藥業(yè)公司潔凈區(qū)房間沉降菌動態(tài)測試方案

1、藥業(yè)公司潔凈區(qū)房間沉降菌動態(tài)測試方案1測試方法本測試方法利用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來評定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈區(qū)的潔凈度。2使用的儀器和設(shè)備2.1高壓消毒鍋：使用時應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。2.2 恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進(jìn)行檢定。2.3培養(yǎng)皿一般采用90mm15mm硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。使用前將培養(yǎng)皿置于121濕熱滅菌30min。3培養(yǎng)基：大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）。將培養(yǎng)基加熱熔化，冷卻至約45在無菌操作條件下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿約15ml。待瓊脂

2、培養(yǎng)基凝固后，將培養(yǎng)基平皿放入3035恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，若培養(yǎng)基平皿上確無菌落生長，即可供采樣用，制備好的培養(yǎng)基平皿應(yīng)在28的環(huán)境中存放。4測試步驟4.1采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預(yù)先確定取樣點，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露4小時，單個沉降碟的暴露時間可以少于4 小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測并累積計數(shù)，再將培養(yǎng)皿蓋上蓋后倒置。4.2培養(yǎng)全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在3035培養(yǎng)，時間不少于2天。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗，可每區(qū)域選定3只培養(yǎng)皿作對照試驗，與采樣皿同時操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，結(jié)果應(yīng)無菌落生長。4

3、.3菌落計數(shù)用肉眼直接計數(shù)，然后用510倍放大鏡檢查，是否有遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。5注意事項5.1 測試用具要做滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。5.2 采取一切措施防止人為對樣本的污染。5.3 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。5.4 由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，必要時用顯微鏡鑒別。5.5 采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。6 測試規(guī)則6.1 測試狀態(tài)沉降菌測試前，被測試潔凈區(qū)的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差必須控制

4、在規(guī)定值內(nèi)。沉降菌測試前，被測試潔凈區(qū)已經(jīng)過消毒。6.2 測試時間對非單向流，如B級、C級、D級以上的凈化房間，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30分鐘開始。6.3沉降菌計數(shù)6.3.1采樣點數(shù)目及其布置最少采樣點數(shù)目：沉降菌的最少采樣點數(shù)可按下表確定。在滿足最少測點數(shù)的同時，不宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見下表。最少采樣點數(shù)目：面積（）潔凈度級別A 、B級C級D級102-32210-2042220-4082240-1001642100-20040103注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風(fēng)面積，對于非單向流潔凈室，指的是房間面積。采樣點的布置工作區(qū)測試點位置離地0.81.5m左右（略高于工作面

5、）。 可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點，采樣點的布置應(yīng)力求均勻，避免采樣點在某局部區(qū)域過于集中，某局部區(qū)域過于稀疏（如圖3）。6.4 記錄：測試報告中應(yīng)記錄生產(chǎn)開始的時間以及測試時間、現(xiàn)場操作人員數(shù)量及位置、現(xiàn)場設(shè)備運轉(zhuǎn)數(shù)量及位置、房間溫度、相對濕度、壓差、測試狀態(tài)及測試數(shù)據(jù)。6.5結(jié)果計算單個沉降碟的暴露時間可以少于4 小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測并累積計數(shù)。6.6 結(jié)果評定6.6.1用平均菌落數(shù)判斷潔凈室的空氣中的微生物。6.6.2 潔凈區(qū)內(nèi)的平均菌落數(shù)必須符合所選定的評定標(biāo)準(zhǔn)。6.6.3 若某潔凈區(qū)的菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域先行消毒，然后重新測試兩次，測試結(jié)果必須合格。 測定結(jié)果見附件。附件 潔凈區(qū)沉降菌測試記錄