【人教版】生物選修一21微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)教案設(shè)計(jì)

1、【人教版】生物選修一：2.1微生物的實(shí)驗(yàn)室培育教課設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)【人教版】生物選修一：2.1微生物的實(shí)驗(yàn)室培育教課設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)7/7【人教版】生物選修一：2.1微生物的實(shí)驗(yàn)室培育教課設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)文檔根源為:從網(wǎng)絡(luò)采集整理.word版本可編寫(xiě).支持.專題2微生物的培育與應(yīng)用課題2.1微生物的實(shí)驗(yàn)室培育一、【課題目標(biāo)】（一）知識(shí)與技術(shù)認(rèn)識(shí)相關(guān)培育基的基礎(chǔ)知識(shí)；掌握培育基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù)（二）過(guò)程與方法剖析實(shí)驗(yàn)思路確實(shí)定和形成的原由，剖析實(shí)驗(yàn)流程，對(duì)照前面的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，概括共性，剖析差異，增添印象（三）感情、態(tài)度與價(jià)值觀形成勇于實(shí)踐、謹(jǐn)慎務(wù)實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神二、【課題要點(diǎn)】無(wú)菌技術(shù)

2、的操作三、【課題難點(diǎn)】無(wú)菌技術(shù)的操作四、【教課方法】啟迪式教課五、【教課工具】多媒體課件六、【教課過(guò)程】（一）引入新課在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用中，都利用了微生物的發(fā)酵作用，此中的微生物來(lái)自于制作過(guò)程中的自然感染。而在工業(yè)化生產(chǎn)中，為了提升發(fā)酵的質(zhì)量，需要獲取優(yōu)秀菌種，并保持發(fā)酵菌種的純度。這就要波及到微生物的培育、分別、鑒識(shí)等基本技術(shù)。此刻我們開(kāi)始學(xué)習(xí)微生物的培育和應(yīng)用專題。（二）進(jìn)行新課1基礎(chǔ)知識(shí)11培育基的種類包含固體培育基和液體培育基等。思慮1瓊脂是從紅藻中提取的多糖，在配制培育基頂用作為凝結(jié)劑?！驹鲅a(bǔ)】培育基的種類及其應(yīng)用：標(biāo)準(zhǔn)培育基種類配制特色主要應(yīng)用12培育基的化學(xué)成分包含水、無(wú)機(jī)鹽、

3、碳源、氮源四類營(yíng)養(yǎng)成分。固體培育基加入瓊脂許多菌種分別,判定,計(jì)數(shù)物理性質(zhì)半固體培育基加入瓊脂較少菌種保留思慮2從細(xì)胞的化學(xué)元素構(gòu)成來(lái)看，培育基中為何都含有這些營(yíng)養(yǎng)成分？液體培育基不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn)，連續(xù)培育C、H、O、N、P、S是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的基本元素，約占原生質(zhì)總量的97以上?；瘜W(xué)構(gòu)成合成培育基由已知成分派制而成，培育基成分明確菌種分類、判定【增補(bǔ)】碳源：如CO2、糖類、脂肪酸等有機(jī)物，構(gòu)成微生物的構(gòu)造物質(zhì)和分泌物，并供給能量。天然培育基由天然成分派制而成，培育基成分不明確工業(yè)生，產(chǎn)降低成本氮源：如N2鑒、別氨培鹽養(yǎng)、基硝酸鹽、牛肉膏添、加蛋某白種胨指等示，劑主或要化用學(xué)來(lái)藥合劑成蛋白質(zhì)

4、、核酸及含菌氮種代的謝鑒物別等。含有目的用途C、H、O、N的化合物既能夠作為碳源，又能夠作為氮源，如氨基酸等。菌種的分別選擇培育基增添（或缺乏）某種化學(xué)成分13培育基除知足微生物生長(zhǎng)的pH、特別營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣等要求?！驹鲅a(bǔ)】生長(zhǎng)因子：某些微生物正常生長(zhǎng)代謝過(guò)程中一定從培育基中汲取的微量有機(jī)小分子，如某些氨基酸、堿基、維生素等。思慮3牛肉膏和蛋白胨主要為微生物供給糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。思慮4培育乳酸桿菌時(shí)需要增添維生素，培育霉菌時(shí)需要將培育基pH調(diào)理為酸性，培育細(xì)菌時(shí)需要將pH調(diào)理為中性或微堿性?；顒?dòng)2：閱讀“無(wú)菌技術(shù)”，議論回答以下問(wèn)題：文檔根源為:從網(wǎng)絡(luò)采集整理.word版本可編寫(xiě).

5、支持.14獲取純凈培育物的要點(diǎn)是防備外來(lái)雜菌的入侵。15無(wú)菌技術(shù)包含：（1）對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的穿著和手進(jìn)行潔凈和消毒；（2）將培育器皿、接種器具和培育基等器具進(jìn)行滅菌；（3）為防止四周微生物污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰鄰近旁進(jìn)行；（4）防止已滅菌辦理的資料器具與四周物件相接觸。16比較消毒和滅菌（填表）比較項(xiàng)理化要素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)目芽孢和孢子可否被消滅思慮5無(wú)菌技術(shù)除了防備培育物被污染外，還擁有的目的是防備感染實(shí)驗(yàn)操作者。消毒較為平和部分生活狀態(tài)的微生物不可以17消毒方法：滅菌激烈所有微生物能（1）平時(shí)生活常常用到的是煮沸消毒法；（2）對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用巴氏消毒法（作

6、簡(jiǎn)要介紹）；（3）對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)第一噴灑石炭酸或煤酚皂等溶液以加強(qiáng)消毒成效，而后使用紫外線進(jìn)行物理消毒。4）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用酒精進(jìn)行消毒；5）飲水水源用氯氣進(jìn)行消毒。18滅菌方法：（1）接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；（2）玻璃器皿、金屬器具等使用干熱滅菌法，所用器材是干熱滅菌箱；（3）培育基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器材是高壓蒸汽滅菌鍋。（4）表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器材是紫外燈。思慮6對(duì)接種環(huán)滅菌時(shí)要用酒精燈的充分焚燒層火焰灼燒可能伸入試管或培育皿的部位。思慮7利用干熱滅菌箱對(duì)玻璃器皿滅菌時(shí)物件不可以擺得太擠，目的是防止阻礙熱空氣流通。思

7、慮8物件裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后，利于鍋內(nèi)溫度高升；隨后封閉排氣閥持續(xù)加熱，最后切斷熱源，使溫度自然降溫，氣壓務(wù)必降至要第一翻開(kāi)排氣閥，煮沸并清除鍋內(nèi)冷空氣，其目的是有氣壓升至100kPa，溫度為121，并保持1530min；零時(shí)翻開(kāi)鍋蓋，其目的是防備容器中的液體暴沸?！驹鲅a(bǔ)】培育基的配制原則：目的要明確：依據(jù)培育的微生物種類、培育的目的等確立培育基的種類和配制量。營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：培育基中各樣營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比率要適合。比如：碳氮比41菌大批生殖而產(chǎn)生谷氨酸少；碳氮比為31時(shí)，菌體生殖受克制而谷氨酸合成量大增。時(shí)，谷氨酸棒狀桿pH要適合：細(xì)菌培育基pH中性或偏堿性，霉菌培育基呈酸性。2實(shí)驗(yàn)操作21

8、計(jì)算：依據(jù)配方比率，計(jì)算100mL培育基各成分用量。22稱量：正確稱取各成分。稱取牛肉膏和蛋白胨時(shí)動(dòng)作要快速，目的是防備牛肉膏汲取空氣中水分。23熔解：加水加熱融化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化鈉持續(xù)加熱；加入瓊脂；用蒸餾水定容到100mL。整個(gè)過(guò)程不停用玻棒攪拌，目的是防備瓊脂糊底而致使燒杯破碎。24調(diào)pH：用1mol/LNaOH溶液調(diào)理pH至偏堿性。25滅菌：將配制好的培育基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌；所用培育皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。26倒平板：待培育基冷卻至50左右時(shí)在酒精燈火焰鄰近操作進(jìn)行。其過(guò)程是：文檔根源為:從網(wǎng)絡(luò)采集整理.word版本可編寫(xiě).支持.在火焰旁右

9、手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口快速經(jīng)過(guò)分焰；左手將培育皿翻開(kāi)一條空隙，右手將培育基倒入培育皿，馬上蓋上皿蓋。待平板冷卻凝結(jié)后，將平板倒過(guò)來(lái)擱置。思慮1錐形瓶的瓶口經(jīng)過(guò)分焰的目的是消滅瓶口的雜菌，防備雜菌感染培育基。思慮2倒平板的目的是防備培育基冷卻過(guò)程中形成的水滴落到培育基表面。思慮3若皿蓋和皿底之間粘有培育基，則該平板可否培育微生物？為何？不可以?？諝庵须s菌會(huì)在這些粘附培育基上生殖，并污染皿內(nèi)培育基。思慮4配制斜面培育基中，試管要加塞棉塞的目的是保持通氣并防備雜菌感染。思慮5試管培育基形成斜面的作用是增大接種面積。27接種271微生物接種的最常用方法是平板劃線法和稀釋

10、涂布法，此外還有穿刺接種和斜面接種等。272平板劃線法：經(jīng)過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培育基表面連續(xù)劃線的操作，將齊集的菌種逐漸稀釋分別到培育基表面。其操作步驟是：將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并翻開(kāi)大腸桿菌的菌種試管的棉塞。將菌種試管口經(jīng)過(guò)分焰達(dá)到消滅試管口雜菌的目的。將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中拿出一環(huán)菌種。將菌種試管口再次經(jīng)過(guò)分焰后塞上棉塞。將皿蓋翻開(kāi)一條空隙，把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃35條平行線，蓋上皿蓋，不要?jiǎng)澠婆嘤?。灼燒接種環(huán)，冷卻后從第一區(qū)劃線尾端開(kāi)始向第二地區(qū)內(nèi)劃線。重復(fù)上述過(guò)程，達(dá)成三、四、五地區(qū)內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。將平板倒置放在

11、培育箱中培育。思慮6取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上的微生物；除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種；取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行，其目的是防備高溫殺死菌種；最后灼燒接種環(huán)的目的是防備細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。思慮7在第1次劃線后都從上一次劃線尾端開(kāi)始的目的是獲取由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。273稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，并將不一樣稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培育基長(zhǎng)進(jìn)行培育。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲取單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。274系列稀釋操作：取盛有9mL水的無(wú)菌試管6支，編號(hào)101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的

12、移液管汲取1mL菌液注入編號(hào)為101試管中，并吹打3次，使之混勻。從101倍液中汲取1mL菌液注入到編號(hào)為102試管內(nèi)吹打平均，獲取102倍液。依此類推。思慮8操作中試管口和移液管應(yīng)在離火焰12cm處。整個(gè)操作過(guò)程中使用了1支移液管。3結(jié)果剖析與評(píng)論31培育未接種培育基的作用是比較，如有菌落形成，說(shuō)明培育基滅菌不完全。32在肉湯培育基上，大腸桿菌菌落呈白色，為圓形，圓滑有光彩，邊沿齊整。33培育12h和24h后的菌落大小不一樣（同樣、不一樣）；菌落散布地點(diǎn)同樣（同樣、不一樣）。原由是時(shí)間越長(zhǎng)，菌落中細(xì)菌生殖越多，菌落體積越大；菌落的地點(diǎn)不動(dòng)，但菌落數(shù)增加。思慮9在某培育基上出現(xiàn)了3種特色不一樣

13、的菌落，原由有培育基滅菌不完全或雜菌感染等。思慮10屢次使用的菌種利用暫時(shí)收藏法保留，長(zhǎng)久保留菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培育基培育后，保留在4冰箱中，每36個(gè)月轉(zhuǎn)種培育一次，弊端是保留時(shí)間較短，簡(jiǎn)單發(fā)生污染文檔根源為:從網(wǎng)絡(luò)采集整理.word版本可編寫(xiě).支持.和變異；后者將菌種與無(wú)菌體積等量混淆后保留在20冷凍箱中。（三）講堂總結(jié)、評(píng)論微培育基（四）實(shí)例研究生例1關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表達(dá)中，正確的選項(xiàng)是物配制培育基的原則A.是碳源的物質(zhì)不行能同時(shí)是氮源B.凡碳源都供給能量的培育基的配制計(jì)算稱量熔解實(shí)D.無(wú)機(jī)氮源也能供給能量C.除水之外的無(wú)機(jī)物只供給無(wú)機(jī)鹽驗(yàn)配制培育基的方法調(diào)pH分裝

14、加棉塞滅菌倒平板A、B選項(xiàng)，室NH4HCO3；有的碳源它的表達(dá)是不完好的。有的碳源只好是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同時(shí)是氮源，如培平板劃線法C選項(xiàng)，除水之外的無(wú)機(jī)物種同時(shí)是能源，如葡萄糖；有的碳源同時(shí)是氮源，也是能源，如蛋白胨。關(guān)于養(yǎng)純化大腸桿菌NaHCO，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和3無(wú)機(jī)鹽；而NaCl則只好供給無(wú)機(jī)鹽。關(guān)于D選項(xiàng)，無(wú)機(jī)氮源供給能量的狀況仍是存在的，如NH3可為硝化稀釋涂布法系列稀釋平板涂布細(xì)菌供給能量和氮源。答案：D例2下邊對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的選項(xiàng)是A.防備雜菌污染B.消滅雜菌C.培育基和發(fā)酵設(shè)施都一定滅菌D.滅菌一定在接種前分析：滅菌是微生物發(fā)酵過(guò)程的一個(gè)重要環(huán)

15、節(jié)。A說(shuō)的是滅菌的目的，因?yàn)榘l(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種，整個(gè)發(fā)酵過(guò)程不可以混入其余微生物（雜菌），因此是正確的；B是錯(cuò)誤的，因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染，但實(shí)質(zhì)操作中不行能只消滅雜菌，而是消滅所有微生物。C是正確的，因?yàn)榕c發(fā)酵相關(guān)的所有設(shè)施和物質(zhì)都要滅菌；發(fā)酵所用的微生物是滅菌后特意接種的，滅菌一定在接種前，假如接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。答案：B綜合應(yīng)用例3右表是某微生物培育基成分，請(qǐng)據(jù)此回答：（1）右表培育基可培育的微生物種類編號(hào)成分含量是。粉狀硫10g（2）若不慎將過(guò)度NaCl加入培育基中。（NH）SO0.4g如不想浪費(fèi)此培育基，可再加入，424用于培育。K2HPO44.0g（

16、3）若除掉成分，加入（CH2O），該培MgSO9.25g養(yǎng)基可用于培育。4（4）表中營(yíng)養(yǎng)成分共有類。FeSO0.5g4（5）無(wú)論何種培育基，在各樣成分都熔解CaCl20.5g后分裝前，要進(jìn)行的是。100ml26）右表中各成分重量確立的原則是。（7）若右表培育基用于菌種判定，應(yīng)當(dāng)增添的成分是。分析：關(guān)于一個(gè)培育基，它能培育何種微生物，要看它的化學(xué)成分。自然這只合用于合成培育基，假如是一個(gè)天然培育基就不可以從培育基的成分上劃分它是培育何種微生物的。剖析化學(xué)成分要從營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類出發(fā)。右表中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源三類，缺乏碳源和特別營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。對(duì)特別營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有的微生物是不需要的，但沒(méi)有微生物是

17、不需要碳源的。該培育基中沒(méi)有碳源，說(shuō)明培育的微生物是從空氣中獲取碳源的，即可培育的微生物就是自養(yǎng)型微生物了。該培育基中加入了過(guò)度食鹽，就能夠成為金黃色葡萄球菌鑒識(shí)培育基，但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物，這個(gè)培育基就還需要加入有機(jī)碳源。該培育基若加入（CH2O），培育基中就有了碳源，但除掉成分，卻使培育基中沒(méi)有了氮源，這時(shí)就只好用于培育固文檔根源為:從網(wǎng)絡(luò)采集整理.word版本可編寫(xiě).支持.氮微生物了。關(guān)于菌種判定，常常用的是固體培育基，而表中沒(méi)有凝結(jié)劑，需要加入常有的凝結(jié)劑瓊脂。答案：自養(yǎng)型微生物含碳有機(jī)物金黃色葡萄球菌固氮微生物3調(diào)整pH依微生物的生長(zhǎng)需要確立瓊脂（或凝結(jié)劑）（五）穩(wěn)固練習(xí)1

18、不行能作為異養(yǎng)微生物碳源的是A牛肉膏B含碳有機(jī)物C石油D含碳無(wú)機(jī)物2根瘤菌能利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的組別是ANH，（CHO），NaClBN，（CHO），CaCl23222C銨鹽，CO，NaClDNO，CO，CaCl22223配制培育基的表達(dá)中正確的選項(xiàng)是A制作固體培育基一定加入瓊脂B加入青霉素可獲取放線菌C培育自生固氮菌不需氮源D發(fā)酵工程一般用半固體培育基4自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培育基的主要差異是A碳源B氮源C無(wú)機(jī)鹽D特別營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)5下表是相關(guān)4種生物的能源、碳源、氮源和代謝種類的概括。此中正確的選項(xiàng)是()生物硝化細(xì)菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒狀桿菌能源氧化NH3N2的固定分解糖類等有機(jī)物光能碳源C0糖

19、類糖類糖類2氮源NHN+-尿素NH、NO3243代謝種類自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)兼性厭氧型自養(yǎng)需氧型A根瘤菌、谷氨酸棒狀桿菌B硝化細(xì)菌、酵母菌C酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌D硝化細(xì)菌、根瘤菌6甲、乙、丙是三種微生物，下表、是用來(lái)培育微生物的三種培育基。甲、乙、丙都能在種正常生長(zhǎng)生殖；甲能在中正常生長(zhǎng)生殖，而乙和丙都不可以；乙能在中正常生長(zhǎng)生殖，甲、丙都不能。以下說(shuō)法正確的選項(xiàng)是（）粉狀硫K2HPO4FeSO4蔗糖（NH4）2SO4H2OMgSO4CaCl210g4g0.5g10g0.4g100ml9.25g0.5g+-+-+A、甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B、甲、乙、丙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C、

20、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物D、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物7微生物（除病毒外）需要從外界汲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并經(jīng)過(guò)代謝來(lái)保持正常的生長(zhǎng)和生殖。以下相關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)的說(shuō)法正確的選項(xiàng)是文檔根源為:從網(wǎng)絡(luò)采集整理.word版本可編寫(xiě).支持.A乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是同樣的B微生物生長(zhǎng)中不行缺乏的一些微量的無(wú)機(jī)物稱為生長(zhǎng)因子C培育基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物的增殖越有益D生長(zhǎng)因子一般是酶或核酸的構(gòu)成成分，微生物自己合成這些生長(zhǎng)因子的能力常常不足。8某一種細(xì)菌株要從環(huán)境中提取現(xiàn)成的亮氨酸（20種氨基酸中的一種）才能生長(zhǎng)，此菌株對(duì)鏈霉素敏感。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑辦理此菌株，想挑選出表中細(xì)菌菌株種類。依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)昴康?，采用的培育基種類是（）注：亮氨酸鏈霉素“”加入“”不加入如：不加亮氨酸：加入鏈霉素選項(xiàng)挑選出不需要亮氨酸的挑選出抗鏈霉素的挑選出不需要亮氨酸的抗鏈霉素菌株菌株的菌株9要將從土壤中