白酒中兩種常見塑化劑快速定量方法的研究

1、10/10釀酒2015年第2期1106頁白酒中兩種常見塑化劑快速定量方法的研究向雙全1,2張志剛1,2甘肅省固態(tài)發(fā)酵工程技術(shù)研究中心 甘肅 徽縣72308;2.金徽酒股份有限公司 甘肅 徽縣 7423摘要：本文建立了氣相色譜質(zhì)譜同時測定白酒中相關(guān)塑化劑含量的檢測方法。特別對影響白酒樣品中塑化劑提取的各種因素和多種前處理方法進行比較，并進行優(yōu)化處理,最終使本方法能夠快速準確測定白酒中的塑化劑含量，具有準確度高、操作簡便、成本低等優(yōu)點。試驗結(jié)果顯示，在S/10條件下,B、DEHP的定量下限分別為004g/L、.3mgL,平均加標回收率為4.4%108。3，精密度試驗均小于%,滿足常規(guī)定量分析要求.

2、關(guān)鍵詞：白酒；塑化劑；DP;DH塑化劑是在聚合物體系的生產(chǎn)過程中添加，增加聚合物塑性的一種物質(zhì)鄰苯二甲酸酯(Phthalae)縮寫P是一種揮發(fā)性很低，穩(wěn)定性高且無味或具有芳香氣味的粘稠液體。在水中溶解度很小，易溶于多數(shù)有機溶劑，易溶于乙醇。鄰苯二甲酸酯塑化劑與塑料主體結(jié)構(gòu)之間不是以化學(xué)鍵相結(jié)合的，所以在使用過程中會不斷從塑料中釋放出來，污染環(huán)境.研究表明,鄰苯二甲酸酯可能影響兒童發(fā)育，甚至有可能危害兒童肝臟和腎臟。同時可引起許多健康問題,包括哮喘、生殖功能異常、癌癥、低出生體重、自閉癥和注意力缺陷多動癥（AH） 等。另外，鄰苯二甲酸酯已經(jīng)被WH公布為“環(huán)境荷爾蒙”，在體內(nèi)會干擾人體的內(nèi)分泌系統(tǒng)

3、.因此，歐盟（EU）、美國（USA) ,以及其他一些國家已經(jīng)開始監(jiān)管鄰苯二甲酸酯類化合物的暴露問題.從007 年開始，歐盟(20054/EC) 即對六種鄰苯二甲酸酯類化合物在兒童玩具中的使用進行了嚴格控制,而美國從2009 年起也開始執(zhí)行類似法規(guī)-2。 2012年月日有媒體報道，國內(nèi)相關(guān)實驗室的檢測報告顯示，某名酒中檢測出3種塑化劑成分，分別為鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEP)、鄰苯二甲酸二異丁酯（IB）和鄰苯二甲酸二丁酯（）。其中，鄰苯二甲酸二丁酯的含量為1.8。201年6月衛(wèi)生部簽發(fā)的51號文件衛(wèi)生部辦公廳官員通報食品及食品添加劑中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)最大殘留量的函,規(guī)定鄰苯二甲酸二丁酯

4、的最大殘留量為.3/，該酒中的塑化劑鄰苯二甲酸二丁酯被認為超標20. 本文在國家標準/1911208指導(dǎo)原則下,篩選、優(yōu)化了白酒中塑化劑檢測的前處理方法,排除了檢測中遇到的各種干擾因素，能快速準確測定白酒中相關(guān)物質(zhì)。采用質(zhì)譜選擇離子監(jiān)測（M）模式,參照國家標定性、定量離子，進行外標曲線法定量.本方法具有高效提取白酒中塑化劑的優(yōu)點，操作快捷簡便、樣品前處理成本低、結(jié)果準確度高的優(yōu)點。1材料與方法樣品、儀器、試劑酒樣：從釀酒協(xié)會購進標準酒樣，市售，以及特定測試對象公司提供。儀器設(shè)備：安捷倫89A-59氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（配69自動進樣器）,亞榮旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，UP超純水系統(tǒng)，恒溫水浴鍋，渦旋混合器，

5、分液漏斗。試劑:鄰苯二甲酸二丁酯(D，CAS84-),鄰苯二甲酸二（2 乙基己基)酯（DEHP，A1-)，正己烷(色譜純）,乙醇（色譜純），UP制超純水，重蒸蒸餾水.1.試驗方法1。2.1標準儲備液的配制將各5支含10m的DB、DEP的色譜純標樣用正己烷溶于10L容量瓶中,配制成5。0mgL的標準儲備液，置于冰箱中備用。1.2標準使用液的配制使用時將標準儲備液用正己烷稀釋至00g/,0.0mg/L,1。00mgL，2.mg/L，5。0g/的標準系列溶液上機測試。1。2。3樣品前處理取m白酒樣品于50mL比色管中,加入5m正己烷,渦旋5in,靜置分層5 i，取正己烷層用于分析。2.4氣相色譜及質(zhì)

6、譜條件色譜條件:HP5MS彈性石英毛細管柱（300.5m.25u)；進樣口溫度50；不分流進樣u;程序升溫:60保持1mn，以0in升到22并保持min，再以/mn升到80并保持i;載氣為高純氦（99999），柱流量1m/m。質(zhì)譜條件：E電離源,電子能量7eV,離子源溫度230，四極桿溫度15，溶劑延遲m，選擇離子分組（2組）監(jiān)測模式（IM），DBP、DEHP的定性和定量選擇離子見表1。表 3種鄰苯二甲酸酯的定量離子、定性離子及其豐度比Tae kindsofpthlic cidestr tw unttie ion, qlative o a tbundnc rato序號名稱保留時間定量離子輔助定

7、量離子定性離子及其豐度比1BP117in49223149：223:205：121（100：5：4：2)2DEH1。65min146749:16：7：3（100：29：1:9)結(jié)果與討論2。萃取溶劑的選擇黃永輝比較了正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯等溶劑對鄰苯二甲酸酯的總提取率，發(fā)現(xiàn)正己烷對樣品中鄰苯二甲酸酯的提取率最高,且本底干擾少4.結(jié)合本文研究對象為白酒，乙醚、乙酸乙酯都具有易溶于乙醇的特點,二氯甲烷、三氯甲烷的提取效果不如正己烷，且具有毒性,因此可排除。且結(jié)合國家標準GB/19003鄰苯二甲酸酯測定方法中萃取劑也為正己烷,因此本文確定用正己烷作為萃取溶劑進行研究。酒樣的前處理本

8、文比較了水浴5，40旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)，室溫下()空氣、氮氣吹掃去除白酒樣品中乙醇的前處理方法，以及調(diào)整酒樣的酒精度直接加正己烷萃取塑化劑和直接進樣等種樣品前處理方法其中水浴加熱去除乙醇和直接進樣兩種前處理方法會導(dǎo)致測定的鄰苯二甲酸酯結(jié)果偏小;40旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)和吹掃去除樣品中乙醇的前處理方法能夠準確定量，但是必須掌握好去除乙醇的體積量，過多或者過少都會引起結(jié)果的偏差,這就需要在樣品處理過程中非常小心地觀察預(yù)計好需要保留的樣品量,否則準確度和精密度都將受到影響,特別是酒精度較高的高度酒樣和基礎(chǔ)酒，即使在室溫下吹掃也會帶離部分DB以及沸點更低的鄰苯二甲酸酯物質(zhì)通過作者分段蒸餾試驗發(fā)現(xiàn)，以上前處理方法造成

9、結(jié)果不穩(wěn)定的主要原因是，白酒中的DBP和P很容易同乙醇同時蒸餾或者揮發(fā)出去，見添加和EP樣品的蒸餾曲線圖1。圖1 度酒樣00ml蒸餾出前500ml分10段每段50l的DB和DEHP含量變化Fi 46 egr eknd 800lditled ou bfore 50ml isdivied nto 10sections each setinml BP nd DEHP conten本文重點研究了通過調(diào)整樣品酒精度,直接加正己烷萃取鄰苯二甲酸酯的樣品前處理方法.通過試驗發(fā)現(xiàn)該方法準確、簡便、快捷，回收率能達到預(yù)期，從而確定用該前處理方法。2.21正己烷與樣品的互溶性 在樣品中酒精度在75度以下時，正己烷

10、與樣品互不相容。當樣品酒精度高于75度時，正己烷逐漸開始部分溶入樣品中，當酒精度達到9度時正己烷與樣品完全互溶而不分層。這就說明了我們要用正己烷萃取酒樣中的鄰苯二甲酸酯必須找到一個適合的酒精度進行萃取試驗。22。2乙醇含量對萃取效果的影響本文比較了樣品在不同酒精度下，添加相同含量的標準B、DEP進行的回收試驗，結(jié)果見表2.該試驗中取酒樣m，再加入正己烷5L于0mL具塞比色管中，在渦旋混合器上渦旋m,靜置分層，取正己烷相進行GC-MS分析。從表2數(shù)據(jù)分析可得出，在酒精度度以下進行直接萃取，測定結(jié)果與理論值相吻合,但在25度以下時萃取會出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,并且必須加鹽或者加熱才能破乳，酒精度在0度以上時

11、萃取效果逐漸下降，因為DBP、DHP也易溶于乙醇，當乙醇含量越高，且超過一定值時就會影響正己烷的萃取效果,甚至不能萃取.因此我們確定本方法中將所有酒樣的酒精度調(diào)整到度。表 不同酒精度中添加0。0mg/L的DB和EP標準回收率測定結(jié)果Table 2The etesults ofthe DBP ad 0。3/Land DEH recoery re of coho in dfrent sadad酒精度DBP含量及回收率（n)DH含量及回收率（n=)1度2（須加入0.5al破乳）.3% 0.29(須加入0。5gaCl破乳）9.715度。2(須加入.5NaCl破乳).3.29（須加入0。gNC破乳）96

12、。2度0。29（須加入0.gNC破乳）96。70。9（須加入gNaCl破乳）6。7%5度。3 0028 9。330度。0 000。28 93335度0。9 96。0.28 93。30度0。30 100.28 93.5度0 90.00。2 90.0%50度0.26 86。70。7 90。06度0。5 3.30.28 337度0。22 3。%0.28 9.3%0度23 6。74（正己烷開始部分溶入酒樣）113223正己烷與樣品酒的最佳量比關(guān)系 本文考察了50L具塞比色管中正己烷 ：樣品酒的體積比值：、1:1、1：三種量比關(guān)系下的萃取效果，結(jié)果顯示當1:1時效果最好、測定也結(jié)果最穩(wěn)定，且為5L:L，

13、當體積升至0：1時萃取效果下降。2。溫度、總酸、總酯對萃取效果的影響 本文考察了萃取溫度50范圍內(nèi)萃取效果，試驗顯示在該溫度范圍內(nèi)萃取效果穩(wěn)定,不受影響。同時還往樣品中添加乙酸2L, 己酸乙酯6L時,同樣不影響正己烷對DB、DEP的萃取效果。2。.5樣品中塑化劑濃度對萃取效果的影響當酒樣中的鄰苯二甲酸酯含量在10mg/L以下時,正己烷的能一次徹底將樣品中的塑化劑萃取干凈,用分液漏斗取出下層酒樣再次用正己烷萃取后進行GCS定量分析,結(jié)果顯示未檢出被測組分。這就說明當酒樣中塑化劑含量在10mg/L以下時使用該前處理方法能一次完全萃取出樣品中的目標物質(zhì)。當酒樣中的鄰苯二甲酸酯含量達到12mg/L時,

14、第二次萃取時結(jié)果為.0mg/L.再次驗證樣品中鄰苯二甲酸酯在1g/L以下時正己烷能一次徹底將其萃取干凈，并進行準確定量分析。2。2。6最終酒樣前處理方法的確定 綜合考慮以上酒樣在前處理過程中影響萃取效率的各種因素，我們最終確定樣品的前處理方法為：先把待測酒樣酒精度調(diào)整到30度，再取調(diào)整后樣品mL,正己烷L，渦旋混合5n，靜置分層,取正己烷層進行GMS分析。若樣品的酒精度在0度以下時,直接用正己烷萃取,如遇渦旋混合后不能破乳的情況，需加入適量的鹽進行破乳、分層。23B、DEHP定性定量質(zhì)譜譜圖 圖2為DBP與DH的SIM離子監(jiān)測色譜圖,由圖可知被測組分峰分離完全,峰形尖銳,對稱性好,且保留時間與

15、國家標準GB/ 191108吻合。圖為D離子碎片149、223豐度比圖，其中14為定量離子,2為輔助定量離子,且14:223的豐度比與國家標準GBT291208中的豐度比接近。綜上，保留時間、主要離子碎片及豐度比基本一致,說明方法分離完全，抗干擾能力強，定性定量分析準確可靠。圖 DP和DHP的選擇離子監(jiān)測色譜圖Fig。2 Sleted ionitorngtoo DBP ad E圖 BP的SI監(jiān)測離子碎片豐度圖Fig SM mniton iosP bundanemap2.4方法的線性范圍、檢出限和定量限本文采用外標法進行定量，以目標化合物的質(zhì)量濃度為橫坐標，響應(yīng)值的峰面積為縱坐標建立標準曲線(見

16、圖),線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限、定量限。在基體酒樣中添加回收試驗,按信噪比(S/N）為3計算方法的檢出限（LOD），按（S/)為10計算方法的定量限（LOQ），見表3。圖D的外標法標準曲線圖Fig. DBPeernal staar metod, star cuve表3 BP和DHP的線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限le h iear rane, t D andDH corelaion coefcient, mitofdtetn atof aiicaioPA線性范圍rLOD（m/L）LO(g/L）P.055.99.000DHP0。05509973。00。032.方法的精密度和準確度 為了驗證

17、方法的準確度，對42 v、52 vo 、.vl%三種樣品酒進行加標回收試驗，BP與DEH的加標水平分別為0.05、0.10、100m/L和0.0、1。0、1。，按照2。2.6節(jié)前處理方法處理,每一水平分別做6次平行試驗,計算平均回收率和相對標準偏差(D）DBP與DEHP的加標回收率的范圍為944%18。3,相對標準偏差2%60（見表4)，其精密度和準確度滿足分析要求.表4 三種酒樣的PAEs的加標回收率及相對標準偏差（n）單位:（mg/）ble 4hree nd the reoryofwnsmpls PAE ratndh reltive standddevation（n=6）Coma:(mg/

18、L）P添加量基體含量測定值回收率RSD%BP0。00.070。131。5。0。1。80174。46。10。31。109.3.5DEP0.5。150。6734。000。18.159。4。41。0021。696。05。12。6實際樣品測試從2年媒體報道白酒中含有塑化劑以來，本實驗室就組織專門的研究人員、設(shè)備，成立項目組投入到該項目研究工作中，采集市場上各類白酒數(shù)十種,監(jiān)測本公司產(chǎn)品數(shù)百批次進行鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)的檢測，結(jié)果表明白酒中主要存在B和DEH兩種鄰苯二甲酸酯物質(zhì),根據(jù)衛(wèi)生部辦公廳相關(guān)要求中規(guī)定P、DEP在食品中的特定遷移量分別為03 mg/kg、1. m/k為判斷依據(jù),測試對象生產(chǎn)的白酒產(chǎn)品均在要求范圍之內(nèi)，甚至很多產(chǎn)品目標檢測物含量都在定量限以下或者未檢出，符合研究對象具體生產(chǎn)情況的預(yù)期。3結(jié)論 本文重點研究了提取白酒中DB和DEH兩種鄰苯二甲酸酯的前處理方法，建立了C-法測定白酒中塑化劑的方法.該方法準確、簡便、靈敏度、精密度都能滿足日常檢測分析要求，適合用于白酒中PAs的定量分析。參考文獻:1王小逸，林興桃,客慧明。鄰苯二甲酸酯類環(huán)境污染物健康研究新進展J環(huán)境與健康,20，4（10）：820821董夫銀，閆杰。歐盟及美國禁用鄰苯二甲酸的法規(guī)及其出臺始末J檢驗檢疫科學(xué),206，6（）:78-80。GB/T 1911-200,食品中鄰苯二甲酸酯的測定S.北京: