煙草青枯病土壤微生物數(shù)量及生理群的測定

1、煙草青枯病土壤微生物數(shù)量及生理群的測定 結(jié)果表明：青枯病重發(fā)丘塊四季中細(xì)菌和真菌平均數(shù)多、放線菌平均數(shù)少；輕發(fā)丘塊則細(xì)菌和真菌平均數(shù)少、放線菌平均數(shù)多。 測定的7種微生物生理群中，青枯病重發(fā)丘塊四季中硝酸細(xì)菌和反硫化細(xì)菌平均數(shù)少、反硝化細(xì)菌平均數(shù)多，輕發(fā)丘塊則硝酸細(xì)菌和反硫化細(xì)菌多、反硝化細(xì)菌平均數(shù)少。 從不同季節(jié)來看，重度發(fā)病地塊春季細(xì)菌數(shù)最多，夏季硝酸細(xì)菌少。 關(guān)鍵詞： 煙草 青枯病 土壤微生物 生理群 經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)煙草青枯病發(fā)生危害時(shí)，在其他栽培條件相同的情況下，同一類型稻田土或旱土的不同地塊，或同一地塊不同地段的煙地，青枯病發(fā)生危害輕重不同，其原因是否與土壤中微生物群落有關(guān)。這項(xiàng)工作以往

2、很少有人研究。 本研究試圖通過對煙草青枯病不同病情的土壤進(jìn)行微生物數(shù)量及組成分析，為篩選煙草土壤中青枯病菌拮抗微生物奠定基礎(chǔ)，為深入開展煙草青枯病生物防治研究提供理論依據(jù)。 材料和方法 土壤來源：選擇了湖南省郴州市桂陽縣仁義鄉(xiāng)汪山村煙草青枯病常發(fā)旱地（黃壤土）2.5公頃，栽植烤煙品種k326，采用五點(diǎn)取樣法，在病害發(fā)生最多時(shí)調(diào)查一次，煙葉采收后調(diào)查一次。 確定面積0.083公頃,青枯病病指53.6(1號土壤);面積0.073公頃;青枯病病指34.5(2號土壤);面積0.08公頃，青枯病病指11.2(3號土壤)為取土來源，分春（3月中旬）、夏（6月中旬）、秋（10月中旬）、冬（12月中旬）四個(gè)季

3、節(jié)取土分析。 培養(yǎng)基 細(xì)菌用牛肉汁蛋白胨瓊脂放線菌用高氏號瓊脂真菌用馬丁氏瓊脂固氮菌用改良阿須貝瓊脂亞硝酸細(xì)菌用改良斯蒂芬遜培養(yǎng)液硝酸細(xì)菌用亞硝酸鹽培養(yǎng)液反硝化細(xì)菌采用檸檬酸培養(yǎng)液硫化細(xì)菌采用低亞硫酸鹽培養(yǎng)液反硫化細(xì)菌采用有機(jī)氮源培養(yǎng)液化學(xué)試劑 孟加拉紅，鏈霉素，重鉻酸鉀，對氨基苯磺酸，萘胺、二苯胺、KI、HgI2、KOH、Bacl2、等均為分析純。測定方法細(xì)菌、放線菌、真菌、固氮菌、纖維素解菌的總數(shù)測定采用平板菌落計(jì)數(shù)法。亞硝酸細(xì)菌和硝酸細(xì)菌應(yīng)用稀釋法：取10-310-7等5個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度3個(gè)重復(fù)，每管接土壤懸液1毫升，在25-28下培養(yǎng)1014天，用格利斯試劑、 測定NO2-，用二苯

4、胺試劑測定NO3-。反硝酸細(xì)菌應(yīng)用稀釋法：取10-310-7等5個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度3個(gè)重復(fù)，每管接土壤懸液1毫升，在28-30下培養(yǎng)14天，用萘氏試劑測定NH3。用格利斯試劑檢查NO2，檢查杜氏小管有無氣泡測定N2。硫化細(xì)菌應(yīng)用稀釋法：取10-310-7等5個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度3個(gè)重復(fù)，每管接土壤懸液0.5毫升，在28-30下培養(yǎng)15天，用1%BaCl2溶液測定SO42-是否存在。反硫化細(xì)菌應(yīng)用稀釋法：取10-310-7等5個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度3個(gè)重復(fù)，每管接土壤懸液0.5毫升，在28-30下培養(yǎng)14天，檢查有無黑色FeS沉淀。 結(jié)果與分析 土壤主要微生物種類和數(shù)量三種煙草土壤中主要微生物種

5、類有細(xì)菌、放線菌和真菌。它們在土壤中的數(shù)量，在1、2、3號土中細(xì)菌最多，真菌次之，放線菌再次。三種土壤比較，細(xì)菌平均數(shù)以1號土最多，2號和3號土中細(xì)菌平均數(shù)相差不大，放線菌平均數(shù)以3號土最多，1、2號較多，且差異小，真菌平均數(shù)以1號土最多，2號次之，3號最少（見表1）。不同季節(jié)三種煙草土壤中細(xì)菌、放線菌、真菌數(shù)量變化1號土春、夏、秋、冬四季細(xì)菌均最多，數(shù)量穩(wěn)定。放線菌春、冬季較多，夏、秋季較少，真菌以夏季最多，春秋冬季少，數(shù)量穩(wěn)定。2號土春夏秋冬細(xì)菌均最多，放線菌春冬季較多。真菌以夏季最多，冬季次之，春、秋季少。3號土春夏秋冬細(xì)菌均最多，放線菌春冬季較多，春夏秋冬四季真菌較少（見表2）。煙草土

6、壤中主要微生物生理群及其數(shù)量 經(jīng)測定在1、2、3號煙草土壤中均有纖維素分解菌、亞硝酸細(xì)菌、硝酸細(xì)菌、反硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌、反硫化細(xì)菌。在1、2、3號土中均未檢測到好氣性固氮菌。纖維素分解菌平均數(shù)量以3號土最多，其次是1號土、2號土最少亞硝酸細(xì)菌平均數(shù)量1號和3號土居多，2號土比1號和3號土少二分之一；硝酸細(xì)菌平均數(shù)以3號土最多，其次為2號土，1號土較少；反硝化細(xì)菌平均數(shù)以1號土最多，其次為2號土，3號土較少；硫化細(xì)菌平均數(shù)以2號土最多，其次是1號土，3號土較少；反硫化細(xì)菌平均數(shù)以3號土較多，2號土次之，1號土較少（見表3）。微生物生理群數(shù)量季節(jié)性變化纖維素分解菌和反硫化細(xì)菌1、2、3號土中的數(shù)

7、量周年無變化亞硝酸細(xì)菌夏冬兩季在1、3號土中最多硝酸細(xì)菌夏季2、3號土中最多反硝化細(xì)菌和硫化細(xì)菌春季在1、2、3號土中均最多硫化細(xì)菌春夏兩季在1、2、3號土中也最多除此以外,各種微生物在各季節(jié)1、2、3號土中其數(shù)量變化?。ㄒ姳?）。 微生物生理群數(shù)量差異纖維素分解菌和反硫化細(xì)菌無差異亞硝酸細(xì)菌數(shù)量1、3號土相同，且多于2號土硝酸細(xì)菌數(shù)量2、3號土相同，比1號土多，反硝化細(xì)菌1、2號土相同，且較多于3號土硫化細(xì)菌數(shù)量1、2、3號春夏季相同，秋冬季略有差異（見表4）。小結(jié)與討論在測定的四個(gè)季節(jié)感染青枯病的煙草土壤中的微生物的平均數(shù)中, 1、2、3號土發(fā)病由重到輕，細(xì)菌、真菌平均數(shù)依次由多到少，放線菌平均數(shù)則由少到多 從不同季節(jié)來看，重度發(fā)病地塊春季細(xì)菌數(shù)最多，煙草青枯病嚴(yán)重，這可能與春季雨水多，土壤濕潤，氣候適宜，有利于青枯病侵入放線菌多數(shù)種類能產(chǎn)生抗菌素，抑制細(xì)菌生長，不利病害發(fā)生，如春季輕度發(fā)病地塊放線菌較多，病害較輕。測定的7種微生物生理群中發(fā)病由重到輕，硝酸細(xì)菌和反硫化細(xì)菌四季的平均數(shù)由少到多反硝化細(xì)菌平均數(shù)則由多到少土壤中硝酸細(xì)菌多表明土壤通氣性良好、銨態(tài)氮較多反硝化細(xì)菌多的表明土壤中硝酸鹽多、土壤通氣性差，不利于好氣性微生物生長發(fā)育 不同土壤中微生物生理群數(shù)量季節(jié)性變化：