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1、霍亂弧菌彎曲菌不發(fā)酵G桿菌霍亂弧菌彎曲菌不發(fā)酵G桿菌霍 亂 弧 菌一、臨床意義是引起腸道烈性傳染病霍亂的病原體。有兩個(gè)主要生物型:古典生物型、ELTor生物型。經(jīng)消化道傳染,通過霍亂腸毒素致病霍 亂 弧 菌一、臨床意義小腸上皮細(xì)胞膜上激活腺苷酸環(huán)化酶細(xì)胞內(nèi)ATPCAMP(濃度升高)腸腺分泌大量液體和電介質(zhì)腔內(nèi)液體增多劇烈嘔吐,腹瀉,一“米泔樣”水、電介質(zhì)丟失休克、酸堿中毒霍亂腸毒素A1片段小腸上皮細(xì)胞膜上激活腺苷酸環(huán)化酶細(xì)胞內(nèi)ATPCAMP(濃度升二、微生物學(xué)特性形態(tài)與染色 革蘭染色陰性弧形或逗點(diǎn)狀周身菌毛 ,有莢膜,無芽胞單鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑直接染色鏡檢,可見排列如“魚群”狀;懸滴觀察,可見穿梭
2、運(yùn)動(dòng)二、微生物學(xué)特性形態(tài)與染色 霍亂弧菌彎曲菌不發(fā)酵G桿菌課件培養(yǎng)兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高耐堿不耐酸喜pH8.0-9.0堿性環(huán)境 pH8.4堿性蛋白胨水(選擇培養(yǎng)基) 生化反應(yīng)發(fā)酵甘露醇及蔗糖,緩慢發(fā)酵乳糖霍亂紅反應(yīng)陽(yáng)性,不同生物型生化反應(yīng)不同培養(yǎng)三、微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集米泔樣排泄物涂片鏡檢觀察“魚群樣”運(yùn)動(dòng)分離培養(yǎng)PH8.2-9.0堿性蛋白胨水三、微生物檢驗(yàn)生理濃度的膽鹽可抑制HP生長(zhǎng)初次分離必須采用(BCYE)腹瀉呈水樣便,偶爾血性,恢復(fù)較快,病程23天,通常為自限性最初因形態(tài)、分離培養(yǎng)方法與彎曲菌屬細(xì)菌相似,又僅從胃標(biāo)本中分離到,被稱作胃彎曲菌樣細(xì)菌為微需氧菌,在5%O2、10%CO2、85%
3、N2的環(huán)境中生長(zhǎng)良好。宜用新鮮配制的選擇培養(yǎng)基。懸滴觀察,可見穿梭運(yùn)動(dòng)核酸檢測(cè):是快速特異的方法,采用DNA探針及PCR擴(kuò)增rRNA的方法均可用于軍團(tuán)菌的快速診斷宜用新鮮配制的選擇培養(yǎng)基。用血清學(xué)方法檢測(cè)患者體內(nèi)的抗HP抗體(IgG、IgM和IgA)系最常用的無創(chuàng)傷性診斷HP感染的方法主要引起食物中毒和急性腹瀉生理濃度的膽鹽可抑制HP生長(zhǎng)醫(yī)院感染可高達(dá)23%菌體一端或兩端可有多根帶鞘鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑。將活檢粘膜組織在玻片上涂抹后,經(jīng)革蘭染色或單染色后鏡檢,如發(fā)現(xiàn)典型形態(tài)的HP即可診斷 霍亂紅反應(yīng)二、銅綠假單胞菌(P.幽門螺桿菌與萎縮性胃炎,胃、十二指腸潰瘍和胃癌等疾病相關(guān)還可引起傷口感染和菌血癥
4、對(duì)萘啶酸耐藥、頭孢噻吩敏感;分解色氨酸還原硝酸鹽靛基質(zhì)亞硝酸鹽亞硝酸靛基質(zhì)加數(shù)滴濃硫酸紅色反應(yīng)鑒別: 霍亂紅反應(yīng)生理濃度的膽鹽可抑制HP生長(zhǎng)分解色氨酸還原硝酸鹽靛基質(zhì)亞硝酸0.5%去氧膽酸鈉溶液霍亂弧菌混勻成濃懸液懸液由混變清,同時(shí)變粘稠用接種環(huán)挑取,有粘絲形成1分鐘 粘絲試驗(yàn)0.5%去氧膽酸鈉溶液霍亂弧菌混勻成濃懸液懸液由混變清,同時(shí)0/129敏感試驗(yàn): O1和非O1群敏感雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn):古典生物型陽(yáng)性,ELTor生物型陰性多粘菌素B敏感試驗(yàn):古典生物型敏感, ELTor生物型不敏感第、組噬細(xì)菌體敏感試驗(yàn):古典生物型可被第組裂解, ELTor生物型可被第組裂解抗生素敏感試驗(yàn)抗體檢測(cè)0/12
5、9敏感試驗(yàn): O1和非O1群敏感霍亂弧菌彎曲菌不發(fā)酵G桿菌課件(一)臨床意義具有嗜鹽性(halophilic)存在于近海的海水、海底的沉淀物、魚蝦類和貝殼及鹽漬加工的海產(chǎn)品中主要引起食物中毒和急性腹瀉是我國(guó)沿海地區(qū)及海島食物中毒的最常見病原菌胃腸炎臨床表現(xiàn)有:惡心、嘔吐、腹痛、低熱、寒戰(zhàn)等。腹瀉呈水樣便,偶爾血性,恢復(fù)較快,病程23天,通常為自限性還可引起傷口感染和菌血癥副溶血性弧菌(一)臨床意義具有嗜鹽性(halophilic)副溶血性弧菌(二)生物學(xué)特性1. 形態(tài)革蘭陰性桿菌,有鞭毛(極單毛),無莢膜,無芽胞2. 抗原結(jié)構(gòu) 耐熱的菌體(O)抗原,具有群特征性,副溶血性弧菌的O抗原有13種鞭
6、毛抗原,不耐熱,無型特異性(二)生物學(xué)特性1. 形態(tài)(三)微生物檢驗(yàn)(三)微生物檢驗(yàn)第十二章彎曲菌及螺桿菌第十二章彎曲菌及螺桿菌第一節(jié) 彎曲菌屬?gòu)澢鷮伲–ampylobacter)是一類呈逗點(diǎn)狀或S形的革蘭陰性菌,廣泛分布于動(dòng)物界其中有些可引起動(dòng)物與人類的腹瀉、胃腸炎和腸道外感染等疾病對(duì)人致病有空腸彎曲菌、大腸彎曲菌、胎兒彎曲菌等,其中空腸彎曲菌是腹瀉的常見病原菌第一節(jié) 彎曲菌屬?gòu)澢鷮伲–ampylobacter)是一生物學(xué)特性革蘭陰性,菌體彎曲呈逗點(diǎn)、弧形、S形、螺旋形或典型的海鷗展翅(gull wing)形。陳舊培養(yǎng)物可呈球形或長(zhǎng)絲狀。無芽胞。抗原成分有菌體(O)抗原、熱不穩(wěn)定抗原(H
7、L系統(tǒng))和鞭毛(H)抗原。最佳氣體環(huán)境為含5%氧氣、10%二氧化碳及85%氮?dú)獾挚沽Σ粡?qiáng),室溫可迅速死亡。對(duì)熱敏感,標(biāo)本在4冰箱可保存3周。生物學(xué)特性革蘭陰性,菌體彎曲呈逗點(diǎn)、弧形、S形、螺旋形或典型微生物檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn)第二節(jié) 螺桿菌屬螺桿菌屬(Helicobacter):細(xì)菌有20余種, 有9個(gè)種可從人體分離到能引起人類疾病菌種幽門螺桿菌(H. pylori)、 H. fennelliae和H. cinaedi。幽門螺桿菌與萎縮性胃炎,胃、十二指腸潰瘍和胃癌等疾病相關(guān)其他螺桿菌也可感染胃粘膜,但少見。本章主要敘述幽門螺桿菌。第二節(jié) 螺桿菌屬螺桿菌屬(Helicobacter):細(xì)菌諾貝爾生理
8、學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)1983年Marshall和Warren首先用微需氧技術(shù)從慢性胃炎、消化性潰瘍患者的胃粘膜分離出彎曲狀的細(xì)菌,并證明該細(xì)菌感染胃部會(huì)導(dǎo)致胃炎、胃潰瘍和十二指腸潰瘍,由此獲得了2005年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)1983年Marshall和Warren一、分類最初因形態(tài)、分離培養(yǎng)方法與彎曲菌屬細(xì)菌相似,又僅從胃標(biāo)本中分離到,被稱作胃彎曲菌樣細(xì)菌由于此菌在胃竇部多見,且形態(tài)、培養(yǎng)及某些生化特性與彎曲菌屬相似,DNA G+Gmol%也在彎曲菌屬范圍內(nèi),故命名為幽門彎曲菌(campylobacter pylori)1989年Goodwin等根據(jù)該菌的超微結(jié)構(gòu)、形態(tài)、菌體脂肪酸組
9、成、生長(zhǎng)特征和酶的活力、16S rRNA 序列等,提出該菌不應(yīng)歸于彎曲菌屬,后稱為幽門螺桿菌(Helicobacter pylori, HP)一、分類最初因形態(tài)、分離培養(yǎng)方法與彎曲菌屬細(xì)菌相似,又僅從胃胃竇為其定植的最佳部位pylori)、 H.在1%甘油和1%膽鹽中均不生長(zhǎng)。還可引起傷口感染和菌血癥將標(biāo)本的粘膜面在平板上反復(fù)涂擦,或?qū)?biāo)本研碎后用研磨棒蘸取適量勻漿接種電鏡下菌體的一端可伸出26條帶鞘鞭毛。革蘭陰性、無芽胞、專性需氧霍亂紅反應(yīng)陽(yáng)性,不同生物型生化反應(yīng)不同還可引起傷口感染和菌血癥抵抗力不強(qiáng),室溫可迅速死亡。螺桿菌屬(Helicobacter):細(xì)菌有20余種,用血清學(xué)方法檢測(cè)患者
10、體內(nèi)的抗HP抗體(IgG、IgM和IgA)系最常用的無創(chuàng)傷性診斷HP感染的方法第十二章彎曲菌及螺桿菌pylori)、 H.本章主要敘述幽門螺桿菌。流行病學(xué)資料表明胃癌發(fā)病率在一些HP感染率高的人群中較高核酸檢測(cè):是快速特異的方法,采用DNA探針及PCR擴(kuò)增rRNA的方法均可用于軍團(tuán)菌的快速診斷核酸檢測(cè):是快速特異的方法,采用DNA探針及PCR擴(kuò)增rRNA的方法均可用于軍團(tuán)菌的快速診斷aeruginosa)35天可形成12mm直徑的光澤菌落胃竇為其定植的最佳部位臨床意義HP感染非常普遍。該菌為一種高度適應(yīng)或只能生活于胃粘膜的細(xì)菌,菌體周圍微環(huán)境的pH值為7.0。胃竇為其定植的最佳部位HP感染與慢
11、性淺表性胃炎或萎縮性胃炎之間的病因關(guān)系已充分確立。流行病學(xué)資料表明胃癌發(fā)病率在一些HP感染率高的人群中較高胃竇為其定植的最佳部位臨床意義HP感染非常普遍。該菌為一種高生物學(xué)特性菌體細(xì)長(zhǎng)彎曲呈螺形、S形或海鷗形。菌體一端或兩端可有多根帶鞘鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑。菌體長(zhǎng)2.54.0m,寬0.51.0m。革蘭染色陰性,有動(dòng)力。在胃粘膜上皮細(xì)胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。生物學(xué)特性菌體細(xì)長(zhǎng)彎曲呈螺形、S形或海鷗形。固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),除典型形態(tài)外,有時(shí)可出現(xiàn)桿狀或圓球狀。電鏡下菌體的一端可伸出26條帶鞘鞭毛。鞭毛長(zhǎng)為菌體11.5倍,粗約30nm。鞭毛在運(yùn)動(dòng)中起推進(jìn)器作用,在定居過程中起錨住作用。固體培養(yǎng)基上生
12、長(zhǎng)時(shí),除典型形態(tài)外,有時(shí)可出現(xiàn)桿狀或圓球狀。為微需氧菌,在5%O2、10%CO2、85%N2的環(huán)境中生長(zhǎng)良好。最適生長(zhǎng)溫度為37。相對(duì)濕度在98%以上為宜營(yíng)養(yǎng)要求較高,一般需含血液或血清才能生長(zhǎng),常用的培養(yǎng)基有哥倫比亞血瓊脂、心腦浸液血瓊脂、布氏菌血培養(yǎng)基等為微需氧菌,在5%O2、10%CO2、85%N2的環(huán)境中生長(zhǎng)HP生長(zhǎng)緩慢,需經(jīng)4872h才長(zhǎng)出菌落圓形孤立的小菌落,無色半透明呈露滴狀,直徑約0.51mm,血平板上有輕度溶血。沿接種線擴(kuò)散生長(zhǎng),融合成片,扁平,無色半透明HP生化反應(yīng)不活躍,不能利用糖類;HP生長(zhǎng)緩慢,需經(jīng)4872h才長(zhǎng)出菌落具有大量高活力的胞外脲酶,產(chǎn)生的脲酶相當(dāng)于普通變形
13、桿菌的2070倍。此外還產(chǎn)生氧化酶、觸酶、堿性磷酸酶、-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和DNA酶等pH降至3.5以下時(shí)活力明顯減弱生理濃度的膽鹽可抑制HP生長(zhǎng)具有大量高活力的胞外脲酶,產(chǎn)生的脲酶相當(dāng)于普通變形桿菌的20四、微生物檢驗(yàn)四、微生物檢驗(yàn)HP感染與慢性淺表性胃炎或萎縮性胃炎之間的病因關(guān)系已充分確立。4堿性蛋白胨水(選擇培養(yǎng)基)pylori)、 H.在1%甘油和1%膽鹽中均不生長(zhǎng)。幽門螺桿菌與萎縮性胃炎,胃、十二指腸潰瘍和胃癌等疾病相關(guān)鞭毛在運(yùn)動(dòng)中起推進(jìn)器作用,在定居過程中起錨住作用。主要引起食物中毒和急性腹瀉最初因形態(tài)、分離培養(yǎng)方法與彎曲菌屬細(xì)菌相似,又僅從胃標(biāo)本中分離到,被稱作胃彎曲菌樣細(xì)菌受檢者術(shù)前
14、應(yīng)停服鉍劑或抗菌藥物一周螺桿菌屬(Helicobacter):細(xì)菌有20余種,宜用新鮮配制的選擇培養(yǎng)基??蓹z測(cè)出不能分離培養(yǎng)的HPaeruginosa)胃竇為其定植的最佳部位pylori)、 H.(六)13C或14C標(biāo)記尿素呼吸試驗(yàn)將標(biāo)本的粘膜面在平板上反復(fù)涂擦,或?qū)?biāo)本研碎后用研磨棒蘸取適量勻漿接種用血清學(xué)方法檢測(cè)患者體內(nèi)的抗HP抗體(IgG、IgM和IgA)系最常用的無創(chuàng)傷性診斷HP感染的方法初次分離必須采用(BCYE)核酸檢測(cè):是快速特異的方法,采用DNA探針及PCR擴(kuò)增rRNA的方法均可用于軍團(tuán)菌的快速診斷(二)微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集經(jīng)胃鏡用活檢鉗于近幽門部、胃竇部或病變鄰近處取材,最好采
15、取多位點(diǎn)樣品應(yīng)立即行床邊接種或放入20%葡萄糖運(yùn)送液0.5ml內(nèi),4中保存不超過5h受檢者術(shù)前應(yīng)停服鉍劑或抗菌藥物一周HP感染與慢性淺表性胃炎或萎縮性胃炎之間的病因關(guān)系已充分確立(三)標(biāo)本直接檢查 1. 直接顯微鏡檢查 涂片或懸滴觀察將活檢組織研碎,涂片或懸滴,置相差或暗視野顯微鏡下可見HP形態(tài)典型、運(yùn)動(dòng)活潑直接涂片染色鏡檢將活檢粘膜組織在玻片上涂抹后,經(jīng)革蘭染色或單染色后鏡檢,如發(fā)現(xiàn)典型形態(tài)的HP即可診斷(三)標(biāo)本直接檢查 1. 直接顯微鏡檢查 組織切片染色鏡檢組織塊經(jīng)福馬林固定、切片經(jīng)W-S銀染色、姬姆薩染色、HE染色和熒光染色等染色后鏡檢HP,以W-S銀染效果最好免疫組化用免疫組化法可檢
16、出胃粘膜組織切片中的完整HP及破碎的菌體或抗原成分間接免疫熒光法(IIF)組織切片染色鏡檢免疫組化間接免疫熒光法(IIF)2快速脲酶試驗(yàn) Christensen尿素培養(yǎng)基將小塊的活檢組織塊放入裝有培養(yǎng)基的瓶?jī)?nèi),如培養(yǎng)基由黃變?yōu)榧t色為陽(yáng)性。提示由該菌產(chǎn)生的高活性的脲酶已將尿素分解,結(jié)果常在幾分鐘至24小時(shí)內(nèi)得到2快速脲酶試驗(yàn) Christensen尿素培養(yǎng)基3核酸檢測(cè) 現(xiàn)有的方法是從克隆的HP染色體DNA的特異性片段中構(gòu)建引物從HP脲酶A基因序列中構(gòu)建引物用PCR擴(kuò)增結(jié)合限制性內(nèi)切酶多態(tài)性分析技術(shù)鑒別HP可檢測(cè)出不能分離培養(yǎng)的HP3核酸檢測(cè) 現(xiàn)有的方法是從克隆的HP染色體DNA的特異性片4糞便標(biāo)
17、本抗原檢測(cè) 可采用ELISA方法直接測(cè)定糞便標(biāo)本中的抗原。適用于不能進(jìn)行13C或14C標(biāo)記尿素呼吸試驗(yàn)或胃鏡檢查的患者4糞便標(biāo)本抗原檢測(cè) 可采用ELISA方法直接測(cè)定糞便標(biāo)本中懸滴觀察,可見穿梭運(yùn)動(dòng)發(fā)酵甘露醇及蔗糖,緩慢發(fā)酵乳糖還可引起傷口感染和菌血癥可檢測(cè)出不能分離培養(yǎng)的HP第十二章彎曲菌及螺桿菌間接免疫熒光法(IIF)將標(biāo)本的粘膜面在平板上反復(fù)涂擦,或?qū)?biāo)本研碎后用研磨棒蘸取適量勻漿接種核酸檢測(cè):是快速特異的方法,采用DNA探針及PCR擴(kuò)增rRNA的方法均可用于軍團(tuán)菌的快速診斷用于檢測(cè)患者血清中HP的菌體抗體或脲酶抗體間接免疫熒光法(IIF)霍亂弧菌彎曲菌不發(fā)酵G桿菌軍團(tuán)菌屬(人類的致病菌
18、)胃竇為其定植的最佳部位最初因形態(tài)、分離培養(yǎng)方法與彎曲菌屬細(xì)菌相似,又僅從胃標(biāo)本中分離到,被稱作胃彎曲菌樣細(xì)菌HP生長(zhǎng)緩慢,需經(jīng)4872h才長(zhǎng)出菌落抵抗力不強(qiáng),室溫可迅速死亡。可采用ELISA方法直接測(cè)定糞便標(biāo)本中的抗原。圓形孤立的小菌落,無色半透明呈露滴狀,直徑約0.沿接種線擴(kuò)散生長(zhǎng),融合成片,扁平,無色半透明將小塊的活檢組織塊放入裝有培養(yǎng)基的瓶?jī)?nèi),如培養(yǎng)基由黃變?yōu)榧t色為陽(yáng)性。(四)分離培養(yǎng)與鑒定 分離培養(yǎng)宜用新鮮配制的選擇培養(yǎng)基。將標(biāo)本的粘膜面在平板上反復(fù)涂擦,或?qū)?biāo)本研碎后用研磨棒蘸取適量勻漿接種將接種后的平板放入微需氧和98%以上濕度的環(huán)境培養(yǎng)懸滴觀察,可見穿梭運(yùn)動(dòng)(四)分離培養(yǎng)與鑒定
19、 分離培養(yǎng)鑒定主要根據(jù)菌落特征、形態(tài)和染色性;37生長(zhǎng);氧化酶和觸酶均陽(yáng)性、脲酶強(qiáng)陽(yáng)性;對(duì)萘啶酸耐藥、頭孢噻吩敏感;在1%甘油和1%膽鹽中均不生長(zhǎng)。鑒定(五)抗體檢測(cè)用血清學(xué)方法檢測(cè)患者體內(nèi)的抗HP抗體(IgG、IgM和IgA)系最常用的無創(chuàng)傷性診斷HP感染的方法目前已有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、膠乳凝集試驗(yàn)及ELISA等,而以ELISA應(yīng)用最為廣泛,現(xiàn)有商品化的ELISA、膠乳凝集試驗(yàn)試劑盒用于檢測(cè)患者血清中HP的菌體抗體或脲酶抗體(五)抗體檢測(cè)用血清學(xué)方法檢測(cè)患者體內(nèi)的抗HP抗體(IgG、(六)13C或14C標(biāo)記尿素呼吸試驗(yàn)基本方法是患者禁食一夜,進(jìn)食用13C或14C標(biāo)記的尿素,HP產(chǎn)生的脲酶分解尿素
20、釋放帶有同位素的CO2,因此可測(cè)定患者呼氣中釋放帶有同位素的CO2量,如CO2含量超過標(biāo)準(zhǔn),提示有HP存在。該方法敏感性與特異性均很好,只是需要特殊的同位素測(cè)定儀。(六)13C或14C標(biāo)記尿素呼吸試驗(yàn)基本方法是患者禁食一夜,第九章 非發(fā)酵革蘭陰性桿菌概念:一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌。這一章節(jié)中講述的細(xì)菌大多為條件致病菌,某些菌種是引起醫(yī)院感染的病原體,如:銅綠假單胞菌不動(dòng)桿菌屬產(chǎn)堿桿菌屬黃桿菌屬軍團(tuán)菌屬(人類的致病菌)第九章 非發(fā)酵革蘭陰性桿菌概念:一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧假單胞菌屬分布廣泛,人類不發(fā)酵菌感染中,假單胞菌占7080,主要為
21、銅綠假單胞菌,其他較為常見的菌種有嗜麥芽窄食單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等 第 一節(jié) 假單胞菌屬 (Pseudomonas) 第 一節(jié) 假單胞菌屬 (Pseudomonas)微生物特性革蘭陰性、無芽胞、專性需氧有端鞭毛或叢鞭毛生長(zhǎng)溫度范圍廣,最適生長(zhǎng)溫度為35產(chǎn)生各種水溶性色素:綠膿素、膿玉紅素、熒光素、膿褐素對(duì)理化因素耐受性較強(qiáng),對(duì)多種抗生素耐藥 微生物特性革蘭陰性、無芽胞、專性需氧二、銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)1.臨床意義:銅綠假單胞菌在自然界分布較為廣泛,因此很容易污染器械而造成感染機(jī)會(huì)二、銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)2.生物學(xué)特性革蘭陰性,長(zhǎng)短不一單鞭毛生長(zhǎng)溫度2
22、542氧化酶陽(yáng)性還原硝酸鹽、分解尿素、精氨酸酶陽(yáng)性2.生物學(xué)特性銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)血平板上毛玻璃樣,金屬光澤,生姜味可產(chǎn)生多種色素: 熒光素與綠膿素銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)血平板上毛玻璃樣,空氣乳膠微粒傳播(六)13C或14C標(biāo)記尿素呼吸試驗(yàn)0/129敏感試驗(yàn): O1和非O1群敏感涂片鏡檢觀察“魚群樣”運(yùn)動(dòng)二、銅綠假單胞菌(P.主要引起食物中毒和急性腹瀉二、銅綠假單胞菌(P.彎曲菌屬(Campylobacter)是一類呈逗點(diǎn)狀或S形的革蘭陰性菌,廣泛分布于動(dòng)物界pylori)、 H.最佳氣體環(huán)境為含5%氧氣、10%二氧化碳及85%氮?dú)馐确诬妶F(tuán)菌(Leg
23、ionella pneumophila)核酸檢測(cè):是快速特異的方法,采用DNA探針及PCR擴(kuò)增rRNA的方法均可用于軍團(tuán)菌的快速診斷懸滴觀察,可見穿梭運(yùn)動(dòng)鞭毛抗原,不耐熱,無型特異性將活檢粘膜組織在玻片上涂抹后,經(jīng)革蘭染色或單染色后鏡檢,如發(fā)現(xiàn)典型形態(tài)的HP即可診斷組織塊經(jīng)福馬林固定、切片經(jīng)W-S銀染色、姬姆薩染色、HE染色和熒光染色等染色后鏡檢HP,以W-S銀染效果最好二、銅綠假單胞菌(P.由于此菌在胃竇部多見,且形態(tài)、培養(yǎng)及某些生化特性與彎曲菌屬相似,DNA G+Gmol%也在彎曲菌屬范圍內(nèi),故命名為幽門彎曲菌(campylobacter pylori)HP生長(zhǎng)緩慢,需經(jīng)4872h才長(zhǎng)出菌
24、落將標(biāo)本的粘膜面在平板上反復(fù)涂擦,或?qū)?biāo)本研碎后用研磨棒蘸取適量勻漿接種銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)綠膿素空氣乳膠微粒傳播銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)1.肉浸湯2.胰化酪蛋白大豆肉湯37 培養(yǎng)1824h挑選菌落鑒定分型血清學(xué)噬菌體綠膿素初步鑒定菌落特征、色素、綠膿素:+涂片、革蘭染色、氧化酶:+最后鑒定生化反應(yīng)腦脊液、胸(腹)水、膿液、分泌物、痰、尿液、十二指腸引流液血液、環(huán)境用品分離培養(yǎng):直接涂片革蘭染色糞便血瓊脂平板SS、麥康凱分離培養(yǎng):37 如生長(zhǎng)銅綠假單胞菌檢驗(yàn)程序1.肉浸湯37 培養(yǎng)1824h分型初步鑒定最后鑒分類軍團(tuán)菌屬(Legionella) 屬于軍團(tuán)菌科(Legionellaceae)常見的與人類疾病有關(guān)的軍團(tuán)菌:嗜肺軍團(tuán)菌(Legionella pneumophila)米克戴德軍團(tuán)菌(L. micdadei)長(zhǎng)灘軍團(tuán)菌(L. longbeachae)杜莫夫軍團(tuán)菌(L. dumoffii)波茲曼軍團(tuán)菌(L. bozemanii) 第六節(jié) 軍團(tuán)菌屬分類軍團(tuán)菌屬(Legionella) 屬于軍團(tuán)菌科(Leg生物學(xué)特性革蘭陰性桿菌菌體呈線狀無芽胞,無莢膜,有端 鞭毛或側(cè)鞭毛嚴(yán)格需氧觸酶陽(yáng)性可液化明膠不分
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