千斤拔對嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷性收縮作用的研究

1、千斤拔對嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷性收縮作用的研究【摘要】觀察千斤拔大葉水煎液對納絡(luò)酮引起的嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷性收縮的作用，及它對乙酰膽堿引起的正常離體豚鼠回腸平滑肌收縮的影響。方法通過制作豚鼠離體回腸正常組標(biāo)本和培養(yǎng)嗎啡依賴離體回腸組標(biāo)本，觀察千斤拔水煎液對參加納絡(luò)酮Nal1in前后對嗎啡組戒斷性收縮的影響；及千斤拔水煎液對參加Ah1in前后對正常組回腸收縮的影響。結(jié)果大葉千斤拔水煎液對乙酰膽堿引起的正常豚鼠回腸收縮和納絡(luò)酮引起的嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷性收縮均有抑制作用，并且它的作用呈劑量依賴趨勢。結(jié)論大葉千斤拔水煎液可以抑制嗎啡依賴離體回腸平滑肌的戒斷性收縮?！娟P(guān)鍵詞】千斤拔；嗎啡；

2、納絡(luò)酮；乙酰膽堿；豚鼠回腸千斤拔為蝶形花科植物蔓性千斤拔Fleingiaphilipinensis的根，本品性甘、微澀、平，補(bǔ)肝腎，有祛風(fēng)利濕、疏筋活絡(luò)、強(qiáng)筋壯骨、消瘀解毒的成效。本次實(shí)驗(yàn)研究大葉千斤拔水煎液對納絡(luò)酮引起的嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷性收縮及對乙酰膽堿引起豚鼠離體回腸收縮的影響，以期對新的戒毒藥物的挑選和研究討論戒毒的機(jī)理提供線索。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1.2藥品與試劑嗎啡，乙酰膽堿，注射用鹽酸納絡(luò)酮制藥廠：成都諾迪康生物制藥，產(chǎn)品批號：080102，千斤拔煎劑：蝶形花科植物大葉千斤拔Fadrphylla，煎煮前除去雜質(zhì)，然后用清水浸泡半小時(shí)，再煎煮4050in，將藥液水浴70

3、90濃縮至濃度為50g生藥/70l0.714g/l，稀釋得到三種水煎液濃度分別為A3.5710-3、B1.7910-3、8.9510-4g/l為參加浴管后的終濃度?，F(xiàn)配Krebs液，硫酸阿托品注射液制藥廠：無錫市第七制藥，批號：03081713。1.3儀器H-400S恒溫平滑肌水槽和JZ100型張力換能器成都泰盟科技，PLABUE生物醫(yī)學(xué)信號采集處理系統(tǒng)北京威信斯達(dá)科技開展有限責(zé)任公司。1.4方法1.4.1回腸標(biāo)本制備及分組取已禁食12h的豚鼠n=20，擊頭處死，立即剪開腹腔取出回腸，棄去近盲腸部約5，迅速置于盛有Krebs液的培養(yǎng)皿中并洗凈沖去腸腔內(nèi)容物，每只分別剪取4的回腸標(biāo)本。其中10只

4、豚鼠回腸分別剪取6段，隨機(jī)分到以下6組中，觀察藥物對乙酰膽堿2g/L引起的正常組回腸平滑肌收縮的作用：正?；啬c空白對照組、乙酰膽堿2g/L對照組、千斤拔A、B、系列劑量組、阿托品6.2510-5g/l對照組；另10只豚鼠回腸分別剪取5段，隨機(jī)分配到以下5組中，觀察藥物對納絡(luò)酮1l/L引起的嗎啡依賴模型組回腸戒斷性收縮的影響：嗎啡依賴空白對照組、納絡(luò)酮1l/L戒斷組、千斤拔A、B、系列治療組。嗎啡依賴模型制備方法：將回腸懸掛于50l含3l/L嗎啡的Krebs液中，通入穩(wěn)定的空氣，于恒溫平滑肌浴管中在37下孵育4h，每15in更換一次Krebs液，形成嗎啡依賴回腸標(biāo)本。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.1.4

5、.2豚鼠回腸平滑肌張力測定將各段回腸標(biāo)本懸掛于37恒溫平滑肌水槽內(nèi)含20lKrebs液的浴管中，通氣管持續(xù)通入穩(wěn)定的空氣，回腸下端掛于恒溫浴管底部鉤上，上端掛于張力換能器金屬片上，回腸平滑肌的收縮活動(dòng)及張力變化通過張力換能器連接計(jì)算機(jī)并采用PLABUE生物醫(yī)學(xué)信號采集系統(tǒng)記錄回腸張力的變化。用PLAB實(shí)時(shí)記錄回腸平滑肌張力變化，選擇參數(shù)：低通濾波10HZ，50HZ陷波關(guān)閉，時(shí)間常數(shù)直流，輸入范圍50v。實(shí)驗(yàn)中所用的藥物濃度是浴管中的終濃度。實(shí)驗(yàn)前將回腸標(biāo)本在初始靜止張力為2g下平衡15in，待回腸平滑肌活動(dòng)穩(wěn)定后開場記錄曲線。分別記錄用藥前后回腸平滑肌張力的峰值，并比擬。將正常組回腸置于含20

6、lKrebs液的37恒溫浴管中，首先記錄靜止張力下回腸平滑肌收縮曲線，然后記錄參加乙酰膽堿2g/L引起回腸收縮張力變化，并觀察在參加乙酰膽堿2g/L前后1in分別參加各濃度千斤拔A、B、/l水煎液或6.2510-5g/l阿托品對乙酰膽堿收縮的作用。將孵育4h的嗎啡依賴模型組回腸懸掛于含3l/L嗎啡的20lKrebs液的恒溫浴管中，水浴溫度為37，通過張力換能器記錄嗎啡依賴回腸靜止張力下的回腸收縮曲線和參加納絡(luò)酮1l/L后引起的嗎啡依賴模型回腸組戒斷性收縮曲線，觀察參加納絡(luò)酮1l/L前后1in分別參加各濃度千斤拔A、B、g/l水煎液對戒斷性收縮的影響。1.4.3統(tǒng)計(jì)方法以PLAB生物信號采集系統(tǒng)

7、中回腸收縮曲線張力的峰值為觀察指標(biāo)，各組數(shù)據(jù)用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差xs表示，應(yīng)用t檢驗(yàn)。2.1對Ah引起正常豚鼠回腸收縮的影響正常組回腸參加Ah后即引起收縮，回腸平滑肌張力明顯增加圖1；各濃度千斤拔系列劑量組及阿托品可抑制Ah引起的正常組回腸收縮，使回腸收縮張力降低圖2，與僅參加Ah對照組相比擬P0.05，數(shù)據(jù)總結(jié)見表1。表1千斤拔對Ah引起的離體豚鼠回腸收縮的影響略與Ah對照組比擬，*P0.01，*P0.052.2對納絡(luò)酮引起的嗎啡依賴豚鼠回腸戒斷性收縮的影響嗎啡依賴模型組參加納絡(luò)酮后，30s內(nèi)即引起收縮，回腸平滑肌張力明顯增加圖3，而正常組回腸在參加納絡(luò)酮后腸管張力未見明顯增加，說明模型組回腸標(biāo)本制作成功。不同濃度的千斤拔水煎液均能不同程度地降低戒斷性收縮張力圖4，A、B、系列劑量組與僅參加Nal的模型對照組相比擬，P0.05，數(shù)據(jù)上總結(jié)如下表2。表2千斤拔對Nal引起的嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷性收縮的影響略與nal對