支原體上課用課件

1、支原體 Mycoplasma1編輯版ppt支原體 概述定義缺乏細(xì)胞壁形態(tài)上呈高度多形性能通過(guò)除菌濾器在無(wú)生命培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)繁殖最小的原核細(xì)胞型微生物能形成有分支的長(zhǎng)絲，故稱(chēng)支原體 2編輯版ppt概述定義2編輯版ppt柔膜體綱支原體目肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原體，發(fā)酵支原體，梨支原體脲脲原體支原體分類(lèi)支原體科無(wú)膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬3編輯版ppt柔膜體綱支原體目肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài) 0.30.5 m 無(wú)細(xì)胞壁 高度多形性：球、桿、絲狀和分枝狀等 一般Giemsa染色較好，染為淡紫色 4編輯版ppt一、生物學(xué)性狀（一）形

2、態(tài)4編輯版ppt支原體集落5編輯版ppt支原體集落5編輯版ppt（二）結(jié)構(gòu) 內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類(lèi)，中層為脂類(lèi)（磷脂為主），凡作用于膽固醇的物質(zhì)，如皂素、二性霉素B等均能破壞細(xì)胞膜致其死亡。 特殊的頂端結(jié)構(gòu)： 粘附宿主上皮 細(xì)胞表面，與支原 體的致病有關(guān)。6編輯版ppt（二）結(jié)構(gòu)6編輯版ppt（三）培養(yǎng)特性 營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基： 10%20%人或動(dòng)物血清以提供膽固醇與其 它長(zhǎng)鏈脂肪酸，多數(shù)還需添加酵母浸液、組 織浸液、核酸提取物和輔酶。 pH：適宜7.68.0（7.0易死亡），但解脲脲 原體最適pH5.56.5 兼性厭氧： 大多寄生性支原體在37時(shí)在微氧環(huán)境（含 5%CO2和90%N2）中生長(zhǎng)最

3、佳。 繁殖方式多樣：二分裂繁殖外，還有分節(jié)、斷裂、 出芽或分枝等方式7編輯版ppt（三）培養(yǎng)特性7編輯版ppt固體培養(yǎng)基： 27天長(zhǎng)出直徑約10600 m的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見(jiàn)菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基： 清亮，用顏色變化單位（CCU）表示。需用放大鏡/低倍顯微鏡觀(guān)察8編輯版ppt固體培養(yǎng)基：需用放大鏡/低倍顯微鏡觀(guān)察8編輯版ppt支原體典型菌落9編輯版ppt支原體典型菌落9編輯版ppt支原體與細(xì)菌L型的異同點(diǎn) 不同點(diǎn) 相同點(diǎn) 鑒別點(diǎn) 支原體 細(xì)菌L型細(xì)胞壁缺失原因 在遺傳上與細(xì)菌無(wú)關(guān) 與原菌相關(guān)，可以回復(fù)細(xì)胞膜 含高濃度固醇 細(xì)胞膜不含固醇 培

4、養(yǎng)特性 需要膽固醇 大多需要高滲培養(yǎng) 菌落大小 生長(zhǎng)慢，菌落小 菌落稍大 ( 0.61.0) 液體培養(yǎng) 液體培養(yǎng)混濁度極低 有一定混濁度，可附壁缺乏細(xì)胞壁，形態(tài)多樣，能通過(guò)濾菌器。固體培養(yǎng)菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相似間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等 相同點(diǎn)10編輯版ppt支原體與細(xì)菌L型的異同點(diǎn) 不同點(diǎn) 相同點(diǎn) 鑒別點(diǎn) 支原體 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附細(xì)胞 致病性 肺炎支原體 + 紅細(xì)胞 肺炎、支氣管炎人型支原體 + 泌尿生殖道感染生殖器支原體 + 泌尿生殖道感染穿透支原體 + + 紅細(xì)胞 條件感染 CD4+T細(xì)胞 多見(jiàn)于艾滋病 巨噬細(xì)胞 溶脲脲原體 + 泌尿生殖道感染 流產(chǎn)及不孕

5、不育 生化反應(yīng)11編輯版ppt 支原體 葡萄糖 精氨酸 尿素 （四）抗原結(jié)構(gòu) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可檢測(cè)糖脂類(lèi)抗原 ELISA試驗(yàn)可檢測(cè)蛋白質(zhì)類(lèi)抗原 血清抗體可用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（growth inhibition test, GIT）和代謝抑制試驗(yàn) （metabolic inhibition test, MIT）以 鑒定12編輯版ppt（四）抗原結(jié)構(gòu)12編輯版ppt GIT是將吸有型特異性抗血清的濾紙片置于接種有支原體的固體培養(yǎng)基上， 經(jīng)孵育出現(xiàn)同型血清抑制該型支原體生長(zhǎng)現(xiàn) 象 MIT是將支原體接種在含有抗血清培養(yǎng) 基中，若抗體與支原體型一致，則抑制該支原體不能分解葡萄糖產(chǎn)酸。此兩種方法可將支原體分成若

6、干血清型。13編輯版ppt GIT是將吸有型特異性抗血清的濾紙片置于接種（五）抵抗力 對(duì)化學(xué)消毒劑敏感，對(duì)結(jié)晶紫、 醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力； 對(duì)影響細(xì)胞壁合成的抗生素如青 霉素類(lèi)天然耐受，但對(duì)干擾蛋白 質(zhì)合成的抗生素如強(qiáng)力霉素、交 沙霉素等敏感。14編輯版ppt（五）抵抗力14編輯版ppt二、致病性與免疫性（一）致病機(jī)制莢膜或微莢膜：抗吞噬作用毒性代謝產(chǎn)物：神經(jīng)毒素、磷脂酶C、核酸酶、過(guò)氧化氫和超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細(xì)胞或紅細(xì)胞的病理?yè)p傷超抗原：免疫調(diào)節(jié)其它：如穿透支原體粘附侵入CD4 T細(xì)胞引起損傷粘附素：粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮細(xì)胞15編輯版ppt二、致病性與免疫性（一）致病機(jī)

7、制15編輯版ppt（二）所致疾病存在廣泛，多不致病肺炎支原體引起原發(fā)性非典型性肺炎溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原體可引起泌尿生殖系統(tǒng)感染和不育癥穿透支原體和發(fā)酵支原體為艾滋病的輔助致病因素二、致病性與免疫性16編輯版ppt（二）所致疾病二、致病性與免疫性16編輯版ppt（三）免疫性 體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括 IgM、IgG和SIgA 細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4Th1 細(xì)胞分泌細(xì)胞因子 二、致病性與免疫性17編輯版ppt（三）免疫性二、致病性與免疫性17編輯版ppt肺炎支原體溶脲脲原體主要病原性支原體18編輯版ppt肺炎支原體溶脲脲原體主要病原性支原體18編輯版ppt0.20.3m，高度

8、多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀；初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中，一般10天左右長(zhǎng)出菌落；多次傳代后生長(zhǎng)加快，菌落呈“油煎蛋”狀；能發(fā)酵葡萄糖，不能利用精氨酸與尿素；對(duì)美藍(lán)、醋酸鉈、青霉素不敏感。肺炎支原體一、生物學(xué)性狀19編輯版ppt0.20.3m，高度多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀20編輯版ppt20編輯版ppt（一）致病性 1.主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏 末秋初，515歲青少年發(fā)病率最高。 2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎

9、癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起組織損傷。二、致病性與免疫性21編輯版ppt（一）致病性二、致病性與免疫性21編輯版ppt（二）所致疾病 原發(fā)性非典型性肺炎（primary atypical pneumonia），臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時(shí)并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。二、致病性與免疫性22編輯版ppt（二）所致疾病二、致病性與免疫性22編輯版ppt（三）免疫性 血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞； 呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對(duì)防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用； 出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作

10、 23編輯版ppt（三）免疫性23編輯版ppt（一）分離培養(yǎng) 痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基(四碘化鉑)，挑選可疑菌落，經(jīng)形態(tài)學(xué)、糖發(fā)酵、溶血性、血細(xì)胞吸附試驗(yàn)進(jìn)行初步鑒定，進(jìn)一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實(shí)驗(yàn)。三、微生物學(xué)檢查法24編輯版ppt（一）分離培養(yǎng)三、微生物學(xué)檢查法24編輯版ppt（二）血清學(xué)檢查 冷凝集試驗(yàn)： 即用病人血清與人O型血紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞混合，4過(guò)夜時(shí)可發(fā)生凝集，而在37時(shí)這種凝集又分散解離開(kāi)，但僅50左右的患者才出現(xiàn)陽(yáng)性。此反應(yīng)為非特異性。 快速診斷 ELISA：檢測(cè)P1和P30蛋白mAbs PCR：從痰標(biāo)本中檢測(cè)16S rRNA或 P1蛋白基因三、微生物

11、學(xué)檢查法25編輯版ppt（二）血清學(xué)檢查三、微生物學(xué)檢查法25編輯版ppt防治原則 大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物 喹諾酮類(lèi)藥物四、防治原則26編輯版ppt防治原則四、防治原則26編輯版ppt解（溶）脲脲原體形態(tài)：0.50.3 m，單個(gè)或成雙排列固體培養(yǎng)：48 h后長(zhǎng)出直徑1530 m “油煎蛋”狀菌落。 最適pH為5.56.5。生化反應(yīng)：分解尿素，不分解糖類(lèi)和精氨酸抵抗力：對(duì)1:2000醋酸鉈不敏感抗原：MB抗原是其主要膜抗原，將解脲脲原 體分為A、B兩大群，14個(gè)血清型一、生物學(xué)性狀27編輯版ppt解（溶）脲脲原體形態(tài)：0.50.3 m，單個(gè)或成雙排列一28編輯版ppt28編輯版ppt（一）致病機(jī)制 -粘

12、附于宿主細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷； -產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對(duì)宿主細(xì)胞有 急性毒性作用； -磷脂酶損傷宿主的細(xì)胞膜。二、致病性與免疫性29編輯版ppt（一）致病機(jī)制二、致病性與免疫性29編輯版ppt （二）所致疾病 非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎等泌尿生殖道疾病，還與自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和男性不孕有關(guān)。二、致病性與免疫性30編輯版ppt （二）所致疾病二、致病性與免疫性30編輯版ppt 病原體檢測(cè) 接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；再取0.2 ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于固體培養(yǎng)基，在5%CO2和90%N2的環(huán)境中經(jīng)37培養(yǎng)2448 h，用低倍鏡觀(guān)察菌落，進(jìn)一步鑒定需用特異抗

13、血清做GIT與MIT。三、微生物學(xué)檢查法31編輯版ppt 病原體檢測(cè) 三、微生物學(xué)檢查法31編輯版ppt核酸檢測(cè) PCR檢測(cè)： 檢測(cè)尿素酶基因、多帶抗原（MB-Ag）基因和16S rRNA基因。此法快速、特異，適宜于大批量標(biāo)本檢測(cè)。三、微生物學(xué)檢查法32編輯版ppt核酸檢測(cè) 三、微生物學(xué)檢查法32編輯版ppt加強(qiáng)宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。四環(huán)素類(lèi)、喹諾酮類(lèi)藥物治療，但有耐藥株產(chǎn)生。四、防治原則33編輯版ppt加強(qiáng)宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。四、防治原則33編輯人型支原體-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.27.4。固體培養(yǎng)基上形成200300 m的較大菌落，呈典型的

14、“油煎蛋”狀。-寄居于泌尿生殖道，通過(guò)性接觸傳播，可引起附睪炎、盆腔炎、產(chǎn)褥熱等。-微生物學(xué)檢測(cè)和防治原則同解脲脲原體。34編輯版ppt人型支原體-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.2塞麥爾維斯 產(chǎn)褥熱35編輯版ppt塞麥爾維斯 產(chǎn)褥熱35編輯版ppt細(xì)胞膜由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)（固醇）組成三層結(jié)構(gòu)36編輯版ppt細(xì)胞膜由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)（固醇）組成三層結(jié)構(gòu)36編輯版ppt37編輯版ppt37編輯版ppt生殖支原體-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀，能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基變酸，不分解尿素和精氨酸。-培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，須在無(wú)醋酸鉈SP-4培養(yǎng)基生長(zhǎng)但緩慢，菌落呈典型的“油煎蛋”狀。-能粘附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎。-較難培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢，不適宜于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)。38編輯版ppt生殖支原體-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀，能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基穿透支原體 1991年Lo首次從1例艾滋病患者尿中分離出一種新支原體