DB32-T 3863-2020甘薯莖線蟲病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程-（高清現(xiàn)行）

1、ICS65.020.01 B23DB32江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB 32/ T 38632020甘薯抗莖線蟲病鑒定技術(shù)規(guī)程Technical regulation for evaluation on sweetpotato resistance to stem nematode disease2020 - 10 - 13 發(fā)布2020 - 11 - 13 實(shí)施江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā) 布DB32/T 3863-2020I前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.12009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇徐州甘薯研究中心提出。本標(biāo)準(zhǔn)有江蘇省農(nóng)作物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：江蘇徐州甘薯研究中心。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：孫厚

2、俊、謝逸萍、張成玲、楊冬靜、徐振、趙永強(qiáng)、馬居奎、謝睿寰、唐偉、孫井康。DB32/T 3863-2020 PAGE 4甘薯抗莖線蟲病鑒定技術(shù)規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了甘薯品種（系）對莖線蟲病抗性鑒定的鑒定方法、抗性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和鑒定記載表格。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于甘薯品種（系）對莖線蟲病抗病性的田間自然誘發(fā)鑒定和室內(nèi)接種鑒定。規(guī)范性引用標(biāo)準(zhǔn)下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 4406種薯GB 7413甘薯種苗產(chǎn)地檢疫規(guī)程術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1感病對照品種 susc

3、eptible control variety為檢驗(yàn)試驗(yàn)的可靠性，在品種抗病性鑒定時(shí)附加的已知抗性為感病的品種，本標(biāo)準(zhǔn)中感病對照品種 為栗子香。3.2性。3.3人工接種鑒定 evaluation of artificial inoculation用人工繁殖或收集病原線蟲，按一定量接種，創(chuàng)造發(fā)病條件，根據(jù)莖線蟲病發(fā)病程度確定品種抗病高溫愈合 heat treated to wound healing在甘薯入窖初期，采用人工加溫方法促進(jìn)傷口迅速愈合的一種措施。3.4相對病情指數(shù)將供試品種（系）的病情指數(shù)與高感對照病情指數(shù)進(jìn)行比較，經(jīng)過公式計(jì)算而換算出的病情指數(shù)。3.5體積比人工接種鑒定時(shí)莖線蟲侵染

4、的體積與薯塊體積的比值。鑒定方法自然誘發(fā)鑒定病圃選擇選擇排灌方便，肥力中等，甘薯莖線蟲病發(fā)生較重且均勻的田塊作為鑒定圃。薯苗準(zhǔn)備將符合GB 4406要求的種薯在無病苗床排種育苗，將待鑒定品種薯苗離苗床土層3 cm5 cm剪下， 長度20 cm25 cm。外寄鑒定材料應(yīng)按照GB 7413要求進(jìn)行檢疫。每品種剪取三組薯苗，每組6株8株， 按名單編號分別掛上名稱、編號、試驗(yàn)重復(fù)的牌子，備用。栽種及管理5月上中旬起壟栽種，壟寬75 cm85 cm，每壟劃分成不同的小區(qū)，小區(qū)之間留隔離部分50 cm。采用“Z”字形方式栽種，試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列，每重復(fù)供試品種（系）6株8株，株距23 cm 25

5、 cm，選用栗子香為高感對照品種，每隔10個(gè)鑒定品種（系）栽種栗子香一壟，栽種后正常管理。病情調(diào)查與分級10月中旬進(jìn)行調(diào)查薯塊發(fā)病情況。人工將薯塊刨出，用刀將薯塊橫切兩刀，目測線蟲侵染的面積， 根據(jù)侵染橫截面積進(jìn)行分級，每個(gè)薯塊均需調(diào)查，記載發(fā)病情況。分級標(biāo)準(zhǔn)如下：0 級：無??；1 級：0%為害面積占薯塊橫切面積比率25%；3 級：25%為害面積占薯塊橫切面積比率50%；5 級：50%為害面積占薯塊橫切面積比率75%；7 級：75%為害面積占薯塊橫切面積比率100%。病情指數(shù)及防治效果計(jì)算依據(jù)病情調(diào)查情況，按式（1）計(jì)算病情指數(shù)。式中：DI病情指數(shù)；Ni第 i 病害級別的薯塊數(shù)；i為害級別值；

6、M調(diào)查的總薯塊數(shù)。依據(jù)病情指數(shù)結(jié)果，按式（2）計(jì)算相對病情指數(shù)。相對病情指數(shù)精確至 0.1，對照品種病情指數(shù)為鑒定圃中所有對照的平均病情指數(shù)。鑒定有效性判斷田間鑒定對照品種的平均病情指數(shù)大于 60，鑒定結(jié)果判定有效。室內(nèi)接種鑒定病原線蟲分離及消毒人工采集病薯塊，采用貝曼漏斗法分離線蟲。將分離好的線蟲用 400 目篩網(wǎng)過濾，篩網(wǎng)內(nèi)收集線蟲，用滅菌水沖洗 3 次，放入 0.1%青霉素+0.1%鏈霉素的消毒液中，4 環(huán)境放置 12 h，用 400 目篩網(wǎng)過濾，滅菌水沖洗 3 次，滅菌水配成 200 條/ml 的線蟲懸浮液備用。鑒定材料準(zhǔn)備選用大小300 g400 g薯塊作為鑒定用薯塊，每個(gè)供試品種（

7、系）選3塊，洗凈晾干后編號備用。選用栗子香為高感對照品種。鑒定薯塊隨機(jī)或順序排列在80 cm40 cm的塑料筐內(nèi)，每筐放置對照品種薯塊2個(gè)3個(gè)，每份鑒定材料重復(fù)3次，每重復(fù)2個(gè)薯塊。接種前用75%酒精對薯塊表面進(jìn)行消毒處理。接種材料接種時(shí)需要5 mm螺紋打孔器，12 cm玻璃培養(yǎng)皿若干套，手術(shù)刀、手術(shù)鑷各1把，1 ml移液槍一支及槍頭若干，酒精燈1只，電磁攪拌器1臺。將打孔器、培養(yǎng)皿、燒杯、手術(shù)刀、手術(shù)鑷滅菌后備用。接種方法用打孔器垂直在薯塊中部打孔，深度至薯塊中下部，用移液槍將1 ml配好的線蟲懸浮液加入孔中， 將打出的薯?xiàng)l切除下方1.5 cm，再用剩余薯?xiàng)l封住孔口，用融化的石蠟密封孔口縫隙

8、，放入用75%酒精消毒過的塑料筐內(nèi)。接種后將筐置于26 28 鑒定室內(nèi)保濕培養(yǎng)。線蟲懸浮液應(yīng)處于攪拌狀態(tài)，且每打孔一個(gè)薯塊后打孔器需用酒精燈消毒。病情調(diào)查接種后45 d調(diào)查薯塊發(fā)病情況。先將薯塊沿打孔部位橫切，分別量取橫切面薯塊直徑和線蟲侵染直徑，再將薯塊沿中心縱切，量取薯塊縱切面的薯塊長度和線蟲侵染長度。發(fā)病體積比計(jì)算依據(jù)病情調(diào)查結(jié)果，按式（3）計(jì)算莖線蟲病發(fā)病體積比：按式（4）計(jì)算相對比：品種（系）體積比精確至 0.1%?？剐栽u價(jià)標(biāo)準(zhǔn)自然誘發(fā)鑒定評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)相對病情指數(shù)評價(jià)甘薯莖線蟲病抗侵入性，將甘薯品種（系）劃分為免疫、高抗、中抗、高感，4個(gè)類型，評定標(biāo)準(zhǔn)如下：免疫：相對病情指數(shù)為 100；高抗：70相對病情指數(shù)100；中抗：30相對病情指數(shù)70；高感：0相對病情指數(shù)30。室內(nèi)接種鑒定評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)品種（系）侵染比評價(jià)甘薯莖線蟲病抗擴(kuò)展性，將甘薯品種（系）劃分為免疫、高抗、中抗、 高感，4個(gè)類型，評定標(biāo)準(zhǔn)如下：免疫：相對體積比 100%高抗：70%相對體積比100%；中抗：30%相對體積比70%；高感：0相對體積比30%。鑒定記載表格甘薯抗莖線蟲病鑒定記載表格見表1和表2。表 1 甘薯抗莖線蟲病鑒定記載表（自然誘發(fā)鑒定）編號品種（系名稱）重復(fù)病 情 級 別病