NGF與腦出血課件

1、NGF與腦出血 目 錄外源性NGF（蘇肽生）對(duì)大鼠腦出血的有效性研究華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 唐洲平 教授主要內(nèi)容研究背景與意義第一部分：腦出血模型的制作第二部分：NGF(蘇肽生)治療大鼠腦出血的研究研究背景及意義死亡率高達(dá)35%致殘率達(dá)95%NGF分子的四級(jí)結(jié)構(gòu)示意圖上圖為NGF的四級(jí)結(jié)構(gòu)，亞基（紅色），亞基（綠色）具有蛋白酶活性，亞基（藍(lán)色）具有生物活性。NGF（蘇肽生）的有效性研究目的：大鼠腦出血模型，實(shí)驗(yàn)組大鼠給予NGF處理，探討外源性NGF對(duì)大鼠腦出血的作用機(jī)制。方 法將總共48只SD大鼠隨機(jī)分成三組，即實(shí)驗(yàn)組（NGF組）24只、對(duì)照組12只和假手術(shù)組12只，每組大

2、鼠取三個(gè)時(shí)間點(diǎn)：第1、3以及7天。實(shí)驗(yàn)組大鼠造模后半小時(shí)通過(guò)顱內(nèi)血腫處注入NGF混合液（2l，300U）。對(duì)照組大鼠給予同樣體積無(wú)菌生理鹽水。假手術(shù)組打開頭皮只進(jìn)針，不給藥和鹽水。數(shù)據(jù)分析對(duì)各組大鼠行神經(jīng)功能缺損評(píng)分。將各組大鼠腦組織固定后脫水，制成石蠟切片，厚度約為4m，行免疫組化染色，檢測(cè)Nestin以及VEGF陽(yáng)性細(xì)胞，計(jì)數(shù)。將三組大鼠的神經(jīng)功能缺損評(píng)分、Nestin以及VEGF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié) 果表2：第1天和第3天三組評(píng)分幾乎相同，第7天實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)功能缺損評(píng)分要顯著低于對(duì)照組（P0.05），兩組與假手術(shù)組比較均有顯著差異。表2：三組不同時(shí)間點(diǎn)Zea Long評(píng)分免疫組化檢測(cè)

3、表4:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組有顯著性差異（P0.05）。實(shí)驗(yàn)組間第7天和第3天與第1天對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組有顯著性差異（P0.01）。只數(shù)第1天第3天第7天實(shí)驗(yàn)組65.51.77.31.99.42.0對(duì)照組34.31.45.62.16.11.3假手術(shù)組30.60.40.80.30.70.1表4：三組于第1、3、7天的VEGF單標(biāo)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)（均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差）免疫組化染色圖片圖A、B、C為三組術(shù)后第1天比較Nestin陽(yáng)性細(xì)胞無(wú)明顯差異（400）。ABC免疫組化染色圖片圖A、B、C為三組術(shù)后第7天比較，圖C(實(shí)驗(yàn)組)的Nestin陽(yáng)性細(xì)胞明顯增多（P0.01）（400）。ABC免

4、疫組化染色圖片圖A、B、C為三組術(shù)后第1天比較VEGF陽(yáng)性細(xì)胞無(wú)明顯差異（400）。ABC免疫組化染色圖片圖A、B、C為三組第3天比較，圖C（實(shí)驗(yàn)組）的VEGF陽(yáng)性細(xì)胞增多（P0.05）（400）。ABC免疫組化染色圖片圖A、B、C為三組第7天比較，圖C（實(shí)驗(yàn)組)的VEGF陽(yáng)性細(xì)胞明顯增多（P0.01）（400）。ABC結(jié) 果將三組大鼠腦切片行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，顯示Nestin與VEGF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組有顯著差異（p0.05）；實(shí)驗(yàn)組間第7天和第3天與第1天對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組有顯著性差異（P0.01）。討 論通過(guò)對(duì)大鼠腦出血模型實(shí)驗(yàn)研究，顯示外源性NGF可以促

5、進(jìn)內(nèi)源性NSCs激活、增殖、遷移以及分化；同時(shí)促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)VEGF，新生血管形成。最終使顱內(nèi)受損的神經(jīng)細(xì)胞得到有效的修復(fù)，促進(jìn)機(jī)體的神經(jīng)功能恢復(fù)。其機(jī)制為外源性NGF通過(guò)與 NSCs 上特異受體（如TrkA及p75）結(jié)合，激活細(xì)胞內(nèi)第二信使體系，產(chǎn)生級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促使細(xì)胞核表達(dá)細(xì)胞分化。腦出血臨床觀察報(bào)告天津市環(huán)湖醫(yī)院王新平 教授試驗(yàn)簡(jiǎn)介試驗(yàn)?zāi)康模?評(píng)價(jià)蘇肽生（注射用鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子）治療急性腦出血損傷后功能恢復(fù)的有效性及安全性。試驗(yàn)單位 天津市環(huán)湖醫(yī)院 天津第五中心醫(yī)院 天津泰達(dá)醫(yī)院排除標(biāo)準(zhǔn)對(duì)神經(jīng)生長(zhǎng)因子有過(guò)敏史者。收縮壓220mmHg或舒張壓130mmHg，伴有嚴(yán)重的心血管、肝、腎或造血系統(tǒng)

6、病變者可能因精神障礙或其他精神系統(tǒng)疾病影響完成試驗(yàn)者在3個(gè)月內(nèi)參加過(guò)臨床試驗(yàn)者妊娠或哺乳期婦女試驗(yàn)分組試驗(yàn)組：蘇肽生組，52例。對(duì)照組：胞二磷膽堿組，63例。兩組患者性別構(gòu)成、年齡、出血量、出血部位、神經(jīng)功能缺損程度（NIHSS評(píng)分）、伴發(fā)疾病、既往史等比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。研究方法給藥方法對(duì)照組：胞二磷膽堿0.5g,生理鹽水250ml,靜脈注射，每日1次，治療2周。試驗(yàn)組：蘇肽生，30g/次，肌肉注射，每日1次，治療2周。各組均不使用其他腦保護(hù)劑如VitE、大劑量VitC、腦復(fù)康、L-葉皂苷鈉等。研究結(jié)果*P0.05治療前后NIHSS評(píng)分比較治療前后ADL評(píng)分比較*P0.05治

7、療前后總有效率比較試驗(yàn)過(guò)程中未發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)事件對(duì)照組與治療組無(wú)顯著性差異表明蘇肽生治療腦出血方案安全性良好安全性評(píng)價(jià)討 論神經(jīng)元的再生過(guò)程受眾多因素的影響。其中內(nèi)環(huán)境中的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（如NGF）能夠激活來(lái)自中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同區(qū)域的神經(jīng)元前體細(xì)胞潛在的再生能力。但內(nèi)源性NGF在腦內(nèi)含量低微，及時(shí)補(bǔ)充外源性NGF，能有效促進(jìn)神經(jīng)元再生，從而促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)功能的修復(fù)。本試驗(yàn)僅僅是初步研究結(jié)果，樣本數(shù)偏?。?20例），需要進(jìn)一步大規(guī)模試驗(yàn)的驗(yàn)證。需要進(jìn)一步細(xì)化蘇肽生對(duì)于不同原因引起的腦出血的安全性和有效性。對(duì)于蘇肽生在腦出血、腦缺血、腦梗塞等其他中樞系統(tǒng)疾病的作用機(jī)理及臨床應(yīng)用需要進(jìn)一步探討。鼠神經(jīng)生

8、長(zhǎng)因子治療急性腦梗死的臨床對(duì)照研究浙江鄞州人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 范晨蕾實(shí)驗(yàn)方法患者入院后即開始常規(guī)治療，給予生命體征監(jiān)護(hù)、予以吸氧、抗生素預(yù)防肺部感染及其它并發(fā)癥。根據(jù)病情給予脫水降低顱內(nèi)壓，控制血糖、血壓、改善腦細(xì)胞代謝、抗凝及抗血小板凝集。隨時(shí)糾正水電解質(zhì)平衡及酸堿失調(diào)。治療組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上給予蘇肽生，肌肉注射，共維持。對(duì)照組則僅按常規(guī)治療，不應(yīng)用鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子。治療組好轉(zhuǎn)的例中，于周、周、周內(nèi)獲得臨床好轉(zhuǎn)的例數(shù)分別為20、39、1例，絕大多素患者在周內(nèi)均能獲得較好的臨床療效。病歷分享 蘇肽生治療丘腦、基底節(jié)腦梗塞1例病歷資料：患者，女性，67歲，因“左側(cè)肢體癱瘓1月余”入院?；颊哂谝辉虑?/p>

9、出現(xiàn)左側(cè)肢體癱瘓，無(wú)肢體麻木，意識(shí)狀態(tài)稍差，嗜睡，伴有吐詞不清，可聽懂別人說(shuō)話，惡心欲吐，眼裂呈進(jìn)行性減小及右側(cè)頭痛，無(wú)發(fā)熱等不適，視物及聽力尚可。病后以腦卒中收入我院，先后2次住院治療后好轉(zhuǎn)。為求進(jìn)一步診治來(lái)我院。病后患者精神差，小便同常，大便近日干結(jié)，體力下降。既往有腎性高血壓，規(guī)律用藥，控制可；腎積水；頸椎病；萎縮性胃炎。入院查體：BP:142/88mmHg R:22次/分 P:80次/分 T:36.8神志清楚，吐詞欠清，雙側(cè)瞳孔等大等圓，直徑約3mm，對(duì)光反射靈敏，雙側(cè)右側(cè)凝視麻痹，眼裂正常，睜眼稍無(wú)力，雙側(cè)鼻唇溝等稱，伸舌稍左偏；心肺腹（）；左側(cè)肢體肌力2級(jí)，肌張力增高，右側(cè)肌力可，

10、肌張力正常，腱反射等稱引出；感覺共濟(jì)運(yùn)動(dòng)不配合，左側(cè)Babinski征（）、Gordon征（），右側(cè)病理反射未引出；腦膜刺激征（）。門診資料：頭部MRI示右側(cè)顳額頂葉、丘腦及基底節(jié)急性腦梗塞；頸部血管彩超示左側(cè)椎動(dòng)脈偏窄并血流阻力指數(shù)增高，右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈血流速度降低并血流阻力指數(shù)增高；頭顱MRA示右側(cè)大腦中動(dòng)脈M1段閉塞；泌尿系B超示左腎局限性積水，右腎輕度積水；左下肢靜脈B超示左下肢靜脈栓塞，左下肢靜脈血栓性靜脈炎。診斷結(jié)果：1、腦梗塞 2、腎性高血壓 3、左下肢深靜脈血栓形成 4、腎積水治療方案：入院后完善相頭檢查、監(jiān)控血壓，治療上予以擴(kuò)管改善循環(huán)、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)、腦保護(hù)、康復(fù)治療及其他對(duì)癥支持治療。應(yīng)用奧拉西坦注射液、銀杏達(dá)莫注射液等藥物治療，后加用蘇肽生30ug肌注，每日一次，情況有所好轉(zhuǎn)。蘇肽生治療未