醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論

1、醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測廣西區(qū)疾病預防控制中心 消毒與媒介防制科聯(lián)系電話 第一頁，共三十七頁。醫(yī)院消毒效果監(jiān)測的意義 醫(yī)院消毒滅菌是預防醫(yī)院內(nèi)感染的重要措施之一，消毒效果的監(jiān)測是評價其消毒設(shè)備運轉(zhuǎn)是否正常、消毒藥劑是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否達標的唯一手段，因而在醫(yī)院消毒、滅菌工作中必不可少。 第二頁，共三十七頁。 一、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測的原那么 監(jiān)測人員需經(jīng)過專業(yè)培訓，掌握一定的消毒知識，熟悉消毒設(shè)備和藥劑性能，具備熟練的檢驗技能； 選擇合理的采樣時間和順序 遵循嚴格的無菌操作第三頁，共三十七頁。 二、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測范圍 日常監(jiān)測重點科室手術(shù)室、層流潔凈病

2、房、ICU、產(chǎn)房、新生兒科、母嬰同室病房、透析室、血液病房、燒傷病房、供給室、內(nèi)鏡室、治療室、換藥室 發(fā)生醫(yī)院內(nèi)感染時應(yīng)在發(fā)生感染的科室及相關(guān)科室采樣監(jiān)測 第四頁，共三十七頁。三、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測分類 消毒滅菌效果監(jiān)測： 使用中消毒液或無菌器械保存液 滅菌設(shè)備壓力蒸汽滅菌器、環(huán)氧乙烷滅菌器 紫外線燈 滅菌物品 環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測： 空氣 物表 醫(yī)務(wù)人員手 第五頁，共三十七頁。四、空氣消毒效果監(jiān)測 1、采樣時間：消毒處理后、操作前進行采樣。 2、布點及采樣方法： 1類環(huán)境布點、采樣方法：依據(jù)?醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)標準?(GB50333-2002)10.3.13、 手術(shù)區(qū)：需要特別保護的手術(shù)臺及其周

3、圍區(qū)域。 級手術(shù)室的手術(shù)區(qū)是指手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.9m、兩端至少各外推0.4m后包括手術(shù)臺的區(qū)域； 級手術(shù)室的手術(shù)區(qū)是指手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.6m、兩端至少各外推0.4m后(包括手術(shù)臺)的區(qū)域； 級手術(shù)室的手術(shù)區(qū)是指手術(shù)臺四邊至少各外推0.4m后包括手術(shù)臺的區(qū)域。 級手術(shù)室不分手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)。 周邊區(qū)：潔凈手術(shù)室內(nèi)除去手術(shù)區(qū)以外的其他區(qū)域。 第六頁，共三十七頁。1類環(huán)境級手術(shù)室布點方法 級手術(shù)室布點方法：13個點。其中：手術(shù)區(qū)5個點雙對角線布點，周邊區(qū)8個點每邊內(nèi)2點。 + + + + + + + + + + + +第七頁，共三十七頁。1類環(huán)境級手術(shù)室布點方法 級手術(shù)室布點方法： 9

4、個點。其中：手術(shù)區(qū)3個點單對角線布點，周邊區(qū)6個點長邊內(nèi)2點，短邊內(nèi)1點。 + + + + + + + + +第八頁，共三十七頁。1類環(huán)境級手術(shù)室布點方法 類環(huán)境級手術(shù)室共布7個點。 其中：手術(shù)區(qū)3個點單對角線布點，周邊區(qū)4個點每邊內(nèi)1點。 + + + + + + +第九頁，共三十七頁。 類環(huán)境采樣方法 將普通營養(yǎng)瓊脂平皿直徑為9cm放在室內(nèi)手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)各采樣點處，采樣高度離地面0.8米，采樣時將平皿蓋翻開，扣放于平皿旁，暴露30 分鐘，蓋好，于37培養(yǎng)24小時，分別計數(shù)手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)的平均菌落數(shù)。第十頁，共三十七頁。2、類環(huán)境布點、采樣方法 依據(jù)?消毒技術(shù)標準?(衛(wèi)生部2002年版) 3.

5、17.8。室內(nèi)面積30M2，設(shè)內(nèi)、中、外對角線3點，內(nèi)、外點布點部位距墻壁1M處；室內(nèi)面積30 M2，設(shè)4角及中央5點雙對角線，4角的布點部位距墻壁1M處。 將普通營養(yǎng)瓊脂平皿(直徑為9cm)放在室內(nèi)各采樣點處，采樣高度距地面1.5米GB15982-1995：0.81.5米，采樣時將平皿蓋翻開，扣放于平皿旁，暴露5分鐘，蓋好立即送檢，于37培養(yǎng)48小時，計數(shù)平板菌落數(shù)，并計算出空氣細菌菌落總數(shù)。 第十一頁，共三十七頁。3、空氣樣品檢測方法 依據(jù)?消毒技術(shù)標準?2.1.3要求進行。 平板暴露法結(jié)果計算公式： 細菌總數(shù)(cfu/m3)=50000N / (AT) 式中A為平板面積cm2；T 為平板

6、暴露時間min；N 為平均菌落數(shù)cfu； 第十二頁，共三十七頁。4、結(jié)果判定 類區(qū)域結(jié)果判定： 等級 手術(shù)室名稱 空氣潔凈度級別 細菌最大平均濃度(個30min) 手術(shù)區(qū)周邊區(qū)手術(shù)區(qū)周邊區(qū)特別潔凈手術(shù)室100級1000級0.20.4標準潔凈手術(shù)室1000級10000級0.751.5一般潔凈手術(shù)室10000級100000級24準潔凈手術(shù)室 300000級 5 第十三頁，共三十七頁。4、結(jié)果判定 類區(qū)域結(jié)果判定：細菌總數(shù)200 cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。 類區(qū)域結(jié)果判定：細菌總數(shù)500 cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。 第十四頁，共三十

7、七頁?？諝獠蓸訒r的本卷須知 1、消毒前前提將放置平皿的采樣臺準備好。 2、開門方式：自動門,推拉式彈簧門,有把手的門。 3、行走路線盡可能少 在室內(nèi)走動 動作要 輕。先布皿 后開蓋。 4、動態(tài)環(huán)境 5、同一房間空氣、物表 采樣，先采空氣，后 采物表；最好由同一 人操作 。 5 4 3 2 1第十五頁，共三十七頁。五、物體外表消毒效果監(jiān)測 1、采樣時間：消毒處理后進行采樣。 2、采樣方法： 用5cm5cm的標準滅菌規(guī)格板，放在被檢物體外表，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)棉拭子，連續(xù)采樣4個，剪去手接觸部位后，投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗

8、脫液試管內(nèi)，進行細菌菌落總數(shù)和致病菌檢測。 門把手等不規(guī)那么物體外表用棉拭子直接涂擦采樣 第十六頁，共三十七頁。五、物體外表消毒效果監(jiān)測 3、檢測方法： 1細菌總數(shù)檢測：檢測方法按?消毒技術(shù)標準?3.17.6. 31執(zhí)行。小型物體外表的結(jié)果計算，用cfu/件。 2致病菌檢測：檢測方法按?消毒技術(shù)標準?3.17.15原那么執(zhí)行。 4、結(jié)果判定 、類區(qū)域：細菌總數(shù)5cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。 類區(qū)域：細菌總數(shù)10cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。 類區(qū)域：細菌總數(shù)15cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。第十七頁，共三十七頁。采樣本卷須知 1、空氣、物表采樣由同一人操作

9、。 2、物表采樣應(yīng)由近及遠，兼顧上下中左右 3、母嬰同室、血透室屬類環(huán)境 4、樣品標識一定要清楚，能朔源、追蹤，以便整 改。 5、致病菌包括金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、 溶血性鏈球菌產(chǎn)房、新生兒科、母嬰同室加 測沙門氏菌 6、采樣棉簽在現(xiàn)場要做空白對照。 第十八頁，共三十七頁。六、手消毒效果監(jiān)測 1、采樣時間：消毒后立即采樣。 2、采樣方法：被檢人五指并攏，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面積約30cm2)，并隨之轉(zhuǎn)動采樣的棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，進行細菌菌落總數(shù)和致病菌檢測。 第

10、十九頁，共三十七頁。3、手消毒效果監(jiān)測檢測方法 1細菌總數(shù)檢測：將采樣管在混勻器上振蕩20秒或用力振打80次，用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個平皿，內(nèi)參加已溶化的4548的營養(yǎng)瓊脂15ml18 ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置361溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)。 采樣結(jié)果計算方法： 細菌總數(shù)cfu/cm2= 2致病菌檢測：按?消毒技術(shù)標準?3.17.15原那么執(zhí)行。 平板上菌落數(shù)稀釋倍數(shù) 采樣面積（cm2）第二十頁，共三十七頁。4、結(jié)果判定 、類區(qū)域工作人員：細菌總數(shù)5cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌為消毒合格。 類區(qū)域：細菌總數(shù)1

11、0cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。 類區(qū)域：細菌總數(shù)15cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。 母嬰同室、嬰兒室、新生兒科及兒科病房的工作人員手上，不得檢出沙門氏菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌、黃色葡萄球菌。第二十一頁，共三十七頁。 本卷須知 1、分清普通衛(wèi)生洗手和外科洗手衛(wèi)生手消毒。 外科洗手標準值 ? 類環(huán)境：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌(產(chǎn)房、母嬰同室、新生兒科加測沙門氏菌、溶血性鏈球菌) 類環(huán)境：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌 第二十二頁，共三十七頁。七、使用中消毒液或無菌器械保存液監(jiān)測 1、使用中消毒液有效成分的測定 2、使用中消毒液

12、或無菌器械保存液染菌量的測定 1涂抹法： 2傾注法：用無菌吸管吸取消毒液1.0 ml，參加到9ml含相應(yīng)中和劑的無菌生理鹽水采樣管中混勻，分別取0.5ml放入2只滅菌平皿內(nèi)，參加已溶化的4548的營養(yǎng)瓊脂15ml18 ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，一平板置20培養(yǎng)7天，觀察霉菌生長情況；另一個平板置361溫箱培養(yǎng)72h，計數(shù)菌落數(shù)。同時按3.17.15檢測致病菌。 使用中消毒液或無菌器械保存液染菌量cfu/ml=每個平板上的菌落數(shù)20 結(jié)果判定：消毒液染菌量100cfu/ml，并未檢出致病菌為合格。 第二十三頁，共三十七頁。本卷須知： 1、必須是使用中消毒液或無菌器械保存液。 2、要求采樣后

13、1h內(nèi)檢測，實際工作中由于各種原因做不到，采5ml樣品放在滅菌試管中試管中不放中和劑帶回實驗室。 3、樣品名稱一定要標識清楚，不僅要注明采樣地點，而且要注明消毒液的名稱、有效濃度等，例：勁康消毒劑、0.1%健之素消毒液、80%漂白粉溶液、 0.5%洗必泰等標識都是不正確的。 4、消毒液細菌菌落總數(shù)標準值100cfu/ml，無菌器械保存液細菌菌落總數(shù)標準值是不得檢出。 5、致病菌檢測包括金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、沙門氏菌、溶血性鏈球菌。 第二十四頁，共三十七頁。八、滅菌物品消毒效果監(jiān)測 1、采樣時間：在滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。 2、采樣方法：按?消毒技術(shù)標準?3.17.5.2原那么執(zhí)行

14、 3、結(jié)果判定：陽性對照在24小時內(nèi)應(yīng)有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應(yīng)無菌生長,如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖顯渾濁但經(jīng)證明并非有菌生長，判為滅菌合格；如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中任何1管顯渾濁并證實有菌生長，應(yīng)重新取樣，分別同法復試2次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否那么判為滅菌不合格。 第二十五頁，共三十七頁。4、滅菌物品消毒效果監(jiān)測本卷須知 1、無菌檢驗應(yīng)在潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行，最好把滅菌包帶回在百級實驗室翻開。應(yīng)嚴格遵守無菌操作，防止微生物污染。 2、應(yīng)采有效期內(nèi)的樣品高壓滅菌：一般是兩周；還氧乙烷：兩年第二十六頁，共三十七頁。九、滅菌器滅菌效果監(jiān)測1、監(jiān)

15、測方法： 工藝監(jiān)測 化學監(jiān)測化學指示卡、指示膠帶 生物監(jiān)測2、常用滅菌器種類 壓力蒸汽滅菌器 環(huán)氧乙烷滅菌器 3、生物指示物 嗜熱脂肪桿菌芽胞ATCC7953,壓力蒸汽滅菌器 枯草桿菌黑色變種芽胞ATCC9372環(huán)氧乙烷滅菌器第二十七頁，共三十七頁。4、壓力蒸汽滅菌器滅菌效果監(jiān)測檢測方法 生物指示菌片布放方法?消毒技術(shù)標準? 1將兩個嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標準試驗包中心部位。 2下排氣壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個標準試驗包 預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個標準試驗包 手提壓力蒸汽滅菌器：通用貯物盒代替標準試驗包，貯物盒內(nèi)盛滿中

16、試管，指示菌片放于中心部位的兩支滅菌試管內(nèi)，貯物盒放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。 第二十八頁，共三十七頁。4、生物指示菌片布點方法 生物指示菌片布放方法?現(xiàn)代醫(yī)院消毒? 1將兩個嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標準試驗包中心部位。 20.5 M3以上的大滅菌柜在上層和中層中央部位，下層前、中、后等五個部位各放一個試驗包。 小型滅菌柜兩層在上層中央部位和下層前、后等三個部位各放一個試驗包； 小型滅菌柜三層在上、中、下層中央各放一個試驗包 手提式或臺式滅菌器在下層底部放一個試驗包。第二十九頁，共三十七頁。 經(jīng)一個滅菌周期后，在無菌的條件下取出標準試驗包或貯物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫

17、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)培養(yǎng)7天自含式生物指示物按說明書執(zhí)行，觀察培養(yǎng)基顏色變化。檢驗時設(shè)陰性對照和陽性對照。 結(jié)果判定：每個指示菌片接種的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色，判定為滅菌合格；指示菌片之一接種的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基都由紫色變?yōu)辄S色時，那么滅菌過程不合格。 第三十頁，共三十七頁。環(huán)氧乙烷滅菌器滅菌效果監(jiān)測 枯草桿菌黑色變種芽胞ATCC9372菌片事先放入一次性注射器中每個注射器中放1個菌片，然后封裝在一剝離式包裝袋內(nèi)。菌片在滅菌器內(nèi)布放的數(shù)量應(yīng)足夠多，應(yīng)放在那些在性能鑒定時發(fā)現(xiàn)是最難滅菌的部位，并均勻分布于整個滅菌物品中。 上、中、下層對角線前、中、后各布放一個菌片，

18、排氣口上方放置一個菌片，共放置10個菌片。第三十一頁，共三十七頁。本卷須知1、滅菌器：要注明滅菌器型號、產(chǎn)地等 2、在進行環(huán)氧乙烷滅菌器滅菌效果監(jiān)測時，滅菌 器一定要滿載。3、出現(xiàn)陽性結(jié)果要進行工藝監(jiān)測，分析原因4、監(jiān)測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認可，并在有效期內(nèi) 使用。第三十二頁，共三十七頁。十、紫外線消毒效果監(jiān)測 紫外線燈管輻照度值的測定，一般采用紫外線輻照計測定法。開啟紫外線燈5分鐘后，將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計探頭置于被檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處，待儀表穩(wěn)定后，所示數(shù)據(jù)即為該紫外線燈的輻照度值。 結(jié)果判定：普通30W直管型紫外線燈，新燈輻照強度90 W/cm2為合格；使用中紫外線燈輻照強度70 W/cm2為合格；30W高強度紫外線燈輻照強度180 W/cm2為合格； 第三十三頁，共三十七頁。 本卷須知： 1、紫外線輻照計必須在計量部門檢定的有效期內(nèi)使用，如有校正系數(shù)，測定值應(yīng)用校正系數(shù)修正。 2、監(jiān)測人員做好自我防護，以免被紫外線灼傷。第三十四頁，共三十七頁。醫(yī)院消毒效果監(jiān)測現(xiàn)場采樣物品清單1、原始記錄表含紫外燈監(jiān)測記錄2、白大褂、帽子、口罩、鞋套3、廣口瓶、75%酒精手消毒液4、記號筆5、定時鐘6、試管架7、酒精燈、無水酒精、打火機8、輻照計、防護服、防護眼睛9、污物缸10、橡皮筋第三十五頁，共三十七頁。醫(yī)院消毒效果監(jiān)測現(xiàn)場采樣物品清單需提前滅菌的物品 11