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1、藥物對(duì)離體平滑肌受體的作用適用對(duì)象適用對(duì)象適用對(duì)象適用對(duì)象中藥學(xué)、藥學(xué)、藥物制劑專業(yè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模豪猛檬改c或上段空腸,觀察乙酰膽堿,阿托品與氯化鋇對(duì)離體兔腸平滑肌的作用。實(shí)驗(yàn)原理:離體兔腸平滑肌在適當(dāng)?shù)臈l件下可以保持較長(zhǎng)時(shí)間的自動(dòng)節(jié)律性收縮。根據(jù)受體在腸道平滑肌中分布的特點(diǎn),可觀察藥物的作用,并可借助工具藥分析其作用原理。儀器設(shè)備:(動(dòng)物與藥品試劑)1、動(dòng)物:家兔2.5kg左右2、藥品與試劑:0.001%氯化乙酰膽堿溶液,0.1%硝酸毛果蕓香堿溶液0.1%硫酸阿品托溶液0.05%溴化新斯的明溶液1%氯化鋇溶液臺(tái)氏液3、儀器設(shè)備:BL-420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),力換能器,HW-300型恒溫平滑

2、肌槽,多用電源插座,鐵支架,雙凹夾,L型鉤,培養(yǎng)皿,縫線,1ML注射器,10ML注射器,手術(shù)器械一套。四、相關(guān)知識(shí)1、由于腸肌上分布有M受體,當(dāng)向營(yíng)養(yǎng)液加入Ach(N、M受體激動(dòng)藥、阿品托(M受體阻斷藥)、毛果蕓香堿(M受體激動(dòng)藥)、新斯的明(抗膽堿酯酶藥)等藥物時(shí),可與相應(yīng)的受體結(jié)合,激動(dòng)或阻斷M受體,引起腸肌收縮或松弛。2、氯化鋇是一種非受體作用的有毒化合物,對(duì)腸肌有直接的興奮收縮作用,常用于藥理實(shí)驗(yàn)中、五、實(shí)驗(yàn)步驟(一)儀器連接1、打開(kāi)HW300型恒溫平滑肌,恒溫37-38攝氏度。2、啟動(dòng)電腦,確認(rèn)USB接口已經(jīng)連通,打開(kāi)BL420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件,在“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”下拉菜單中選擇“消

3、化道平滑肌活動(dòng)”,或在“輸入信號(hào)”下拉菜單中選擇“1通道”的“力”,在“1通道”連接力換能器。(二)制備標(biāo)本取家兔1只,擊頭致死,剖腹,取出空腸或十二指腸,放入臺(tái)氏液的器皿中,用吸管吸取臺(tái)氏液將腸空物沖凈,剝離腸系膜。將腸管煎成2cm的腸段備用。腸管兩端對(duì)角穿線,將其安放在有臺(tái)氏液的平滑肌槽中,上端連接拉力換能器,下端系于L型鉤上,通入空氣供氧。(三)藥物對(duì)離體兔腸平滑肌的作用1、加藥:待腸肌穩(wěn)定10min后,描記正常收縮曲線,然后依次加藥并記錄收縮曲線的變化,順序如下:(1)0.001%Ach溶液0.2ml,當(dāng)腸肌活動(dòng)曲線降至基線時(shí),臺(tái)氏液連續(xù)沖洗3次;(2)重復(fù)(1),作用達(dá)到最高點(diǎn)時(shí)再加

4、0.1%阿品托0.2ml,記錄曲線變化后,臺(tái)氏液連續(xù)沖洗3次;(3)1%氯化鋇1.0ml作用達(dá)到最高峰時(shí)立即加入0.1%阿品托1.0ml,記錄曲線變化;(4)待腸肌活動(dòng)穩(wěn)定后加入0.1%毛果蕓香堿0.5ml觀察描記腸肌活動(dòng)曲線后,臺(tái)氏液連續(xù)沖洗3次;(5)加0.1%阿品托0.5ml,作用明顯時(shí)再加0.1%毛果蕓香堿0.5ml,觀察描記腸肌活動(dòng)曲線后,臺(tái)氏液連續(xù)沖洗3次;(6)加0.05%新斯的明溶液0.5ml,描記腸肌活動(dòng)曲線變化。2、記錄結(jié)果:將描記的曲線圖打印剪貼,標(biāo)明題目,時(shí)間,地點(diǎn),室溫,實(shí)驗(yàn)者與主要條件(如腸段長(zhǎng)度,走紙速度,加藥標(biāo)記等)。(四)須知:1、實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前24h禁食

5、,不禁水,已保持腸道無(wú)糞便。2、每加入藥液,至作用明顯后,用臺(tái)氏液連續(xù)沖洗3次,等到曲線恢復(fù)到用藥前的水平,隨之描記一段基線,再加入下一個(gè)藥液,如果腸管反應(yīng)已失靈,可更換一段腸管。3、向管加藥時(shí),不要觸碰連接線,也不要把藥滴到管壁上4、腸管與換能器連接線不宜太緊,亦不能與浴管壁接觸。5、關(guān)閉電腦時(shí),確認(rèn)USB接口已經(jīng)關(guān)閉,再關(guān)閉BL420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件,關(guān)閉電腦。六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求、實(shí)驗(yàn)報(bào)告容應(yīng)包括:實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)原理、器材、藥品與試劑、動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)方法、結(jié)果與討論等部分。結(jié)果要對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;討論要對(duì)實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題進(jìn)行描述并分析原因。七、思考題1、試分析上述藥物對(duì)離體腸平滑肌有什么作用。為什么?2、用實(shí)驗(yàn)方法,還可以做哪些實(shí)驗(yàn)?八、實(shí)驗(yàn)成績(jī)?cè)u(píng)定方法原理描述:10分實(shí)驗(yàn)流程:10分?jǐn)?shù)據(jù)記錄:10分解決問(wèn)題的能力:20分資料搜集:10分實(shí)驗(yàn)結(jié)果:10分實(shí)驗(yàn)效果10分附錄:許多二價(jià)離子都和鈣離子相似的作用,如鎂離子。可能是這么機(jī)制吧。興奮信號(hào)傳到肌接頭處時(shí),興奮引起鈣離子大量釋放.釋放的鈣離子促進(jìn)神經(jīng)軸突中的囊泡膜與接頭前膜(突觸前膜)發(fā)生融合而破裂而釋放囊泡中的乙酰膽堿(遞質(zhì)),乙酰膽堿(遞質(zhì))經(jīng)過(guò)神經(jīng)肌肉接頭間隙(突觸間隙);與接頭后膜(突觸后膜)上的受體結(jié)合,引發(fā)終板電位。其過(guò)程,包括三個(gè)階段.(一是鈣離

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