大豆小分子肽抗氧化效應(yīng)的初步研究

1、大豆小分子肽抗氧化效應(yīng)的開端研究【摘要】目的通過動(dòng)物實(shí)行來開端探究大豆小分子肽分子量300700Da的抗氧化作用。要領(lǐng)接納昆明種小鼠，實(shí)行組小鼠分低、中、高3.0g/kgd、6.0g/kgd、9.0g/kgd三個(gè)劑量組灌胃大豆小分子肽25天，測(cè)定小鼠耐缺氧本領(lǐng)的影響。老年雄性istar大鼠20只，隨機(jī)分為老年比擬組10只，老年實(shí)行組10只，老年實(shí)行組灌服大豆小分子肽，按6.0g/kgd劑量，老年比擬組灌服同體積的生理鹽水。第60天末取樣測(cè)定血紅細(xì)胞和肝臟中丙二醛含量和超氧化物歧化酶(superxidediutase，SD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathineperxidase，GSH-P

2、x)活性。效果大豆小分子肽實(shí)行組中的高劑量組與比擬組生理鹽水組比擬小白鼠殞命只數(shù)，耐低壓缺氧本領(lǐng)加強(qiáng)，老年實(shí)行組與老年比擬組比力，血紅細(xì)胞SD酶活性升高(P0.05)，肝臟構(gòu)造SD酶活性有升高的趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。血紅細(xì)胞與肝臟構(gòu)造丙二醛含量有減低趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；GSH-Px酶活性升高(P0.05)。結(jié)論大豆小分子肽分子量300700Da具有必然的進(jìn)步老齡大鼠體內(nèi)抗氧化酶活性、按捺脂質(zhì)過氧化的作用?！娟P(guān)鍵詞】大豆小分子肽；抗氧化；耐缺氧本領(lǐng)；SD丙二醛；GSH-PxPreliinarystudynanti-xidativeapabilityfsybeanin

3、rpeptides【Abstrat】bjetiveTstudyanddisusstheanti-xidatineffetsandtheantiagingeffetfsybeaninrpeptides300-700DainldratsethdsSybeaninrpeptidesasadinisteredtieintreatedgrupfr25daysby3.0g/(kgd，6.0g/kgd，9.0g/kgdrespetively，andthehangesfthebearanxiaabilityereeasured.Tentyisterldratsererandlydividedint2grups

4、：ldntrlgrupandtestingldgrupith10ratsineahgrupTestingldgrupereperfusedithsybeaninrpeptides6.0g/(kgdfr60daysTheratsldntrlgruperefedithaterinthesaevlueAttheendfthe60thdaysbiheialindexereeasured:theativitiesfsuperxidedisutase(SD)andglutathineperxidase(GSHPx)andthenentratinfalndialdehyde(DA)inHbandliver.

5、Resultsparedithntrlgrup，thebearanxiaabilityftheadinisteredieintreatedgruperelnger，parediththseintheldntrlgrupTheativitiesfS0DinHberedereased(P0.05)，theativityfSDinliverhadainreasetendeny，butithutanysignifiantdifferene(P005)，andthenentratinsfDAinHbandliverhadalsainreasetendeny，butithutanysignifiantdi

6、fferene(P0.05).AsparediththseinntrlthetheativitiesfGSHpxhadainreasetendeny，(P0.05).nlusinSybeaninrpeptides300700Dahavethetendenyininreasingtheativityfantixidantenzyesanddereasinglipidperxidatin【Keyrds】sybean；inrpeptides；anti-xidatin；bearanxiaability；SD，GSH-Px；DA在20世紀(jì)4年代，一些西方學(xué)者用酶法改性卵白質(zhì)來增補(bǔ)極其缺乏的動(dòng)物卵白質(zhì)，其

7、時(shí)由于技能程度的限定，大豆肽的研究無多大希望。到6年代末，隨著生物技能的進(jìn)步和生命科學(xué)的生長(zhǎng)，生理活性肽的生理成效漸漸被人們創(chuàng)造，并受到越來越多的器重，尤其是一些活性肽的布局和生理成效漸漸明白，鞭策了活性肽的研究，也促進(jìn)了大豆肽的研究與開拓1。大豆多肽是大豆卵白質(zhì)的水解產(chǎn)物，能有用刺激甲狀腺激素排泄，促使膽固醇代謝天生膽汁酸。膽汁酸又被食品纖維所吸附，排擠體外從而攔阻對(duì)膽固醇的汲取，起到低落膽固醇作用。我國(guó)于20世紀(jì)80年代中后期開始了大豆多肽的研究。如今在大豆多肽的研究與開拓中存在的重要題目是大豆多肽與生理成效的干系2。大豆小分子肽的抗氧化以及抗朽邁作用僅見體外實(shí)行報(bào)道，而動(dòng)物體內(nèi)實(shí)行尚少見

8、報(bào)道。本實(shí)行是用我們實(shí)行室本身研制的大豆小分子肽，通過動(dòng)物實(shí)行模子來探究其抗氧化的作用，為更好地開拓大豆小分子肽提供開端的理論根據(jù)。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1質(zhì)料及處置懲罰大豆小分子肽的消費(fèi)工藝：脫脂大豆餅水提鰓豆乳粗胰酶預(yù)酶解酶解乳中性卵白酶水解酶解液分散大豆多肽脫色脫鹽超濾大豆小分子多肽液經(jīng)濃縮噴霧枯燥大豆小分子肽粉用去離子水配成透明溶液以備灌胃用。該工藝制成大豆小分子肽接納高效凝膠過濾色譜法HPGF測(cè)定：小分子多肽峰值分子量范疇為300700Da之間。1.2實(shí)行動(dòng)物實(shí)行動(dòng)物昆明種小白鼠由本學(xué)院實(shí)行動(dòng)物中央提供。istar種老齡明白鼠由沈陽(yáng)藥檢所提供。昆明種小白鼠80只，牝牡各半，體重182g，按

9、性別、體重隨機(jī)分為1個(gè)比擬組和3個(gè)試驗(yàn)組。分組后豢養(yǎng)不雅察3天，剔除不及格個(gè)別后灌胃，空缺比擬組灌胃適量生理鹽水，各實(shí)行組灌胃大豆小分子肽溶液，劑量別離為天天3.0g/kg、6.0g/kg、9.0g/kg。一連25天，實(shí)行期間，小鼠自由攝食及飲水3。取鼠齡為20個(gè)月，體重為381.7539.23g，istar老齡雄性明白鼠20只，按體重隨機(jī)分為1個(gè)比擬組和1個(gè)實(shí)行組。分組后豢養(yǎng)不雅察3天后灌胃，比擬組灌胃生理鹽水5l/d，試驗(yàn)組灌胃大豆小分子肽溶液6.0g/(kgd?；筐B(yǎng)60天，實(shí)行期間，大鼠自由攝食及飲水4。1.3低壓缺氧狀態(tài)的影響組小鼠一連給樣第25天后，于末次給樣后2h將小白鼠放入減壓至

10、負(fù)壓80Hg，一連時(shí)間為5in，記載小白鼠殞命只數(shù)5。1.4對(duì)明白鼠各組SD、GSH-Px活性和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(DA)含量的影響6大鼠一連給樣60天后，別離剪斷股動(dòng)脈，血用肝素抗凝，取肝臟用冰生理鹽水沖洗，濾紙吸干，準(zhǔn)確稱重，參加冰生理鹽水，玻璃勻漿器制成10的構(gòu)造勻漿，離心后汲取上清液備用。按微量鄰苯三酚快速測(cè)定紅細(xì)胞，肝臟的SD活性。而GSH-Px活性和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(DA)含量測(cè)定接納南京建成生物工程研究所消費(fèi)的試劑盒。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰全部數(shù)據(jù)輸入盤算機(jī)，用SPSS10.0Frinds統(tǒng)計(jì)軟件舉行單因素方差闡發(fā)，統(tǒng)計(jì)處置懲罰數(shù)據(jù)用xs表現(xiàn)。組間比力用t查驗(yàn)，明顯性程度為P

11、0.05。2效果2.1大豆小分子肽對(duì)低壓缺氧的影響大豆小分子肽實(shí)行組中的高劑量組與比擬組生理鹽水組比擬小白鼠殞命只數(shù)，耐低壓缺氧本領(lǐng)是否顯著加強(qiáng)，差異有明顯性P0.05。見表1。2.2大豆小分子肽對(duì)老年明白鼠SD活性的影響大豆小分子肽實(shí)行組與比擬組比擬，實(shí)行組的紅細(xì)胞HbSD活性明顯增長(zhǎng)(P0.05)，而肝臟的SD活性有增長(zhǎng)趨勢(shì)，但兩組沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。見表2。表1大豆小分子肽對(duì)低壓缺氧的影響表2大豆小分子肽對(duì)的紅細(xì)胞Hb肝臟的SD活性影響U/g2.3大豆小分子肽對(duì)老年明白鼠谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px活性的影響大豆小分子肽實(shí)行組與比擬組比擬，實(shí)行組的紅細(xì)胞HbGSH-Px活性明

12、顯增長(zhǎng)(P0.05)，而肝臟的GSH-Px活性有增長(zhǎng)趨勢(shì)，但兩組沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。見表3。表3大豆小分子肽對(duì)的紅細(xì)胞Hb肝臟的GSH-Px活性影響U/g2.4大豆小分子肽對(duì)老年明白鼠的血紅細(xì)胞與肝臟構(gòu)造中丙二醛含量的影響大豆小分子肽實(shí)行組與比擬組比擬，實(shí)行組的紅細(xì)胞Hb和肝臟中的DA含量雖有低落的趨勢(shì)，但兩組沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，見表4。表4大豆小分子肽對(duì)的紅細(xì)胞Hb肝臟的丙二醛含量影響l/L3討論如今一樣平常以為，機(jī)體的朽邁與自由基有很大的干系。機(jī)體在正常代謝歷程中可以產(chǎn)生多種活性氧，如超氧陰離子(.2-)、羥自由基(.H)、過氧化氫H22)等，此中.H與機(jī)體中的多不飽和

13、脂肪酸(LH)作用，可以產(chǎn)生LP。LP的終極代謝產(chǎn)物，如小分子的醛、酮等可以與生物大分子作用，使其失去生理成效，終極導(dǎo)致機(jī)體損傷。生物體內(nèi)的抗氧化物酶，如SD、GSH-Px可以掃除活性氧，對(duì)生物體起庇護(hù)作用，因此SD、GSHPx活性巨細(xì)，LP濃度的凹凸可反響出機(jī)體被氧化損傷的程度7。丙二醛(DA)是脂質(zhì)過氧化(脂褐素)LP代謝物，其含量凹凸可反響體內(nèi)自由基的反響程度，脂質(zhì)過氧化物可引起細(xì)胞代謝及成效停滯乃至殞命，故丙二醛(DA)的含量?？砷g接反響出機(jī)體受自由基打擊程度8。實(shí)行表白：大豆小分子肽可顯著增長(zhǎng)血紅細(xì)胞HbSD、GSHPx活性，而對(duì)肝構(gòu)造中二酶的活性卻不顯著，對(duì)DA含量的按捺作用亦不顯著。有關(guān)活性肽的抗氧化機(jī)制還不明晰，大概是通過增長(zhǎng)SD、GSH-Px的活性，加速體內(nèi)自由基的掃除，從而按捺肝臟內(nèi)過氧化脂質(zhì)的二級(jí)剖析產(chǎn)物DA的含量，有利于庇護(hù)細(xì)胞免受過氧化損傷，對(duì)自由基有關(guān)的疾病有必然的防治作用。但詳細(xì)是哪種物質(zhì)對(duì)抗氧化起重要作用，尚需進(jìn)一步的研究9。本實(shí)行大豆小分子肽只能增長(zhǎng)血紅細(xì)胞HbSD、GSHPx活性，而對(duì)肝構(gòu)造的活性卻不