大葉蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色譜法測定

1、大葉蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色譜法測定【摘要】目的建立高效液相色譜法測定大葉蛇葡萄中蛇葡萄素含量的方法。方法色譜條件：AngilentT-18柱4.6250，5，流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液1585，V/V，檢測波長為290n。結(jié)果蛇葡萄素的回歸方程為Y=24061X+40.07r=0.9999，n=6，線性范圍為0.1011.101g；平均回收率為99.65%，RSD為1.49%。結(jié)論該方法簡單、結(jié)果可靠，為大葉蛇葡萄藥材的質(zhì)量控制提供了快速準確的測定方法?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜法；大葉蛇葡萄；蛇葡萄素Abstrat：bjetiveTdevelpaethdfrdeterinatinf

2、thententfApelpsininA-pelpsisegalphyllaDielset.GilgbyHPL.ethdsTheseparatinasarriedutnAn-gilentT-18(4.6250,5ithAetnitrile-0.1%phsphriaidslutin(15:85)asbilephase，andthedetetinavelengthas290n.ResultsTheregressinequatinandeffiientasY=24061X+40.07(r=0.9999，n=6)frApelpsin.Thelinearrangeasithintherangef0.10

3、11.101g.Theaveragereveryandpreisin(RSD)fApelpsinere99.65%and1.49%,respetively.nlusinThisethdissiple,aurateandanbeusedfrthequalityntrlfApelpsininApelpsisegal-phyllaDielset.Gilg.Keyrds：HPL;Apelpsisegalphylla;Apelpsin大葉蛇葡萄ApelpsisegalphyllaDielset.Gilg是葡萄科蛇葡萄屬的一種植物，是湖北恩施地區(qū)民間慣用中草藥，其性平，味酸、澀，具有清熱利濕、活血化淤之成

4、效，用于治療痢疾、泄瀉、小便淋痛、頭昏目脹、高血壓等病1?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究說明，大葉蛇葡萄中的主要化學(xué)成分蛇葡萄素具有多種藥理活性，如保肝護肝、抗腫瘤和降壓等24。本實驗室已對大葉蛇葡萄有效部位進展了指紋圖譜研究5。為了更好地控制其質(zhì)量，本文用高效液相色譜HPL法對不同來源的大葉蛇葡萄中的蛇葡萄素進展了含量測定。2方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱：AngilentT-184.6250，5。流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液1585，V/V；流速：1l/i；柱溫：30；檢測波長：290n；進樣量：10l。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2對照品溶液的制備精細稱取枯燥至恒重的蛇葡萄素對照品適量，加甲醇制成每毫升

5、含蛇葡萄素0.101g的溶液，作為對照品溶液。2.3供試品溶液的制備精細稱取樣品過60目篩約0.1g置錐形瓶中，甲醇25l，浸泡30in,超聲提取30in，甲醇定容至30l，搖勻，過濾，精細汲取續(xù)濾液1l于25l量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。2.4系統(tǒng)適用性實驗取對照品溶液、供試品溶液于上述色譜條件下進樣，得HPL圖見圖1。結(jié)果在該色譜條件下，供試品在對照品色譜保存時間相應(yīng)處有相應(yīng)色譜峰，且樣品可得到較好的別離，理論塔板數(shù)按蛇葡萄素峰計算大于3000。2.5線性范圍的考察精細量取對照品溶液1，2，4，6，8，10l于10l量瓶中，加甲醇至刻度，配置成濃度分別為0.0101，0.0

6、202，0.0404，0.0606，0.0808，0.101g/l的對照品溶液，按上述色譜條件依次注入高效液相色譜儀，以峰面積Y為縱坐標，以標準品的濃度X為橫坐標，得蛇葡萄素回歸方程：Y=24061X+40.07r=0.9999，n=6。結(jié)果說明，蛇葡萄素對照品在0.1011.101g范圍呈良好的線性關(guān)系。2.6精細度實驗精細汲取蛇葡萄素對照品溶液10l，連續(xù)進樣6次，測定峰面積值，計算RSD為0.66%。結(jié)果說明，儀器精細度良好。2.7穩(wěn)定性實驗取供試品溶液10l分別于0，2，6，8，12，24h間隔進展測定，測得結(jié)果根本一致，峰面積的RSD為1.20。結(jié)果說明，供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。2

7、.8重復(fù)性實驗取同一批樣品按供試品溶液的制備方法平行制備6份，按上述色譜條件進展測定，測定各自含量，其RSD為1.50%。結(jié)果說明，該方法重復(fù)性良好。2.9加樣回收實驗精細稱取含量的6份樣品各50g，分別精細參加蛇葡萄素對照品適量，按供試品制備和含量測定項下方法操作，結(jié)果平均回收率為99.65%，RSD為1.49%。2.10樣品含量測定精細稱取各樣品0.1g，按“23項下方法操作，按上述色譜條件進樣10l測定蛇葡萄素峰面積，以外標兩點法計算含量。結(jié)果見表1。表1不同來源大葉蛇葡萄中蛇葡萄素含量測定結(jié)果略3討論本文在樣品制備方面比擬了回流提取法、索氏提取法和超聲提取法，發(fā)現(xiàn)超聲提取法提取完全、操作簡便，同時比擬了浸泡時間和超聲提取時間發(fā)現(xiàn)皆以30in為宜。現(xiàn)代研究說明蛇葡萄素有很多種藥理活性2，本次的測定結(jié)果說明，其在大葉蛇葡萄中的含量為30%左右，因此，該藥物具有廣闊的開發(fā)利用前景?！緟⒖嘉墨I】1湖北省衛(wèi)生局.湖北中草藥志(第2冊).武漢:湖北人民出版社，1982:1078.2董倩倩，陳立峰.二氫楊梅素藥理研究進展J.中南藥學(xué)，2022，35：295.3孫曉杰，沈偉，張秀橋，等.大葉蛇葡萄抗高血壓有效部位挑選實驗研究J.齊魯藥事，2022，2712：74