食品檢驗(yàn)工培訓(xùn)蛋白質(zhì)PPT

1、關(guān)于食品檢驗(yàn)工培訓(xùn)蛋白質(zhì)第一張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)和氨基酸的測(cè)定第二張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1 概述2 凱氏定氮法3 蛋白質(zhì)的快速測(cè)定法4 氨基酸總量的測(cè)定5 氨基酸的分離與測(cè)定主 要 內(nèi) 容第三張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1 概述（1）蛋白質(zhì)的生理功用及在食品中的作用（2）食品中的蛋白質(zhì)含量（3）蛋白質(zhì)系數(shù)（4）蛋白質(zhì)水解（5）蛋白質(zhì)測(cè)定方法第四張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是構(gòu)成生物體細(xì)胞組織的重要成分，是生物體發(fā)育及修補(bǔ)組織的原料，一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質(zhì)。 人體的酸堿平衡、水平

2、衡的維持； 遺傳信息的傳遞； 物質(zhì)的代謝及運(yùn)轉(zhuǎn)都與蛋白質(zhì)有關(guān)。 人及動(dòng)物只能從食品得到蛋白質(zhì)及其分解產(chǎn)物，來(lái)構(gòu)成自身的蛋白質(zhì)，是人體重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 食品的重要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)。（1）蛋白質(zhì)的生理功用及在食品中的作用第五張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2) 食品中的蛋白質(zhì)含量 在各種不同的食品中蛋白質(zhì)的含量各不相同，一般說(shuō)來(lái)動(dòng)物性食品的蛋白質(zhì)含量高于植物性食品，例如牛肉中蛋白質(zhì)含量為20.0%左右，豬肉中為9.5%，兔肉為21%，雞肉為20%，牛乳為3.5%黃魚為17.0%，帶魚為18.0%，大豆為40%，稻米 為8.5%，面粉為9.9%，菠菜為2.4%，黃瓜為1.0%，桃為0.8%，柑橘為

3、0.9%，蘋果為0.4%和油菜為1.5%左右。 測(cè)定食品中蛋白質(zhì)的含量，對(duì)于評(píng)價(jià)食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、合理開發(fā)利用食品資源、提高產(chǎn)品質(zhì)量、優(yōu)化食品配方、指導(dǎo)經(jīng)濟(jì)核算及生產(chǎn)過(guò)程控制均具有極重要的意義。第六張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（3）蛋白質(zhì)系數(shù) 蛋白質(zhì)是復(fù)雜的含氮有機(jī)化合物，分子量很大，大部分高達(dá)數(shù)萬(wàn)數(shù)百萬(wàn)，分子的長(zhǎng)軸則長(zhǎng)數(shù)nm100nm,它們由20種氨基酸通過(guò)酰胺鍵以一定的方式結(jié)合起來(lái)，并具有一定的空間結(jié)構(gòu)，所含的主要化學(xué)元素為C、H、O、N,在某些蛋白質(zhì)中還含有微量的P、Cu、Fe、I等元素，但含氮?jiǎng)t是蛋白質(zhì)區(qū)別其他有機(jī)化合物的主要標(biāo)志。第七張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年

4、6月 不同的蛋白質(zhì)其氨基酸構(gòu)成比例及方式不同，故各種不同的蛋白質(zhì)其含氮量也不同，一般蛋白質(zhì)含氮量為16%，即一 份氮素相當(dāng)于6.25份蛋白質(zhì)，此數(shù)值（6.25）稱為蛋白質(zhì)系數(shù)。 不同種類食品的蛋白質(zhì)系數(shù)有所不同，如玉米，蕎麥，青豆，雞蛋等為6.25，花生為5.46，大米為5.95，大豆及其制品為5.71，小麥粉為5.70，牛乳及其制品為6.38。 第八張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（4）蛋白質(zhì)水解 在構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸中，亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸等8種氨基酸在人體內(nèi)不能合成，必須依靠食品提供，故被稱為必需氨基酸，他們對(duì)人體有極其重要的生理作

5、用。 蛋白質(zhì)胨肽氨基酸第九張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（5）蛋白質(zhì)測(cè)定方法 測(cè)定蛋白質(zhì)的方法可分為兩大類： 一類是利用蛋白質(zhì)的共性，即含氮量 、肽鍵和折射率測(cè)定蛋白質(zhì)含量 ； 另一類是利用蛋白質(zhì)中特定氨基酸殘基、酸性和堿性基團(tuán)以及芳香基團(tuán)等測(cè)定蛋白質(zhì)含量。 第十張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 蛋白質(zhì)的測(cè)定，目前多采用將蛋白質(zhì)消化，測(cè)定其含氮量，再換算為蛋白質(zhì)含量的凱氏定氮法。不同食品的蛋白質(zhì)系數(shù)有所不同。 凱氏定氮法是測(cè)定總有機(jī)氮量較為準(zhǔn)確、操作較為簡(jiǎn)單的方法之一，可用于所有動(dòng)、植物食品的分析及各種加工食品的分析，可同時(shí)測(cè)定多個(gè)樣品，故國(guó)內(nèi)外應(yīng)用較為普遍，是個(gè)經(jīng)典分析

6、方法，至今仍 被作為標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法。2 凱氏定氮法第十一張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 凱氏定氮法：常量法、微量法及經(jīng)改進(jìn)后的改良凱氏定氮法。 微量凱氏定氮法樣品質(zhì)量及試劑用量較少，且有一套微量凱氏定氮器。 目前通用以硫酸銅作催化劑的常量、半微量、微量凱氏定氮法。 在凱氏法改良中主要的問題是，氮化合物中氮的完全氨化問題及縮短時(shí)間、簡(jiǎn)化操作的問題，即分解試樣所用的催化劑。 常量改良凱氏定氮法在催化劑中增加了二氧化鈦。第十二張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(1) 原理 樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，其中碳和氫被氧化為二氧化碳和水逸出，而樣品中的有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為氨與

7、硫酸結(jié)合成硫酸銨。然后加堿蒸餾，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸或硫酸溶液滴定。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量可計(jì)算出蛋白質(zhì)的含量。2.1 常量凱氏定氮法第十三張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 樣品消化2NH2(CH)2COOH 13H2SO4 (NH4)2SO4 6CO2 12SO2 16H2O 濃硫酸具有脫水性，有機(jī)物脫水后被炭化為碳、氫、氮。濃硫酸又具有氧化性，將有機(jī)物炭化后的碳化為二氧化碳，硫酸則被還原成二氧化硫 2H2SO4 C 2SO2 2H2O CO2 二氧化硫使氮還原為氨，本身則被氧化為三氧化硫，氨隨之與硫酸作用生成硫酸銨留在酸性溶液中。H2SO42NH3 (NH4)2SO4第十

8、四張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 蒸餾：在消化完全的樣品溶液中加入濃氫氧化鈉使呈堿性，加熱蒸餾，即可釋放出氨氣，反應(yīng)方程式如下： 吸收與滴定：加熱蒸餾所放出的氨，可用硼酸溶液進(jìn)行吸收，待吸收完全后，再用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，因硼酸呈微弱酸性（k5.810-10），用酸滴定不影響指示劑的變色反應(yīng)，但它有吸收氨的作用，吸收及滴定的反應(yīng)方程式如下：2NaOH (NH4)2SO4 2NH3 Na2SO4 2H2O 2NH3 + 4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3第十五張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2)

9、 適用范圍 此法可應(yīng)用于各類食品中蛋白質(zhì)含量測(cè)定(3)儀器500ml凱氏燒瓶；定氮蒸餾裝置(4)試劑硫酸銅； 硫酸鉀；硫酸； 40gL硼酸溶液； 混合指示劑； 400gL氫氧化鈉；0.1molL鹽酸 標(biāo)準(zhǔn)溶液第十六張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(5) 操作步驟樣品消化：準(zhǔn)確稱取均勻的固體樣品0.53g,或半固體樣品25g,或吸取溶液樣品1525ml。小心移入干燥的凱氏燒瓶中(勿粘附在瓶壁上)。加入0.51g硫酸銅、10g硫酸鉀及25ml濃硫酸，小心搖勻后，于瓶口置一小漏斗，瓶頸45角傾斜置電爐上，在通風(fēng)櫥內(nèi)加熱消化（若無(wú)通風(fēng)櫥可于瓶口倒插入一口徑適宜的干燥管，用膠管與水力真空管相連

10、接，利用水力抽除消化過(guò)程所產(chǎn)生的煙氣）。先以小火緩慢加熱，待內(nèi)容物完全炭化、泡沫消失后，加大火力消化至溶液呈藍(lán)綠色。取下漏斗，繼續(xù)加熱0.5h，冷卻至室溫。第十七張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十八張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 蒸餾、吸收第二十張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 按圖裝好蒸餾裝置，冷凝管下端浸入接受瓶液面之下（瓶?jī)?nèi)預(yù)先裝有50ml 40gL硼酸溶液及混合指示劑56滴）。凱氏燒瓶?jī)?nèi)，加入100ml蒸餾水、玻璃珠數(shù)粒，從安全漏斗中慢慢加入70ml 400g/L氫氧化鈉，溶液應(yīng)呈藍(lán)褐色。不要搖動(dòng)，將定氮

11、球連接好。用直火加熱蒸餾30min，將蒸餾裝置出口離開液面繼續(xù)蒸餾1min，用蒸餾水淋洗尖端后停止蒸餾。第二十一張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 滴定：將接受瓶?jī)?nèi)的硼酸液用0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)。同時(shí)做一試劑空白（除不加樣品，從消化開始操作完全相同）。第二十二張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月式中W蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%； c鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的濃度，mol/L； V1空白滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)液量，mL； V2試劑滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)液量，mL； m樣品質(zhì)量，g； 0.014氮的毫摩爾質(zhì)量，g/mmol； F蛋白質(zhì)系數(shù)。(6) 結(jié)果計(jì)算第二十三張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月

12、2.2 微量凱氏定氮法(1)原理 微量凱氏定氮法的原理與操作方法，與常量法基本相同，所不同的是樣品質(zhì)量及試劑用量較少，且有一套適于微量測(cè)定的定型儀器微量凱氏定氮器。第二十四張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十五張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月100ml凱氏燒瓶。微量凱氏定氮器。 (2)儀器第二十六張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 20g/L硼酸溶液。 400g/L氫氧化鈉。 1g/L甲基紅乙醇溶液與1g/L溴甲酚綠乙醇溶液，臨用時(shí)按1：5混合。 0.01000mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 其他試劑同常量法。(3) 試劑第二十七張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月

13、 樣品消化：樣品消化步驟同常量法。將消化完全的消化液冷卻后，完全轉(zhuǎn)入100容量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻。 (4)測(cè)定方法第二十八張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 蒸餾 按圖安裝好微量定氮蒸餾裝置。于水蒸氣發(fā)生瓶?jī)?nèi)裝水至2/3容積處，加甲基橙指示劑數(shù)滴及硫酸數(shù)毫升，以保持水呈酸性，加入數(shù)粒玻璃珠，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶?jī)?nèi)的水。在接受瓶?jī)?nèi)加入10ml 40g/L硼酸及2滴混合指示劑，將冷凝管下端插入液面以下。第二十九張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 吸取10.00ml樣品消化稀釋液，由進(jìn)樣漏斗進(jìn)入反應(yīng)室，以少量水沖洗進(jìn)樣漏斗，并流入反應(yīng)室。再?gòu)倪M(jìn)樣口加入400g/L氫氧化鈉10

14、ml使溶液呈強(qiáng)堿性，用少量蒸餾 水洗漏斗數(shù)次，蓋塞 ，進(jìn)行水蒸氣 蒸餾。冷凝管下端 預(yù)先插入盛有10mL4%（或2%）硼酸吸收液,蒸餾至吸收液中所加的混合指示劑變?yōu)榫G色開始記時(shí)，繼續(xù)蒸餾10min后，將冷凝管尖端提離液面再蒸餾1min，用蒸餾水沖洗冷凝管尖端后停止蒸餾。 第三十張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 滴定 取下接受瓶，以0.01000mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色為終點(diǎn)。第三十一張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(5) 結(jié)果計(jì)算 式中W蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%； V0滴定空白蒸餾液消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液體積，mL； V1滴定樣品蒸餾液消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液體積，mL； V2蒸餾時(shí)吸

15、取樣品稀釋液體積，mL； C鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的濃度，mol/L； 0.014氮的毫摩爾質(zhì)量，g/mmol； F蛋白質(zhì)系數(shù)； m樣品質(zhì)量，g。第三十二張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.3 樣品的分解條件（1）K2SO4或Na2SO4 ：提高溶液的沸點(diǎn)（2）催化劑 CuSO4 氧化汞和汞 良好的催化劑，但劇毒； 硒粉（3）氧化劑 過(guò)氧化氫第三十三張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月硫酸鉀 加入硫酸鉀可以提高溶液的沸點(diǎn)而加快有機(jī)物的分解，它與硫酸鉀作用生成硫酸氫鉀可提高反應(yīng)溫度一般純硫酸的沸點(diǎn)在340攝氏度左右，而添加硫酸鉀后，可使溫度提高到4000C以上，原因主要在于隨著消化過(guò)程中硫酸

16、不斷地被分解 ，水分不斷逸出而使硫酸鉀濃度增大 ，故沸點(diǎn)升高，其反應(yīng)式如下： K2SO4+H2SO4=2KHSO4 2KHSO4=K2SO4+H2O+SO3但硫酸鉀加入量不能太大，否則消化體系溫度過(guò)高，又會(huì)引起已生成的銨鹽發(fā)生熱分解而造成損失： （NH4）2SO4=NH3+(NH4)HSO4 2(NH4)HSO4=2NH3+2SO3+2H2O除硫酸鉀外也可加入硫酸鈉，氯化鉀等鹽類來(lái)提高沸點(diǎn)，但效果不如硫酸鉀。第三十四張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月硫酸銅 CuSO4 催化劑 2CuSO4=CuSO4+SO2+O2 C+2CuSO4=Cu2SO4+SO2+O2 Cu2SO4+2H2SO

17、4=2CuSO4+2H2O+SO2 此反應(yīng)不斷進(jìn)行，待有機(jī)物被消化完后，不再有硫酸亞銅（褐色）生成，溶液呈現(xiàn)清澈的藍(lán)綠色。 可以指示消化終點(diǎn)的到達(dá) 下一步蒸餾時(shí)作為堿性反應(yīng)的指示劑。 作用第三十五張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（1）所用試劑應(yīng)用無(wú)氨蒸餾水配制。（2）消化過(guò)程應(yīng)注意轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏燒瓶，利用冷凝酸液將附在瓶壁上的炭粒沖下，以促進(jìn)消化完全。（3）若樣品含脂肪或糖較多時(shí)，應(yīng)注意發(fā)生的大量泡沫少量辛醇或液體石蠟，或硅消泡劑，防止其溢出瓶外，并注意適當(dāng)控制熱源強(qiáng)度。（4）若樣品消化液不易澄清透明，可將凱氏燒瓶冷卻，加入300g/L23ml過(guò)氧化氫后再加熱。2.4 注意事項(xiàng)第三十六張，

18、PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（5）若取樣量較大，如干試樣超過(guò)5g，可按每克試樣5ml的比例增加硫酸用量。（6）消化時(shí)間一般約4小時(shí)左右即可，消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)引起氨的損失。一般消化至透明后，繼續(xù)消化30min即可，但當(dāng)含有特別難以氨化的氮化合物的樣品，如含賴氨酸或組氨酸時(shí)，消化時(shí)間需適當(dāng)延長(zhǎng)，因?yàn)檫@兩種氨基酸中的氮在短時(shí)間內(nèi)不易消化完全，往往導(dǎo)致總氮量偏低。有機(jī)物如分解完全，分解液呈藍(lán)色或淺綠色。但含鐵量多時(shí)，呈較深綠色。第三十七張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（7）蒸餾過(guò)程應(yīng)注意接頭處無(wú)松漏現(xiàn)象，蒸餾完畢，先將蒸餾出口離開液面，繼續(xù)蒸餾1min，將附著在尖端的吸收液完全洗入吸

19、收瓶?jī)?nèi)，再將吸收瓶移開，最后關(guān)閉電源，絕不能先關(guān)閉電源，否則吸收液將發(fā)生倒吸。（8）硼酸吸收液的溫度不應(yīng)超過(guò)40C，否則氨吸收減弱，造成損失，可置于冷水浴中。（9）混合指示劑在堿性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。第三十八張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 半微量凱氏定氮第三十九張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4 氨基酸態(tài)氮的測(cè)定第四十張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 蛋白質(zhì)可以被酶、酸或堿水解，其水解的最終產(chǎn)物為氨基酸。氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的最基本物質(zhì)，雖然從各種天然源中分離得到的氨基酸已達(dá)175種以上，但是構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸主要是其中的20種，

20、而在構(gòu)成的氨基酸中，亮氨酸、 異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨算、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸等8種氨基酸在人體中不能合成，必須依靠食品供給，故被稱為必需氨基酸，它們對(duì)人體有著極其重要的生理功能，常會(huì)因其在體內(nèi)缺乏而導(dǎo)致患病或通過(guò)補(bǔ)充而增強(qiáng)了新陳代謝作用。 第四十一張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 隨著食品科學(xué)的發(fā)展和營(yíng)養(yǎng)知識(shí)的普及，食物蛋白質(zhì)中必需氨基酸含量的高低及氨基酸的構(gòu)成，愈來(lái)愈得到人們的重視。為提高蛋白質(zhì)的生理效價(jià)而進(jìn)行食品氨基酸互補(bǔ)和強(qiáng)化的理論，對(duì)食品加工工藝的改革，對(duì)保健食品的開發(fā)及合理配膳等工作都具有積極的指導(dǎo)作用。因此，食品及其原料中氨基酸的分離、鑒定和定量也就具有極其重

21、要的意義。第四十二張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月氨基酸態(tài)氮的測(cè)定雙指示劑甲醛滴定法：原理、試劑、測(cè)定方法、結(jié)果計(jì)算、說(shuō)明電位滴定法：原理、試劑、儀器、測(cè)定方法、結(jié)果計(jì)算第四十三張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4.1 雙指示劑甲醛滴定法(1) 原理氨基酸具有酸性的-COOH基和堿性的-NH2基。它們相互租用而使氨基酸成為中性的內(nèi)鹽。當(dāng)加入甲醛溶液時(shí)，-NH2基與甲醛結(jié)合，從而使其堿性消失。這樣就可以用強(qiáng)堿標(biāo)準(zhǔn)溶液來(lái)滴定-COOH基，并用間接的方法測(cè)定氨基酸的總量。反應(yīng)式（有三種不同的推論）如下：RCHH3NCCORCCOHOHNH2+HCHORCCOOHHN CH2+NaO

22、HRCHCOOHNHCH2OH或RCHCOOHN(CH2OH)2或RCHCOONaNCH2或 RCHNHCOOHCHO第四十四張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2) 方法特點(diǎn)及應(yīng)用 此法簡(jiǎn)單易行、快速方便，與亞硝酸氮?dú)馊萘糠ǚ治鼋Y(jié)果相近。在發(fā)酵工業(yè)中常用此法測(cè)定發(fā)酵液中氨基酸含量的變化，以了解可被微生物利用的氮源的量及利用情況，并以此作為控制發(fā)酵生產(chǎn)的指標(biāo)之一。普氨酸與甲 作用時(shí)產(chǎn)生不穩(wěn)定的化合物，使結(jié)果偏高;溶液中若有 存在也可與甲醛反應(yīng)，往往使結(jié)果高。第四十五張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(3) 試劑40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示劑，用氫氧化鈉將40%甲醛中和至

23、淡藍(lán)色。0.1%百里酚酞乙醇溶液0.1%中性紅50%乙醇溶液0.1%mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液第四十六張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(4) 操作方法 移取含氨基酸約2030mg的樣品溶液2份，分別置于250ml錐形瓶中，各加50ml 蒸餾水，其中1份加入3滴中性紅置試劑，用0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由紅變?yōu)?琥珀色為終點(diǎn)；另1份加入3滴百里酚酞指示劑及中性甲醛20ml，搖勻，靜置1分鐘，用0.1ml/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡藍(lán)色為終點(diǎn)。分別紀(jì)錄兩次所消耗的堿液ml數(shù)。第四十七張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月式中 c 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L; V1用中性紅作指示劑滴定時(shí)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL; V2用百里酚酞作指示劑滴定時(shí)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL; m測(cè)定用樣品溶液相當(dāng)于樣品的質(zhì)量，g 0.014氮的毫摩爾質(zhì)量，g/m mol (5) 結(jié)果計(jì)算氨基酸態(tài)氮（%）第四十八張，PPT共五十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4.2 電位滴定法(1)原理 根據(jù)氨基酸的兩性作用，加入甲醛以固定氨基的堿性，使羧基顯示出酸性，將酸度計(jì)的玻璃電極及甘汞電極同時(shí)插入被測(cè)液中構(gòu)成電池，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，依據(jù)酸度計(jì)指示的pH值判斷和控制滴定終點(diǎn)。(2)儀器 酸度計(jì)（附磁力攪攔器）第四十九張，PPT共