《培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變化》學(xué)案

1、培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化釀酒和做面包都需要酵母菌，這些酵母菌可以用液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）來(lái)培養(yǎng)。培養(yǎng)液中酵母菌種群的增長(zhǎng)情況，與發(fā)酵食品的制作有密切關(guān)系。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄颗囵B(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？實(shí)驗(yàn)原理：對(duì)試管中培養(yǎng)液中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測(cè)的方法，我們一般情況下是利用血球計(jì)數(shù)板對(duì)酵母菌的數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。一、血球計(jì)數(shù)板：血球計(jì)數(shù)板是一種專門(mén)用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻璃片制成的玻璃中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間

2、的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室。大方格的長(zhǎng)和寬各2mm,深度為0.1mm,其容積為0.4mm3,即2mmX2mmX0.1mm方格的計(jì)數(shù)板。血細(xì)魏扳掏遇（O扎山面圖：B織切面圖I.恥堀胞計(jì)數(shù)扳:話的片；a計(jì)融窒卜貯怖咿廳眾血訓(xùn)慝計(jì)數(shù)板抖閥c.）故丿、皤的削尊恪申幅人數(shù)電計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格：一種是X型，即大方格內(nèi)分為中格，每一中格又分為小格；另一種是X型，即大方格內(nèi)分為中格，每一中格又分為小格。但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，它們都有一個(gè)共同的特點(diǎn)，即每一大方格都是由xx個(gè)小方格組成。4*1建羽審IH他瞽出莓I幘輕餾跡蜒鑒器器黑盟ITUvwmu齡fr-rd-:s!:sMa二、血球計(jì)數(shù)板的使用方法步驟使用血球

3、計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，按照如下的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行：鏡檢計(jì)數(shù)室。在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)；.加樣品。將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；.計(jì)數(shù)。稍待片刻（約），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。三、血球計(jì)數(shù)板的使用注意事項(xiàng)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化實(shí)驗(yàn)是一個(gè)歷時(shí)較

4、長(zhǎng)（天左右）的實(shí)驗(yàn)，事前一定要做好周密的計(jì)劃，定程序、定時(shí)間、定人員。每天采用抽樣檢測(cè)法使用血球計(jì)數(shù)板對(duì)酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，在計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)從以下幾方面注意。.每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察天。從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。具體方法是：搖勻試管，取酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無(wú)菌水稀釋，稀釋倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有一個(gè)酵

5、母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計(jì)數(shù)。.活酵母有芽殖現(xiàn)象，若芽體達(dá)到母細(xì)胞大小的一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)，若芽體小于母細(xì)胞一半時(shí)為個(gè)酵母細(xì)胞。.對(duì)于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，另兩邊不計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí)，如果使用格X格規(guī)格的計(jì)數(shù)室，要按對(duì)角線位，取左上、右上、左下、右下個(gè)中格即個(gè)小格的酵母菌數(shù)；如果規(guī)格為格X格的計(jì)數(shù)板，除了取其個(gè)對(duì)角方位外，還需再數(shù)中央的一個(gè)中格即個(gè)小方格的酵母菌數(shù)。.計(jì)數(shù)一個(gè)樣品要從兩個(gè)計(jì)數(shù)室中計(jì)得的平均數(shù)值來(lái)計(jì)算，對(duì)每個(gè)樣品可計(jì)數(shù)三次，再取其平均值。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)不時(shí)調(diào)節(jié)焦距，才能觀察到

6、不同深度的菌體。按公式計(jì)算每（或）菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)。血球計(jì)數(shù)板的清潔血球計(jì)數(shù)板使用后，用自來(lái)水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，或用的乙醇、無(wú)水乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑脫水使其干燥。通過(guò)鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復(fù)清洗直到干凈為止。實(shí)驗(yàn)過(guò)程：略實(shí)驗(yàn)結(jié)果：培養(yǎng)時(shí)I可（h）鞏固練習(xí)：、在“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”實(shí)驗(yàn)中正確的實(shí)驗(yàn)方法是.將適量的培養(yǎng)液進(jìn)行高溫處理然后立即加入酵母菌將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)室上后從蓋玻片邊緣滴加酵母菌培養(yǎng)液.若取樣的小方格中酵母菌過(guò)多多選擇鄰近的一個(gè)小方格計(jì)數(shù).對(duì)壓在小方格界線上的酵母菌只計(jì)數(shù)上下兩條界線上的酵母菌TOC o 1-5 h z、在用血球計(jì)數(shù)板（X方格）對(duì)某一稀釋倍樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)在一個(gè)方格內(nèi)（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為）酵母菌平均數(shù)為，據(jù)此估算培養(yǎng)液中有酵母菌個(gè)。、在“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”實(shí)驗(yàn)中，某同學(xué)用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)血球計(jì)數(shù)板的小方格X內(nèi)酵母菌數(shù)量的平均值為個(gè)。假設(shè)蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為，那么培養(yǎng)液中酵母菌的個(gè)數(shù)約為XXXX、