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1、冠心病患者血清C反響蛋白程度與血管內(nèi)皮損傷之間的聯(lián)絡(luò)【摘要】目的:討論冠心病患者血清反響蛋白與血管內(nèi)皮損傷的關(guān)系。方法:以45例冠心病患者為研究對(duì)象,以15例其他心臟病患者和20例安康者作為對(duì)照組,測(cè)定他們外周血循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞e數(shù)量及血清反響蛋白程度,并進(jìn)展分析比較。結(jié)果:冠心病患者組e數(shù)量和反響蛋白程度明顯高于其他心臟病組和對(duì)照組p0.05冠心病患者e數(shù)量和反響蛋白呈正相關(guān)r=0.78,p0.05。結(jié)論:冠心病患者的血管內(nèi)皮損傷可能與e數(shù)量及反響蛋白程度有關(guān),二者的協(xié)同作用可能在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用。【關(guān)鍵詞】冠狀動(dòng)脈疾??;反響蛋白;內(nèi)皮細(xì)胞abstrat:bjetive:ti
2、nvestigatethehangesf-reativeprtein(rp)levelsanditsrelatinttheendthelialinjuryinpatientsithrnaryarterydisease(ad).ethds:thenuberfirulatingendthelialell(e)aseasuredinadpatientsandalsinthentrlgrupfpatientsiththerheartdiseaseandnralsubjets,eanhilethelevelfserureativeprteineredetetedithsatternepheletryin
3、threegrups.results:thenuberfeandlevelfrperesignifiantlyhigherinadpatientsthanthseinpatientsiththerheartdiseaseandnralntrlgrup(p0.05).thenuberfeaspsitivelyrrelatedithrpinadpatients(r=0.78,p0.05)nlusin:eandrpaybeinvlvedinendthelialdysfuntinfrnaryarterydisease;thelserrelatinbeteeneandrpaybentributingtt
4、hepathgenesisfatherslersis.authrsaddress:departentfbiheistryandleularbilgy,basiedialshllfuhanuniversity,uhan,hubei,430071,hinakeyrds:rnaryarterydisease;-reativeprtein;endthelialell隨著人們生活程度的進(jìn)步,冠心病的發(fā)病率呈逐年增加的趨勢(shì),因此對(duì)冠心病的發(fā)病機(jī)制的研究也日益重視。近來(lái)反響蛋白(rp)成為研究的熱點(diǎn),它是一種重要的炎癥標(biāo)志物,是冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一,已被許多學(xué)者證實(shí)它可作為預(yù)測(cè)安康人群將來(lái)發(fā)生冠狀動(dòng)
5、脈事件的指標(biāo)13。而血管內(nèi)皮細(xì)胞vasularendthelialell的損傷是冠心病發(fā)病的機(jī)制之一,所以外周血內(nèi)皮細(xì)胞(irulatingendthelialell,e)數(shù)量的變化可以間接地反映血管內(nèi)皮的損傷程度4。本研究通過(guò)檢測(cè)冠心病患者的e數(shù)量和血清rp程度的變化以及二者的相關(guān)性,討論反響蛋白在冠心病發(fā)病中的作用和意義。1資料與方法1.1一般資料1研究組:45例冠心病患者符合世界衛(wèi)生組織的冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)5,男30例,女15例,年齡(60.85.8)歲;其中不穩(wěn)定型心絞痛uap23例,穩(wěn)定型心絞痛sap10例,陳舊性心肌堵塞12例;2其他心臟病組15例,男8例,女7例,年齡61.58.2歲
6、,其中風(fēng)心病患者7例,肥厚性心肌病2例,陣發(fā)性室上性心動(dòng)過(guò)速3例,縮窄性心包炎3例;3對(duì)照組:安康體檢者20例為正常對(duì)照組,無(wú)心血管疾病史,男10例,女10例,年齡(61.65.7)歲。三組在性別,年齡、血糖、血脂及肝腎功能無(wú)顯著差異。上述所有入選對(duì)象均排除嚴(yán)重的肝、腎功能不全及各種急慢性感染性疾病1.2方法1es的檢測(cè):采用perll密度離心法6,首先配制密度為1.050的perll液(體積濃度約35%):用perll工作液即100%的perll液,由原液與10倍濃度的磷酸鹽緩沖液pbs按91混合,搖勻而配成與pbs液或者生理鹽水以體積比3565混合搖勻,所得混合液體即為35%perll液,
7、備用。將每份采集來(lái)的靜脈血混勻后用等量生理鹽水在試管內(nèi)稀釋備用。根據(jù)標(biāo)本數(shù)量準(zhǔn)備相應(yīng)數(shù)量的試管,每支試管內(nèi)加35%perll液2l,將稀釋后的靜脈血沿管壁緩慢鋪于35%perll液上,可見明顯的液體分層。將試管置于程度離心機(jī)內(nèi)400g/in離心2025in取出后可見明顯分三層,上層為血漿,中層為perll液,下層為紅細(xì)胞。汲取上層和中層液1l于小試管內(nèi),將小試管以2100g/in離心2025in,棄上清,并于每個(gè)小試管加生理鹽水0.5l,震蕩混勻。取所得細(xì)胞懸液滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)池中,在lypus光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)9個(gè)大方格e數(shù),同一標(biāo)本計(jì)數(shù)4次,取均值;2es鑒定:取e懸液,離心后以沉淀涂片風(fēng)干,
8、后用冷乙醇固定40in,用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的特異標(biāo)記d34+鑒定;3rp檢測(cè)方法:所有患者采取空腹靜脈血3l,離心后取血清置于試管中,翻開bn100全自動(dòng)分析儀由德靈診斷產(chǎn)品消費(fèi),按電腦設(shè)定程序操作進(jìn)展分析。試劑由上海德靈公司提供,以免疫比濁法測(cè)定rp含量。2結(jié)果2.1外周血中e的根本形態(tài)光鏡下循環(huán)血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)多樣,胞體較大,胞核居細(xì)胞中央,稍偏位,符合內(nèi)皮細(xì)胞所共有形態(tài)特征。d34免疫組織化學(xué)法測(cè)定結(jié)果顯示內(nèi)皮細(xì)胞的特異標(biāo)記位于胞膜和胞漿,呈棕黃色,確認(rèn)檢測(cè)到的細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞。2.2三組e含量冠心病組e含量為8.62.8個(gè)/0.9l,其它心臟病組為3.01.5個(gè)/0.9l,正常
9、組為3.21.3個(gè)/0.9l,見表1。2.3三組rp程度冠心病組rp濃度為4.441.24g/l,其它心臟病組為3.161.65g/l,正常組為2.891.76g/l,見表1。2.4冠心病患者e數(shù)量與rp濃度相關(guān)性分析見表2。冠心病患者e數(shù)量與rp濃度呈正相關(guān)r=0.78,p0.05。表1三組患者外周圍血內(nèi)細(xì)胞e數(shù)、反響蛋白rp濃度比較3討論rp是一種重要的炎癥反響標(biāo)志物,其介導(dǎo)的補(bǔ)體激活在人類早期動(dòng)脈硬化中具有重要作用,是致動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素7,8。因此,它不僅是評(píng)價(jià)冠心病患者將來(lái)冠脈事件發(fā)生的重要預(yù)測(cè)指標(biāo),而且對(duì)外表安康的人群首發(fā)冠脈事件也有獨(dú)立的預(yù)報(bào)作用。本研究發(fā)現(xiàn)冠心病組患者的
10、rp濃度顯著高于其它心臟病組和對(duì)照組p0.05,這與國(guó)外學(xué)者ridker等2報(bào)道的結(jié)果一致,他們還認(rèn)為rp濃度隨冠心病的嚴(yán)重程度增高而增高。這些研究都說(shuō)明冠心病患者體內(nèi)存在著一定的炎癥反響,但其發(fā)生的原因還不明了,例如,與慢性炎癥、急性炎癥、結(jié)締組織病,微生物感染等的關(guān)系。目前認(rèn)為,rp致動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制主要是它不僅可以與內(nèi)皮細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞互相作用,并且與脂蛋白結(jié)合,激活補(bǔ)體系統(tǒng)產(chǎn)生大量終末攻擊復(fù)合物,而且可以活化炎癥細(xì)胞,并經(jīng)其受體活化途徑造成血管內(nèi)皮損傷,引起血管痙攣,脂代謝異常從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。目前研究認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的始動(dòng)環(huán)節(jié)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,而e是目前在活體內(nèi)唯一可以
11、特異而直接地反映血管損傷的標(biāo)志物,可以作為血管壁受損的信號(hào)。生理情況下,外周血中存在一定數(shù)量e,它是血管新陳代謝的結(jié)果,而e數(shù)量的明顯升高,是體內(nèi)血管損傷的一種病理反響過(guò)程4。因此,我們可以通過(guò)檢測(cè)e的數(shù)量來(lái)反響血管損傷程度,本研究發(fā)現(xiàn)冠心病組e的數(shù)量顯著高于其它兩組,進(jìn)一步證實(shí)冠心病患者體內(nèi)存在血管損傷9。關(guān)于血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的原因可能有很多,但目前主要認(rèn)為導(dǎo)致冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素是其主要原因。本研究還發(fā)現(xiàn)冠心病患者e數(shù)量和rp程度呈正相關(guān),這一點(diǎn)說(shuō)明他們之間可能存在著一種因果關(guān)系,有研究提出rp程度與內(nèi)皮功能缺陷有關(guān)10。最近的研究說(shuō)明,rp可以使血管內(nèi)皮細(xì)胞血漿纖溶酶原激活抑制物rna的
12、表達(dá)和其蛋白的合成增加,抑制一氧化氮合酶的表達(dá)和一氧化氮的釋放,增強(qiáng)凝血活性,損害血管內(nèi)皮功能11。rp的升高,還可以促進(jìn)血管內(nèi)皮釋放縮血管物質(zhì),增加平滑肌細(xì)胞的增生和內(nèi)皮細(xì)胞通透性,進(jìn)一步損害血管內(nèi)皮細(xì)胞。因此,臨床中親密觀察兩者的動(dòng)態(tài)變化不僅可以預(yù)測(cè)冠脈事件的發(fā)生,而且可以評(píng)價(jià)治療的效果。使用內(nèi)皮保護(hù)劑,抗炎癥反響的藥物可能成為臨床預(yù)防和治療冠心病新的方向。【參考文獻(xiàn)】1zivinja,hid.strketherapyj.sientaer,1991,2651:31-32.3李大鵬,公蘭蘭,蘇大宇,等.急性冠脈綜合征超敏反響蛋白含量的改變j.心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志,2021,17(3):233-
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