入指定的洗滌瓶中洗針。例 1 DRAW 5L（抽

19、取5L樣品） 2 NEEDLE WASH vial 7（洗針到7號瓶） 3 INJECT（進樣）44洗針對樣品殘留的影響（清洗瓶蓋帽/不蓋帽）Carry- over (%)Injection volume (L)00.050.10.150.20.250.30.350.10.515Primidone00.050.10.150.20.30.350.10.515Phenacetine0.25Injection volume (L)Carry- over (%)不洗針 洗針(不蓋瓶蓋) 洗針(蓋瓶蓋)Agilent 1100/1200 自動進樣器使用須知45Agilent 1100/1200 自動進樣

20、器使用須知46Agilent 1100/1200 自動進樣器使用須知提高進樣量的精度進樣體積小于2L當(dāng)進樣閥切換到BYPASS（旁路）位置時，在定量管內(nèi)的流動相壓力降低。當(dāng) 進樣針抽取樣品時，流動相進一步降低壓力。如果流動相沒有充分脫氣，在 進樣時定量管內(nèi)就會產(chǎn)生小氣泡。在進樣體積小于2L時這些小氣泡就會 影響到進樣體積的精密度。為了使進樣體積小于2L時有最佳的進樣精密 度，建議使用Agilent1100系列真空脫氣機，確保流動相充分脫氣。也可以 在進樣間隙自動洗針，從而進一步提高進樣體 積的精密度。47Agilent 1100/1200 自動進樣器使用須知提高進樣量精度抽樣速度對粘稠的樣品，

21、計量部件從樣品瓶抽取樣品的速度會影響取樣體積的精密 度。如取樣速度太快，在樣品塞中會帶有氣泡，從而影響進樣體積。抽樣速 度的默認值是200L/min (范圍：10-1000L/min)，這一速度適合于大 多數(shù)樣品的取樣要求。但是對于粘稠的樣品要得到最佳的結(jié)果，設(shè)定的抽樣 速度要低于200L/min。進樣器程序中的“DRAW”命令行也用于抽樣速度 的設(shè)定，這是為自動進樣器設(shè)置的。推樣速度默認的推樣速度為200L/min (范圍：10-1000L/min)，當(dāng)進行大體積 進樣時，就要設(shè)定為較大的推樣速度，加快進樣周期。這就是縮短計量器具 從進樣周期開始（當(dāng)注射器活塞回到起始位置時）到推出溶劑所需的

22、時間。進樣器程序中的“EJECT”命令行也用于推樣速度的設(shè)定，這是為自動進樣器設(shè)置的。較快的推樣速度可以加快進樣器程序所需的時間。對于粘稠的樣 品要避免使用過快的推樣速度。當(dāng)使用多次抽樣功能時，推樣速度控制著樣品進入針座毛細管擴大體積部分 的速度，對粘稠的樣品要避免使用過快的推樣速度。48Agilent 1100/1200 自動進樣器使用須知轉(zhuǎn)子密封墊的選擇VespelTM密封墊(可在pH 1-10的條件下工作)標(biāo)準的密封墊是由Vespel密封材料制成的。Vespel適用于pH范圍為2.3 9.5的流動。 Vespel適合于大多數(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域， 但是當(dāng)pH低于2.3或高 于9.5時，Vespel

23、密封墊會很快地損壞，縮短其使用壽命。TefzelTM密封墊 (可在pH 1-14的條件下工作)在流動相的pH低于2.3或高于9.5時，或者在會很快降低Vespel密封墊的 使用壽命的情況下，可以使用由Tefzel制成的密封墊。Tefzel是較Vespel更耐極端pH范圍的材料，但是 Tefzel較為柔軟。通常Tefzel密封墊的理論使用壽命小于Vespel密封墊。 但對于pH很低或很高的流動相，Tefzel密封墊的使用壽命會更長一些。PEEKTM密封墊(可在pH 1-14的條件下工作)49Agilent 1100/1200 自動進樣器日常維護，故障診斷定期檢查各傳動桿是否足夠潤滑，必要時先用酒

24、精棉球擦拭干凈后再給這些桿涂抹少量液體潤滑油，臟的傳動桿使阻力增大從而造成自動進樣器在取樣過程中由于馬達過熱導(dǎo)致出錯。檢查取樣爪子的綠色膠套時否損壞，如果是請更換之，否則會使樣品放置位置不正確而導(dǎo)致如針，針座等損壞。用酒精棉簽擦拭針座防止灰塵污染堵塞針與針座。若場地確實灰塵較多，建議購買自動進樣器門，棕色門還可以幫助防止見光敏感的樣品。505. 更換轉(zhuǎn)子密封圈6. 更換針及針座Agilent 1100/1200 自動進樣器日常維護，故障診斷51Agilent 1100/1200 自動進樣器常見故障漏液 針座磨損 轉(zhuǎn)子磨損 進樣量不準 轉(zhuǎn)子磨損 計量泵故障 抽樣速度太快機械臂移動故障-抓不準樣品

25、瓶 傳感器故障 周圍環(huán)境差 樣品瓶不標(biāo)準Agilent 1100/1200 自動進樣器日常維護，故障診斷52Question?樣品量太少（某些離心處理的樣品），無法過濾，為了盡量避免堵塞，可以采取什么措施？2. 怎樣判斷自動進樣器的轉(zhuǎn)子墊圈磨損 Agilent 1100/1200 自動進樣器日常維護，故障診斷53Answer1.樣品量太少（某些離心處理的樣品），無法過濾，為了盡量避免堵塞，可以采取什么措施？在自動進樣器設(shè)置中，適當(dāng)抬高進樣針抽樣時的位置。Agilent 1100/1200 自動進樣器日常維護，故障診斷54Answer2.怎樣判斷自動進樣器的轉(zhuǎn)子墊圈磨損？ 將第四號管（排液的細塑

26、料管）提起，情 況下應(yīng)沒有液體滴出，如有則轉(zhuǎn)子墊圈磨 損。 色譜現(xiàn)象：壓力不穩(wěn)，保留時間面積重性 差，殘留嚴重。Agilent 1100/1200 自動進樣器日常維護，故障診斷55Agilent 1100/1200 手動進樣器（G1328A,G1328B)56Agilent 1100/1200 手動進樣器工作原理57 1. 為了防止虹吸應(yīng)注意使第五第六號放空管的出口與進樣口保持在同一平面.Agilent 1100/1200 手動進樣器日常維護，故障診斷582. 為了更好的重現(xiàn)性，進樣體積最好是樣品環(huán)的56倍。3. 手動進樣器預(yù)裝Vespel轉(zhuǎn)子墊圈，請參考自動進樣章節(jié)選擇轉(zhuǎn)子墊 圈。4. 一定

27、要使用合規(guī)格的進樣器，規(guī)格為外徑0.028英寸，長2英寸的平 頭針。一定不能使用尖針！它會嚴重刮壞轉(zhuǎn)子墊圈。Agilent 1100/1200 手動進樣器日常維護，故障診斷x59Agilent 1100/1200 手動進樣器日常維護，故障診斷5. 進完樣后一定要及時沖洗進樣器，特別是用鹽或緩沖液作流動相 由于這些溶液會形成結(jié)晶從而磨損墊圈。 沖洗方法： A. 將進樣器轉(zhuǎn)至Inject位置，利用液相泵輸送高純水沖洗(這 時是沖洗樣品環(huán)及溝槽）. B.用閥清洗接頭和注射器沖洗。60當(dāng)用注射器及接頭清洗時，應(yīng)注意不要太靠近進樣器并戴防護眼鏡,防止溶劑濺入眼睛。6. 經(jīng)常用濕潤的軟布清潔進樣器，特別是

28、進樣口周圍。7. 請仔細閱讀進樣器說明書，上面有詳細使用及其它信息。Agilent 1100/1200 手動進樣器日常維護，故障診斷618. 更換轉(zhuǎn)子密封圈。Agilent 1100/1200 手動進樣器日常維護，故障診斷62Question？如何判斷手動進樣器的密封圈漏？Agilent 1100/1200 手動進樣器日常維護，故障診斷63Answer如何判斷手動進樣器的密封圈漏？通常結(jié)合兩方面：從進樣器觀察，進樣后將針拔出，若從進樣口或排空管有液體冒出，顯示密封圈磨損。從結(jié)果看：通常有壓力不穩(wěn)定，峰面積或保留時間不穩(wěn)定和殘留嚴重。Agilent 1100/1200 手動進樣器日常維護，故障診

29、斷64Agilent 1100/1200 柱溫箱器日常維護,故障診斷651. 連接的管路盡量短，防止熱擴散及峰增寬。2. 如果使用小體積分析柱以及流速小于0.2ml/min時建議使用左邊 的柱溫箱(左邊體積較少, 3ul).3. 除非特殊應(yīng)用，建議將兩邊溫度設(shè)置一樣。并確保關(guān)好前蓋。4. 如果是冷凝水導(dǎo)致漏液，建議終止漏液傳感器檢測功能Agilent 1100/1200 柱溫箱器日常維護,故障診斷66Question?1. 如果加熱塊堵塞怎么辦？2. 如果是冷凝水導(dǎo)致漏液怎么辦？Agilent 1100/1200 柱溫箱器日常維護,故障診斷67Answer1. 如果加熱塊堵塞怎么辦？ 用管線連

30、接泵與加熱塊出口，開泵進行反沖。2. 如果是冷凝水導(dǎo)致漏液怎么辦？ 終止漏液傳感器檢測功能Agilent 1100/1200 柱溫箱器日常維護,故障診斷68Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)Agilent 1100/1200 紫外檢測器工作原理Agilent 1100/1200 可變波長紫外檢測器(G1314A)69Agilent 1100/1200 紫外檢測器工作原理Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)70反射鏡1反射鏡2氘燈光源透鏡濾光片（鈥玻璃/遮光）入射狹縫光柵分光器參比光電二極管數(shù)模轉(zhuǎn)換板樣品光電二極管數(shù)模轉(zhuǎn)換板流通池

31、Agilent 1100/1200 紫外檢測器工作原理Agilent 1100/1200 可變波長紫外檢測器(G1314A)71可變的光進口狹縫系統(tǒng)這一微型狹縫系統(tǒng)是利用硅的機械性能和總體布局微型加工技術(shù)以及精確的 制作功能加工而成，它把所需的光學(xué)性能狹縫和光柵集中組合到一起， 成為一個簡單、緊湊的元件。狹縫寬度直接由儀器上的微處理器來控制，并 可用為設(shè)定分析方法的一個實驗參數(shù)。光柵用一個凹面全息光柵來實現(xiàn)分光和光譜成像， 光柵把入射光束全部分散成組 成它的波長，然后把它反射到二極管陣列上。 二極管陣列二極管陣列由1024個光電二極管和一個位于陶瓷基座上的電路組成，在 190- 950nm范圍

32、內(nèi)取樣間隔1nm。Agilent 1100/1200 紫外檢測器工作原理Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)72燈紫外區(qū)域采用有通光狹縫的氘燈作光源， 低壓氘氣體的等離子體能發(fā)出 190nm到大約800 nm的光。 可見光（VIS）和近紅外光采用低噪音鎢燈得 到， 其發(fā)射出的光譜范圍為470-950nm。消色差透鏡（光源透鏡）消色差透鏡接受氘燈及鎢燈發(fā)出的光，將其聚焦后通過流通池。氧化鈥濾光片當(dāng)進行波長校準時， 氧化鈥濾光片用電力驅(qū)動進入光路。流通池底座窗口流通池底座窗口部件把氧化鈥濾光片和流通池分開。流通池室光學(xué)單元有一個流通池室，使流通池易于放入光學(xué)單元，

33、采用相同的快捷安 裝系統(tǒng)可以把各種流通池裝入光學(xué)單元， 在檢查檢測器的光電性能時，拿走 流通池能消除流通池帶來的影響。Agilent 1100/1200 紫外檢測器工作原理Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)73Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)74Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)75Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化Agilent 1100/120

34、0 DAD紫外檢測器(G1315B)76Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化選擇流通池77Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化流通池光路長度對信號值的影響 流通池加長得到的信號值就高，盡管在流通池加長時噪音略有增加，而 信噪比有較大的增加。例如，見圖8，把流通池長度由6mm 增加到10mm， 噪音增加10%，而信號增加70%。 流通池加長會使池體積也有所增加在我們的例子中為5L13L， 這時 峰寬也會增加， 如圖8所示，在此例的梯度洗脫中對分離度沒有影響。 經(jīng)驗表明，池體積應(yīng)為半峰高處峰體積的1/3。 要測定峰體積，把積分后的半 峰寬乘以流速再除

35、以3。Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)78使用較寬的帶寬有降低噪聲的優(yōu)點，能在整個波長范圍內(nèi)降低噪聲和使用 4nm帶寬相比采用30nm帶寬，基線噪聲降低約2.5倍。 而信號值是4-nm 帶寬的75 %，在此例中信噪比增大2倍。 Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)79Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)80Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化Agilen

36、t 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)81Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化82Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化峰寬（響應(yīng)時間）響應(yīng)時間是說明在流通池中光吸收產(chǎn)生突變后出現(xiàn)檢測器信號的快慢， 檢測器采用數(shù)值濾波器使響應(yīng)時間與色譜圖中峰寬相適應(yīng)， 這一濾波器不影響峰 面積和峰的對稱性， 正確設(shè)定此濾波器會大大減小基線噪聲（見圖9），但 會使峰高略有下降。 另外這一濾波器能降低數(shù)據(jù)的速度，優(yōu)化色譜的積分和 顯示，能最大限度地減少存儲色譜和光譜的磁盤空間。Agilent 1100/1200 DAD紫外檢測器(G1315B)83A

37、gilent 1100/1200 DAD紫外檢測器性能優(yōu)化表6 列出檢測器對濾波器的選擇。 為獲得最佳效果，把峰寬設(shè)定為接近于色 譜圖中窄峰的寬度， 此時響應(yīng)時間約為峰寬的1/3，這樣會使峰高降低 5%，峰的加寬不到5%。 在檢測器中峰寬設(shè)定減小會引起峰高增加9.5的流動相，以防腐蝕流通池石英窗，避免使用可能析晶的流動相，防止流通池堵塞VWD 40bar DAD 120bar MWD 120bar FLD 20bar RID 5barRID、FLD永遠是最后一個檢測器注意不同廠家接頭問題，防止?jié)B漏或毀壞色譜柱和接頭 Agilent 1100/1200 HPLC日常維護總結(jié)110HPLC常用的色

38、譜柱接頭0.090 in.0.130 in.0.090 in.0.170 in.SwagelokWatersParkerRheodyneValcoUptight0.090 in.0.080 in.Troubleshooting LC Fittings, Part II.J. W. Dolan and P. Upchurch.LC/GC Magazine 6:788 (1988)Agilent 1100/1200 HPLC日常維護總結(jié)111Agilent 1100/1200 HPLC日常維護總結(jié)毛細管的區(qū)分 Blue 0.25 mmColor i.d.Red 0.12 mmGreen 0.17

39、mm112Agilent 1100/1200 HPLC日常維護總結(jié)113EMF早期維護預(yù)警維護信息預(yù)報(EMF)在維修時要更換磨損和受力的元件。在理想的情況下，零部件更換頻率由儀器的使用強度和分析條件所決定，而不決定于預(yù)先設(shè)定的時間間隔。 維護信息預(yù)報（EMF）的特點是可以監(jiān)控儀器中特殊元件的使用，并且在超 過預(yù)先設(shè)定的時間后立即把信息反饋給用戶，在用戶界面上可以看到提示的 信息，提醒用戶按計劃進行維修。Agilent 1100/1200 HPLC日常維護總結(jié)114EMF早期維護預(yù)警基于儀器的使用情況，計劃儀器維護的周期。根據(jù)以前的使用經(jīng)驗，輸入需要維護的限制值( limits)當(dāng)實際值達到需

40、要維護的限制值時，EMF圖標(biāo)上的綠色對勾標(biāo)記變成黃色問號。Agilent 1100/1200 HPLC日常維護總結(jié)115Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)1100/1200 指示燈的意義電源指示燈：位于每個模塊的左下方。把電源打開后，該燈會亮綠色。如果把電源打開后，此燈不亮，請檢查是否有電源輸入。在確認有電源的情況下，請與安捷倫聯(lián)系。116狀態(tài)指示燈：位于各自模塊的右上方。呈黃色：該儀器在未準備好狀態(tài)(Not-ready)或正在自檢。呈綠色：該儀器正在運行，采集數(shù)據(jù)(Run)。無顏色：該儀器已準備好等待運行(Pre-run)。呈紅色：該儀器檢測到有故障發(fā)生，儀器在錯誤狀態(tài)

41、(Error).1100/1200 指示燈的意義Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)117通常儀器在開機后狀態(tài)指示燈顯示：脫氣機：無顏色。脫氣機在開機后應(yīng)很快就能達到準備好的狀態(tài)，且在正常 情況下，該燈常滅。顯示內(nèi)部真空足夠且密封性好。泵：黃色，等待開泵。進樣器：自檢正常后應(yīng)無顏色，等待進樣命令。柱溫箱：黃色，等待開啟控溫命令。VWD/DAD:黃色，等待開燈命令。FLD: 無顏色，因為熒光檢測器在不亮燈的情況下可做化學(xué)發(fā)光檢測，記住要做熒光檢測一定要開燈。RID: 黃色，等待purge 參比池命令，RID一定要沖洗樣品池和參比池直 至兩者光強度一致后才能準備好。1100/1

42、200 指示燈的意義Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)118Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)當(dāng)儀器出現(xiàn)錯誤并亮紅燈時怎樣檢查提示信息。一 . 首先檢查脫氣機是否也亮紅燈。 若是，請按正常程序關(guān)機然后檢查脫氣機后面是否有一遙控線(與標(biāo)有remote 的接口連接)。 若有，將之卸下然后單獨再開脫氣機，觀察約8分鐘后是否再現(xiàn)紅色，如果 是則脫氣機有問題。否則脫氣機應(yīng)無問題。二 . 若脫氣機不亮紅燈只有其它模塊顯紅燈。 1. 在工作站中分別左鍵單擊各個紅色的圖標(biāo)然后選擇Not ready information 如果圖標(biāo)上無此選項，請單擊菜單View然后再

43、單擊其下的Full menu)。 2. 根據(jù)第一點做法直至找出錯誤信息不是提示shutdown的模塊及其信息，根 據(jù)此信息就可以查看可能導(dǎo)致此錯誤原因。若不明白此提示信息，請將其記錄下來并與安捷倫聯(lián)系。1100/1200 指示燈的意義119常見的錯誤信息及其解決方法：Shutdown: 表示該模塊并無問題，是由于其它模塊出現(xiàn)錯誤而導(dǎo)致它 也亮 紅色。比如其它模塊漏液或脫氣機出錯等。Leak: 表示該模塊發(fā)生漏液，此時無需關(guān)機，請檢查該模塊的漏液傳感 器周圍是否有液體。如果是，先用紙將之吸干后點擊system on再檢 查液體從何而來。如果不是，請與安捷倫聯(lián)系，這種情況很可能是 儀器內(nèi)部元件有問

44、題。Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)120Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)1. 色譜柱未擰緊，多數(shù)發(fā)生再更換柱后。這時柱溫箱會顯示Leak。注意，柱溫箱的漏液 傳感器在兩加熱塊之間的中間位置。請用吸水紙確認，因為有時單用眼觀察不易察覺。2. 連接管路兩端未擰緊，或連接管路斷裂。3. 進樣閥漏液，如自動進樣器轉(zhuǎn)子墊圈磨損造成漏液。4. 泵漏液，開泵后將手伸入泵底部，可感到漏液。5. 冷凝水的形成，如果使用柱溫箱的降溫功能，可能會有冷凝水生成從而使柱溫箱顯 示漏液。這種情況下可取消柱溫箱的檢漏功能(在工作站中的 instrument 菜單下選擇 mo

45、re column thermostat 然后選擇取消柱溫箱的檢漏功能).6. 流動池漏液。漏液的主要原因：121Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)Lamp current 和UV lamp ignited failed.可能原因：1. 燈已嚴重老化。請在工作站中的diagnosis界面中查看燈的使用累積時間(viewdiagnosisEMF選擇檢測器). 通常普通氘燈能用1000小時或以上，而長壽命氘燈能用2000小時或以上.2. 燈連線未接好。3. 檢測器的主板和或電源損壞。注意，更換燈后建議將燈的使用時間回零：在diagnosis中單擊檢測器圖標(biāo)，然后選擇show

46、module details 再單擊右邊的帶有扳手的圖標(biāo)選擇maintenance logbook entry，在項目中選擇lamp replace,點ok然后在隨后的提示中回答yes即可。122系統(tǒng)壓力過高。1 首先擰開排液閥，以純水作流動相并設(shè)流速為5ml/min若壓力超過10bar，應(yīng)先更換排液閥的慮芯。2 若排液閥的慮芯沒有堵塞，卸下色譜柱，然后用一兩通代替色譜柱，以水作流動相設(shè)流速為1ml/min。通常壓力不會超過20bar,否則系統(tǒng)可能有堵塞。3 若上述的壓力超過20bar,我們可按照從后到前的原則，也就是說先卸下進流動池的連接管接頭，開泵后，若壓力正常則流動池堵塞若仍不正?？蓪⑦@

47、段管另一端也卸下，開泵后再觀察壓力情況。 同樣道理，我們就可以找到堵塞的地方。容易堵塞的地方：流動池入口管；自動進樣器的針及針座；柱溫箱Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)123系統(tǒng)壓力過低，不穩(wěn)定或沒液流。首先擰開排液閥，設(shè)流速12ml/min后開泵，觀察有無液流，若有再仔細觀察液流是否有倒吸現(xiàn)象如不能確定可用量筒測量流速的準確性。如上述無液流，或流速不準多數(shù)為主動閥閥芯或主動閥故障， 或泵有嚴重漏液。怎樣是大致判斷主動閥抑或其閥芯故障？可用以下方法：當(dāng)泵運轉(zhuǎn)時用手指輕捏主動主體，正常的主動閥能感到有節(jié)奏的脈動，如果沒有， 主動閥有問題。如果有則可以將主動閥閥芯取出進行超

48、聲波清洗，如仍有問題，可更換閥芯。注意，千萬不要把整個主動閥放入超聲波清洗這樣會損壞主動閥。若上述流速準確但擰緊排液閥后壓力不穩(wěn)定，請仔細檢查有無漏液。(通常漏液地方：各接口包括色譜柱，泵，進樣閥等)Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)124Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)保留時間不穩(wěn)定。1. 首先觀察保留時間是否有規(guī)律的變化，并同時觀察壓力是否穩(wěn)定若壓力穩(wěn)定而保留時間呈有規(guī)律變化，多數(shù)是色譜柱未平衡好，特別是含有的流動相，需較長的時間去平衡。2. 若壓力穩(wěn)定而保留時間無規(guī)律變化，請檢查溶劑過濾頭及真空腔是否有堵塞。再平衡色譜柱足夠時間，如仍然不佳，

49、可更換一色譜柱。3. 若壓力不穩(wěn)定，請檢查造成壓力不穩(wěn)定的因素，如：漏液，排液時間不足夠，鹽濃度過高導(dǎo)致鹽析，主動閥比例閥內(nèi)漏，等。125Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)峰面積重現(xiàn)性不好。1. 首先觀察壓力是否穩(wěn)定，以及觀察峰面積變化是否有規(guī)律。 若壓力不穩(wěn)定，請檢查造成壓力不穩(wěn)定的因素，如：漏液，排液時間不足夠，鹽濃度過 高導(dǎo)致鹽析，主動閥比例閥內(nèi)漏，等。 2. 若壓力穩(wěn)定但峰面積呈無規(guī)律變化，請檢查樣品是否足夠，確認樣品的穩(wěn)定性，必要時 重新配制。檢查進樣閥是否漏液。等。 3. 若壓力穩(wěn)定且峰面積呈規(guī)律變化，多數(shù)為色譜柱未平衡好。126基線不穩(wěn)定?；€漂移：色譜柱未

50、平衡好，柱溫未穩(wěn)定，流動相變化，等?；€噪音： 可能原因是：流動池有氣泡，流動 池被污染，對紫外檢 測器可將流動池移走即可確認。 色譜柱和或系統(tǒng)受污染。 燈能量不足。 外界因素影響，如電源，溫度和濕度，震動，等。Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)127工作站無法與儀器通訊。安捷倫液相色譜與計算機有兩種通訊方式：1. LAN 連接方式：液相與計算機用網(wǎng)線連接，兩者直接連接時用交 叉網(wǎng)線。若通過集線器或交換機的話則使用平行網(wǎng)線。2. GPIB由于不同的連接方式處理方法有較大區(qū)別，所以先檢查您的儀器是何種方式連接。首先檢查線纜是否連接好，必要時可重新連接一遍。Agilent 1100/1200 HPLC故障診斷總結(jié)128對于用網(wǎng)線(LAN)方式連接： 在儀器與計算機都打開的情況下，先分別查看儀器和計算機的IP地址： 計算機IP地址查看方法：右鍵點擊桌面上的網(wǎng)絡(luò)鄰居圖標(biāo)然后選最后一項，即屬性(properties)。在繼而出現(xiàn)的畫面中右鍵點擊本地連接(local area connection),選擇屬