當(dāng)歸補(bǔ)血湯有效部位指紋圖譜歸屬分析

1、當(dāng)歸補(bǔ)血湯有用部位指紋圖譜歸屬闡發(fā)王慶敏李曉寧王兵梁逸曾黃曄【關(guān)鍵詞】當(dāng)歸補(bǔ)血湯單味藥有用部位指紋圖譜高效液相色譜中藥有用部位可以在保存原方治療長(zhǎng)處的底子上進(jìn)步中藥的作用強(qiáng)度、臨床藥效以及質(zhì)量操縱程度，改變傳統(tǒng)中藥大、黑、粗外不雅形象，是中藥研究的又一新的生長(zhǎng)點(diǎn)1，是研發(fā)中藥二類新藥根據(jù)2，3，也是從中藥開拓新藥的第3條途徑4。王明軍等5表達(dá)了中藥有用部位研究的近況、要領(lǐng)和本領(lǐng)，并闡發(fā)用中藥指紋圖譜對(duì)中藥提取物舉行質(zhì)量操縱。1儀器與試藥Agilent1100系列高效液相色譜儀美國(guó)Agilent公司；G1315A型二極管陣列檢測(cè)器。當(dāng)歸購(gòu)自甘肅岷縣，黃芪購(gòu)自長(zhǎng)沙九之堂藥店，經(jīng)湖南省中醫(yī)藥研究院中

2、藥研究所斷定。阿魏酸與芒柄花素比較品中國(guó)藥品生物成品檢定所提供，甲醇為色譜純,水為二次去離子水，別的試劑為闡發(fā)純。2要領(lǐng)與效果2.2供試品溶液的制備復(fù)方有用部位的提取：別離稱取黃芪和當(dāng)歸粉末過40目篩各20，4g，加8倍量和6倍量70%的乙醇，別離回流提取2h和1h，將所得醇提物蒸干，殘?jiān)鼊蚍Q疏散于48l水中，使其含量為0.5g藥材/l，水溶液依次用同體積石油醚、氯仿、醋酸乙酯，正丁醇各萃取3次，各部位提取液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙舛ㄈ莸?0l，即為復(fù)方的石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇部位。單味藥的有用部位的提?。簞e離稱取黃芪、當(dāng)歸粉末過40目篩各20，4g，同法操縱，制備單味藥黃芪，當(dāng)歸的相應(yīng)部

3、位。2.5不變性實(shí)行取同一復(fù)方供試液20l別離在0，6，12，24，48h進(jìn)樣5次的，用“中藥指紋圖譜相似度盤算軟件盤算，所得相似度為0.9820，0.9929，0.9838，0.9967，0.9942，相似度極高，說明48h內(nèi)供試品溶液不變性較好。效果表白樣品指紋圖譜各色譜峰相對(duì)遷徙時(shí)間和峰面積根本同等，相似度較高，切合指紋圖譜研究的技能要求。2.6供試品溶液的檢測(cè)取上述樣品各20l，別離進(jìn)樣，阿魏酸、芒柄花素、復(fù)方全方及復(fù)方單味藥各部位的HPL指紋圖譜見圖16。重要特性峰峰面積百分含量見表1。表1樣品重要特性峰峰面積相對(duì)百分含量3討論從圖2可以看出復(fù)方身分龐大，對(duì)相應(yīng)值較大的21個(gè)峰編號(hào)闡

4、發(fā)，經(jīng)阿魏酸與芒柄花素尺度品濃度均為500g/l比較，確認(rèn)峰7為當(dāng)歸中阿魏酸，峰18為黃芪中芒柄花素。別的，通過剖析得到的光譜與文獻(xiàn)13，14比較王平?黃芪當(dāng)歸復(fù)方的指紋圖譜及對(duì)兔肝纖維化的藥理藥效研究?中南大學(xué)中藥當(dāng)代化研究中央，對(duì)別的5個(gè)峰開端定性為：峰9：毛蕊異黃酮苷；峰14：毛蕊異黃酮；峰16：3R)-7,2-Dihydrxy-3,4-diethxyisflavan;峰19：Z-藁苯內(nèi)酯；峰20：E-藁苯內(nèi)酯。3.1對(duì)復(fù)方及單味藥的石油醚部位的譜圖闡發(fā)從圖3中可以看出復(fù)方的石油醚部位的9個(gè)特性峰，4個(gè)來自黃芪，5個(gè)來自當(dāng)歸，即峰14，15，16，18來自黃芪，峰22，17，19，20，

5、21來自當(dāng)歸，以20號(hào)峰當(dāng)歸中E-藁苯內(nèi)酯峰值最大為重要特性，從表1看出其峰面積百分含量為54.61%，表白該部位提取出的是極性很小的脂溶性物質(zhì)。該部位中峰22在復(fù)方全方中沒尋到，大概是由于濃度緣故原由：提取復(fù)方全方時(shí)，取9.6g藥材提取液蒸干后，為包管殘?jiān)耐耆芙?，用甲醇溶解定容?5l；而在提取有用部位時(shí)，取24克藥材提取蒸干，石油醚萃取殘?jiān)芤汉?，石油醚液蒸干，殘?jiān)眉状既芙舛ㄈ莸?0l，依此盤算石油醚部位濃度是全方的6.25倍，濃度的增大使復(fù)方全方中沒檢測(cè)到的峰22在石油醚部位中出現(xiàn)。3.2對(duì)復(fù)方及單味藥的氯仿部位的譜圖闡發(fā)從圖4可以看出，復(fù)方氯仿部位的9個(gè)特性峰，6個(gè)來自黃芪，3

6、個(gè)來自當(dāng)歸，即峰3，9，14，15，16，18來自黃芪，峰7，11，12來自當(dāng)歸。從表1中看出該部位是14號(hào)峰黃芪中毛蕊異黃酮和18號(hào)峰黃芪中芒柄花素峰值最大的部位，峰面積百分含量別離為41.19%和14.58%，表白該部位提取出的重要是黃芪中的黃酮類，異黃酮類物質(zhì)，以黃芪中毛蕊異黃酮和芒柄花素峰值較高為重要特性。3.3復(fù)方及單味藥中醋酸乙酯部位的譜圖闡發(fā)從圖5可以看出，復(fù)方該部位的11個(gè)峰，7個(gè)同時(shí)來自當(dāng)歸和黃芪，1個(gè)來自當(dāng)歸，3個(gè)來自黃芪，即峰2,3,5,11,12,13,21同時(shí)來自當(dāng)歸和黃芪，峰7來自當(dāng)歸，峰9,14,18來自黃芪，以7號(hào)峰當(dāng)歸中阿魏酸峰值最大為重要特性，其峰面積百分含

7、量為30.3%。復(fù)方醋酸乙酯部位中峰18芒柄花素在黃芪中的該部位中沒有尋到，大概是黃芪中的身分比復(fù)方少許多，單味藥黃芪中芒柄花素在用氯仿提取時(shí)已完全提取出，而復(fù)方中身分較多，大概復(fù)方中其他組分的影響倒霉于芒柄花素的提取，用氯仿沒有完全提取出，因此在復(fù)方醋酸乙酯部位中另有少量。同時(shí)當(dāng)歸中峰20即E-藁苯內(nèi)酯在復(fù)方醋酸乙酯部位中沒有，卻有少量在當(dāng)歸此部位，大概是黃芪中的某組分能促進(jìn)E-藁苯內(nèi)酯的提取，使其在復(fù)方的氯仿部位中已完全提取出，因此在復(fù)方醋酸乙酯部位中沒有出現(xiàn)。3.4復(fù)方及單味藥中正丁醇部位的譜圖闡發(fā)為了明晰地表現(xiàn)該部位的峰，取色譜峰流出的時(shí)間段，如圖5所示，該部位提取的物質(zhì)除峰9，14外

8、，別的物質(zhì)會(huì)合在保存時(shí)間段015in流出,表白該部位提取的重要是極性較強(qiáng)的物質(zhì)，以2號(hào)峰峰值最大為重要特性，其峰面積百分含量為31.38%。該部位重要有7個(gè)峰，6個(gè)同時(shí)來自當(dāng)歸和黃芪，1個(gè)峰來自黃芪，即峰1,2,3,4,5,6同時(shí)來自于當(dāng)歸和黃芪,峰9來自黃芪，在黃芪的正丁醇部位峰14即毛蕊異黃酮,在復(fù)方中該部位中沒有，緣故原由大概雷同于“3.3中E-藁苯內(nèi)酯的溶出環(huán)境。從表1可以看出，當(dāng)歸中阿魏酸在復(fù)方全方，復(fù)方氯仿，復(fù)方醋酸乙酯部位中均存在，其含量別離為7.76%,16.96%,30.3%，石油醚及正丁醇部位中卻沒有，斷定阿魏酸必定不溶于石油醚，用氯仿萃取時(shí)，大概由于阿魏酸在氯仿中的溶解度

9、較小，大概復(fù)方其他物質(zhì)的影響，倒霉于阿魏酸的完全溶出，縱然用同體積的氯仿萃取了3次照舊沒能把它完全提取出，醋酸乙酯萃取時(shí)，該物質(zhì)完全萃取出了。表白阿魏酸重要會(huì)合在醋酸乙酯部位，該部位那么是與阿魏酸藥效最相干的部位。除了阿魏酸另有其他物質(zhì)出如今差異的有用部位，其含量卻有較大差異，這種征象大概是由于用有機(jī)試劑萃取全方時(shí)難以完全把該物質(zhì)萃取出，大概有機(jī)試劑之間有影響，同一物質(zhì)能溶于所選的差異試劑，但溶解環(huán)境有較大差異，差異部位提取出的重要物質(zhì)差異，將有差異的臨床療效?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1吳文博，魏晨玲，齊俊英.對(duì)中藥復(fù)方差異提取部位的相干研究之思索J.醫(yī)學(xué)與哲學(xué)(人文社會(huì)醫(yī)學(xué)版)，2022,28(3)：7

10、6.2劉璐.中藥二類新藥有用部位及有用部位群開拓明狀及思索J.中藥新藥與臨床藥理，2000，11(6)：323.3呂圭源，陳素紅.關(guān)于中藥有用部位新藥研究的幾點(diǎn)思索J.天下科學(xué)技能-中醫(yī)藥當(dāng)代化，2022,65：17.4吳文博，董占軍，齊俊英.論從中藥中開拓新藥的第三條途徑J.醫(yī)學(xué)與哲學(xué)，2022，26(11)：66.5王明軍，高莉莉.中藥及其方劑有用部位研究之新思索J.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2022，13(12)：5.6LingYi，Lian-enQi，PingLi,etal.SiultaneusdeterinatinfbiativenstituentsinDangguiBuxueTangfr

11、qualityntrlbyHPLupledithadidearraydetetr,anevaprativelightsatteringdetetrandassspetretryJ.AnalBianalhe2022，389：571.7黃月純，黃水清，劉東輝，等.當(dāng)歸補(bǔ)血湯湯劑中揮發(fā)油身分的G-S闡發(fā)J.中成藥，2022，278：892.8危建安，黃兆勝，吳利.當(dāng)歸補(bǔ)血湯補(bǔ)血成果及其物質(zhì)底子研究一J.中藥藥理與臨床，2022，192：8.9黃兆勝，危建安，吳利.當(dāng)歸補(bǔ)血湯補(bǔ)血成果及其物質(zhì)底子研究二J.中藥藥理與臨床，2022，19(5：10.10黃月純，黃水清，劉東輝，等.當(dāng)歸補(bǔ)血湯煎劑中醋酸乙酯

12、部位的重要化學(xué)身分闡發(fā)J.中國(guó)藥房，2022,16(26)：1275.11黃月純，魏剛，黃水清，等.當(dāng)歸補(bǔ)血湯湯劑正丁醇部位中黃芪的HPL指紋開端闡發(fā)J.中成藥，2022,28(2)：165.12劉東輝，黃水清，黃月純，等.當(dāng)歸補(bǔ)血湯皂苷類身分HPL指紋圖譜研究J.中藥材,2022，29(8)：844.13YA-LIANG.YIZENGLIANGandBEN-EiHEN.High-perfraneLiquidhratgraphyithAtspheriPressureheialInizatinandEletrsprayInizatinassSpetretryfrAnalysisfAngeliasinensisJ.PhytheialAnalys