黃芩苷的提取與鑒定

1、天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)開題報告黃苓苷的提取及結(jié)構(gòu)鑒定制藥112陳菲菲201104040203黃芩苷的提取及結(jié)構(gòu)鑒定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、優(yōu)選黃苓苷的提取工藝2、掌握從黃苓中提取、精制黃苓苷的原理、方法及操作要點(diǎn)。3、掌握黃苓苷的結(jié)構(gòu)鑒定原理及方法二、研究意義黃苓苷的藥理活性是多方面的，它在清除氧自由基、減輕組織的缺血 再灌注損傷、調(diào)節(jié)免疫、促進(jìn)細(xì)胞凋亡等多方面均有作用，隨著生物 技術(shù)的發(fā)展以及中藥化學(xué)成分分離水平的進(jìn)步，黃苓苷在抗氧化、抗 腫瘤、抗HIV以及治療心血管疾病等方面均具有潛在的開發(fā)應(yīng)用價值三、基本原理1、用回流法提取黃苓苷，用酸沉淀法純化黃苓苷。2、黃苓苷具有一定脂溶性，具有酸性，可以在鹽酸中

2、沉淀出來，黃 苓苷為淡黃色針晶，幾乎不溶于水，四、實(shí)驗(yàn)所用試劑、儀器的型號材料：黃苓干燥根，硅膠G薄層層析板儀器：UV2550紫外可見分光光度計，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，LXJ-II離心沉淀 機(jī)，200g搖擺式高速中藥粉碎機(jī)，電子天平，循環(huán)水式真空泵，抽 濾裝置，圓底燒瓶（500ml），水浴鍋，冷凝管，索氏提取器，層析缸 試劑：2mol/L鹽酸，60%乙醇，10%氫氧化鈉，乙酸乙酯，甲醇，甲 酸五、分離方法創(chuàng)新之處中等濃度（50%70%）的乙醇水溶液其極性與黃苓苷的極性相似便 于其溶出，而低濃度（40%及以下的乙醇極性大，雜質(zhì)的溶出量大 大增加，高溶度（90%級以上）的乙醇溶液極性較小，主要用于藥 材中的

3、揮發(fā)油、葉綠素、樹脂等的溶出。因此，本實(shí)驗(yàn)采用了 60% 的乙醇溶液作為提取溶劑。六、實(shí)驗(yàn)流程及操作方法1、黃苓苷的提取將黃苓干燥根粉碎，稱取粗粉100g，裝入1L的圓底燒瓶加入4倍量 即400ml的60%乙醇，攪拌均勻，90C回流提取1h。提取完進(jìn)行抽濾， 將濾渣倒入圓底燒瓶中，加300ml 60%乙醇繼續(xù)回流30min，重復(fù)上 一步再回流30min。合并3次濾液，65C減壓濃縮至無醇味將水液水 浴加熱到80C，用2mol/L的鹽酸調(diào)PH至12，保溫30min，室溫靜 置12h，沉淀。2000r/min離心2min，棄上清，向沉淀中加10倍水 量即700ml，攪拌均勻，加10%氫氧化鈉調(diào)PH

4、至7,靜置1h2000r/min 離心2min，棄沉淀，將上清液加熱至40C，攪拌均勻，加入等體積 即700ml的60%乙醇，靜置1h。2000r/min離心2min，棄沉淀，將上 清液水浴加熱至80C，用2mol/L的鹽酸調(diào)PH至12，保溫30min， 室溫靜置1h，沉淀，離心，棄上清液，得粗黃苓苷濕重43g。2、黃苓苷的薄層分析吸附劑：硅膠G薄層層析板，厚0.250.3mm 展開劑：乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水（7： 2： 0.5： 0.5 v/v/v） 樣品配成合適濃度的甲醇液，用點(diǎn)樣毛細(xì)管點(diǎn)樣，每點(diǎn)一次要等到干 了才能點(diǎn)下次，點(diǎn)樣斑點(diǎn)直徑不大于2mm。層析缸用展開劑飽和20min 后，將點(diǎn)樣板垂直放入層析缸，上行展開，展層完畢后，取出，晾干， 放在254nm紫外燈下觀察。3、黃苓苷的紫外吸收圖譜取少量黃苓苷重結(jié)品樣品于50ml容量瓶中，加甲醇溶解至顏色微黃， 用紫外分光光度計在200-400nm進(jìn)行紫外掃描200-400nm內(nèi)最大吸收波長為278nm圖1最大吸收波長的確定七、進(jìn)度計劃第一周提取黃苓苷第二周薄層色譜分析純度分析和紫外分光光度法鑒定 八、合理化建議1、本實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)率不高，原因可能有：粗粉未浸泡；靜置時間短；調(diào) PH時溫度控制不好。2、黃苓苷在一定溫度和濕度下能酶水解成苓素及葡萄糖醛酸