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1、關(guān)于超低溫冷凍保存種質(zhì)第一張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月種質(zhì)保存是指利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境保存種質(zhì)資源,使個(gè)體中所含有的遺傳物質(zhì)保持其完整性,有高的活力,能通過繁殖將其遺傳特性傳遞下去。第二張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月按保存類型分類 按保存類型分類可分為兩種類型非原生境保存 原生境保存第三張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月亞馬遜熱帶雨林第四張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第五張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第六張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第七張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月離體保存種植保存種子保存超低溫冷凍保存

2、常用的種質(zhì)保存方法第八張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月抑制外植體生長(zhǎng)的離體保存方法降低溫度:抑制生長(zhǎng)最常見的方法。降低環(huán)境中的氧含量:低氣壓處理、低氧分壓處理使用生長(zhǎng)延緩劑:多效唑、矮壯素其他方法:第九張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月種子保存優(yōu)點(diǎn):占用空間少,保存期較長(zhǎng),易干燥,易包裝和運(yùn)輸。缺點(diǎn):不適用于無性繁殖的植物種類,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),種子的生活力逐漸下降,同時(shí)易受到病蟲害的侵襲。第十張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月種植保存自然保護(hù)區(qū),植物園,森林公園缺點(diǎn):占地多,需要大量的人力物力,費(fèi)用高,易受到自然災(zāi)害的影響第十一張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6

3、月離體保存優(yōu)點(diǎn):占用空間少,無病蟲害以及自然災(zāi)害的影響,不受季節(jié)限制。短時(shí)間可實(shí)現(xiàn)大量植物的增殖,無病毒。缺點(diǎn):連續(xù)不斷的繼代培養(yǎng)可能會(huì)引起染色體和基因型的變異。第十二張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月種質(zhì)資源超低溫保存是將植物的細(xì)胞或組織經(jīng)過防凍處理后, 在液氮超低溫- 196下保存的方法。第十三張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月超低溫冰箱第十四張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月離體植物材料的超低溫冰凍保存技術(shù)植物材料的選取材料的預(yù)處理冰凍保護(hù)劑預(yù)處理降溫冷凍操作化凍操作化凍材料的活力檢測(cè)第十五張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月材料的選擇常用于離體超低溫保存的

4、常用植物材料 愈傷組織、懸浮細(xì)胞、原生質(zhì)體花粉和花粉胚莖尖、胚、幼齡植株第十六張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月材料的低溫預(yù)處理材料的預(yù)處理材料的預(yù)培養(yǎng)第十七張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月冰凍保護(hù)劑預(yù)處理常用的冷凍防護(hù)劑:多為小分子中性物質(zhì),在溶液中易結(jié)合水分子發(fā)生水合作用,使溶液粘性增加,弱化水的結(jié)晶過程,達(dá)到保護(hù)的目的。第十八張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 所使用的冷凍保護(hù)劑應(yīng)具有以下特性: 分子質(zhì)量較小 易于與溶劑混合 快速滲入細(xì)胞 無毒或毒性小 易洗脫 常用的是DMSO。第十九張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月保護(hù)劑預(yù)處理配制保護(hù)劑時(shí),應(yīng)該將其溶

5、解在培養(yǎng)基里,或者是溶解在有糖或無糖的水中。保護(hù)劑應(yīng)當(dāng)緩慢加入。使用復(fù)合冰凍保護(hù)劑比單獨(dú)使用更為有效。第二十張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月降溫冰凍操作快速冷凍法慢速冷凍法預(yù)冷凍法干燥冷凍法包埋脫水法玻璃化法第二十一張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1、快速冷凍法 指將植物材料從0或者其他預(yù)處理溫度直接投入液氮中保存的方法,降溫速度1000/min。 2、慢速冷凍法將處于0或其他預(yù)處理溫度的材料以12/min的降溫速度從起始溫度降到-100,穩(wěn)定1h后,投入到液氮保存或以此降溫速度連續(xù)降溫至-196的方法。 第二十二張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月c、預(yù)冷凍法 指將

6、植物保存材料放入液氮前,需經(jīng)過短暫時(shí)間的低溫鍛煉的方法。d、干燥冷凍法 將材料置于2729烘箱內(nèi)降低植物含水量,再投入液氮中保存的方法。 第二十三張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(e包埋凍存法第二十四張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月f玻璃化法玻璃化凍存:采用添加高濃度抗凍劑, 使細(xì)胞內(nèi)水分固化形成玻璃態(tài)的超低溫貯存方法 。特點(diǎn)設(shè)備簡(jiǎn)單操作方便凍存效果好第二十五張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月化凍操作a、快速解凍法指將液氮中保存的材料直接投入到3740溫水浴中進(jìn)行解凍的方法。解凍的升溫速度為500750/min。b、慢速解凍法將液氮中保存的材料先置于0低溫下解凍,再

7、逐漸升至室溫下進(jìn)行解凍的方法。第二十六張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月化凍材料的活力檢測(cè)檢驗(yàn)化凍后材料的生活力和存活率的最根本方法是再培養(yǎng)。FDA、TTC等染色的方法進(jìn)行快速檢測(cè),只能作為生活力的預(yù)測(cè)指標(biāo)第二十七張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十八張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 1973年科學(xué)家首次成功地超低溫保存了 胡蘿卜懸浮細(xì)胞。1993年,英國(guó)國(guó)家種質(zhì)庫采用超低溫保存離體的蘋果種質(zhì)進(jìn)行再培養(yǎng)成功。 超低溫保存技術(shù)的發(fā)展第二十九張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月超低溫保存種質(zhì)技術(shù)的應(yīng)用前景懸浮細(xì)胞和愈傷組織的保存生長(zhǎng)點(diǎn)冷凍保存胚狀體(體細(xì)胞胚、花粉胚)冷凍保存原生質(zhì)體冷凍保存第三十張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月小結(jié)生物細(xì)胞的低溫凍存是防止生物種質(zhì)滅

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