DB11-T157-3-2008虹鱒養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范第3部分-人工繁殖技術(shù)

1、ICS 65.150B 52備案號：23802-2009DB京市地方標(biāo)準(zhǔn)DB11/T 157.32008代替 DB11/T 157.32002虹鱒養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范 第 3 部分：人工繁殖技術(shù)Technical specifications for rainbow trout culture Part 3: Artificial propagation techniques2008-11-14 發(fā)布2009-03-01 實施北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 發(fā)布DB11/T 157.32008前言為保證虹鱒養(yǎng)殖環(huán)境、養(yǎng)殖過程、養(yǎng)殖產(chǎn)品符合國家無公害水產(chǎn)品安全要求，特制訂 DB11/T 157虹鱒養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范，本

2、標(biāo)準(zhǔn)分為九個部分：第 1 部分：親魚；第 2 部分：親魚培育技術(shù)；第 3 部分：人工繁殖技術(shù)；第 4 部分：魚苗培育技術(shù)；第 5 部分：成魚池塘養(yǎng)殖技術(shù)；第 6 部分：成魚網(wǎng)箱養(yǎng)殖技術(shù)；第 7 部分：防疫；第 8 部分：常見病診治與安全用藥；第 9 部分：全價配合顆粒飼料。本部分為 DB11/T 157 的第 3 部分。本部分代替并廢止 DB11/T 157.32002虹鱒魚養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范 第 3 部分：人工繁殖技術(shù)。本部分與 DB11/T 157.32002 相比主要變化如下：增加了術(shù)語和定義部分；增加采用溢流桶式孵化器進(jìn)行人工授精的技術(shù)要求；增加了單鹽等滲液配方；增加了微流水吸水膨脹與流水孵

3、化連續(xù)作業(yè)操作技術(shù)；增加了 4 細(xì)胞期受精率檢測技術(shù)；孵化稚魚管理增加了直流式出膜飼育槽；增加了孵化及稚魚飼育排出水溶解氧應(yīng)達(dá) 6.5 /L 以上的要求；增加了術(shù)語孵化稚魚；增加孵化最佳水溫要求；根據(jù)生產(chǎn)實際，調(diào)整孵化管理、發(fā)眼卵運(yùn)輸、孵化稚魚管理等技術(shù)內(nèi)容。本部分附錄 A、B 是規(guī)范性附錄，附錄 C 是資料性附錄。本部分由北京市懷柔區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本部分由北京市農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會養(yǎng)殖業(yè)分會歸口。本部分起草單位：北京順通虹鱒魚養(yǎng)殖中心。本部分主要起草人：沈希順、王昭明、黃劍鋒、楊瑪麗。IDB11/T 157.32008虹鱒養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范第 3 部分：人工繁殖技術(shù)范圍本部分規(guī)定了虹鱒養(yǎng)殖技

4、術(shù)的親魚選擇和鑒別、采精、采卵、人工授精、孵化、發(fā)眼卵運(yùn)輸、孵化稚魚的管理。本部分適用于虹鱒的人工繁殖。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過DB11/T 157的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。NY 5051 無公害食品 淡水養(yǎng)殖用水水質(zhì)DB11/T 157.1 虹鱒養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范 第1部分：親魚術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本部分。3.1敏感期 sensitive period成熟卵實施授精后1個小時期間

5、和第6d9d（水溫10），對振動很敏感，易引起死亡，此期間為胚胎發(fā)育敏感期。3.2發(fā)眼卵 eyed egg受精卵胚體眼泡視網(wǎng)膜上形成黑色素時，肉眼可觀察到黑色眼點，此后到稚魚孵出之前的卵，稱為發(fā)眼卵。3.3孵化稚魚 sac-fry(alevin)孵出的稚魚，孵出前已經(jīng)完成了仔魚發(fā)育，背鰭褶上已經(jīng)具備了標(biāo)志種的分類特征的鰭條原基，不攝食，依賴卵黃囊的營養(yǎng)進(jìn)行早期發(fā)育，稱為孵化稚魚。3.4孵化積溫 temperature-day-degree日均水溫與孵化天數(shù)之積為孵化積溫，以“d”表示，也稱發(fā)育積溫。親魚選擇和鑒別臨產(chǎn)親魚的選擇用作繁殖的親魚的形態(tài)特征應(yīng)符合DB11/T 157.1的規(guī)定。雌、雄

6、親魚鑒別雌魚口小，吻端部發(fā)圓。雄魚口大，吻尖。成熟度鑒別1DB11/T 157.32008性成熟雌魚，腹部膨大柔軟，生殖孔紅腫外突，上提尾柄時, 兩側(cè)卵巢下垂輪廓明顯，輕壓腹部有卵粒流出。性成熟雄魚腹部較硬，輕壓腹部有乳白色精液流出。繁殖期內(nèi)每隔7d進(jìn)行一次成熟度鑒別，對已成熟的雌魚應(yīng)及時采卵。采精每 1 萬粒卵需精液 10ml。要根據(jù)當(dāng)天的計劃采卵量確定采精量。為保證受精率，同一授精批次的卵所需精液應(yīng)采自 23 尾雄魚。采精前將雄魚體表水分擦凈，輕壓生殖孔前上方，擠出尿液、糞便后再將精液擠入干燥的容器中，置 14 條件下保存?zhèn)溆?。采過精液的雄魚,7d8d 后可再次采精。采卵采卵前擦凈雌魚體表

7、的水分，輕壓生殖孔前上方，擠出尿液和糞便。輕壓生殖孔前上方，將卵擠入孔徑 2.5mm 的采卵網(wǎng)盆中。對于個別雌魚，為了避免因其掙扎采出碎卵，可預(yù)先用 0.3ml/L 的乙二醇苯醚（C6H5OCH2CH2OH）水溶液麻醉 3min5min。人工授精用等滲液淋浴采卵網(wǎng)盆中的卵，洗除糞便、血液、體腔液等。然后將卵倒入干燥的授精盆。等滲液配方見附錄 A。按每 1 萬粒卵加 10ml 精液的量將事先備好的精液加入授精盆。也可將精液從雄魚體直接擠入授精盆。用手快速將精卵拌均勻。向授精盆內(nèi)加入相當(dāng)卵量 1.5 倍以上的清水，同時輕輕拌勻，2min3min 后將水倒出。再反復(fù)加入清水 23 次，洗除多余的精液

8、。精、卵接觸之前，兩者均不可遇水。從采卵、授精至加水應(yīng)控制在 2min3min 之內(nèi)完成。將授精后的卵在清水中靜置 60min，待卵吸水膨脹后裝入孵化器進(jìn)行流水孵化。采用溢流桶式孵化器的，可將授精后的卵直接倒入孵化桶，使卵在微流水環(huán)境下完成吸水膨脹，同時沖出多余的精液。一小時之內(nèi)注水量保持在 3L/min。適當(dāng)時機(jī)應(yīng)進(jìn)行受精率的計測及受精卵的計數(shù)，方法見附錄 B.2。孵化孵化設(shè)備宜使用溢流桶式孵化器（孵化桶），見附錄 C.1。孵化條件孵化桶應(yīng)放置在有遮光和防震條件的孵化室內(nèi)進(jìn)行流水孵化。孵化用水除符合 NY 5051 的規(guī)定外，水質(zhì)要澄清，注入水與溢出水溶氧量應(yīng)分別高于 8.5 mg/L和 6

9、.5mg/L。適宜水溫為 213。孵化最佳水溫為 713。孵化時間從授精至孵出，需孵化積溫 320d 左右，從授精至發(fā)眼的積溫數(shù)約為孵化積溫的一半。孵化管理溢流式孵化桶，每桶可孵化 5 萬粒卵，孵化開始至發(fā)眼期注水量要從 3L/min 逐漸增加到 5L/min。排出水溶解氧量應(yīng)達(dá) 6.5 /L 以上。2DB11/T 157.32008將亞甲基藍(lán)制成 0.005mg/L 水溶液，從注水口注入孵化桶內(nèi)，每周 2 次，每次持續(xù) 1h，可控制水霉菌的滋生。授精后 1h 之內(nèi)和受精后 24h 至發(fā)眼期，特別是授精后第 6d9d 之間（水溫 910）受精卵敏感期階段要防止卵震動。孵化積溫達(dá) 220d，進(jìn)入

10、發(fā)眼中期時，將發(fā)眼卵倒入揀卵槽內(nèi)揀除死卵，計數(shù)死卵數(shù)并計算發(fā)眼率（總卵數(shù)與死卵數(shù)之差占總卵數(shù)的百分率）。然后將發(fā)眼卵移入稚魚出膜孵化槽或進(jìn)行發(fā)眼卵運(yùn)輸。孵化期間及稚魚孵出后 2 周之內(nèi)，應(yīng)避免直射光照射。發(fā)眼卵運(yùn)輸運(yùn)卵箱與包裝運(yùn)卵箱采用泡沫塑料箱，箱底與四周放置潮濕的軟泡沫塑料。將 24 只總重 1 2 的塑料冰袋塞于箱內(nèi)四角。把卵分裝于多孔（孔徑 3mm）聚乙烯袋中，將卵袋放入箱內(nèi)，冰袋與卵袋間隔以潮濕泡沫塑料。卵袋上放一層潮濕泡沫塑料，加蓋封箱即可啟運(yùn)。運(yùn)卵注意事項最適運(yùn)卵時機(jī)是發(fā)眼中期（孵化積溫 220d280d）的卵，運(yùn)輸時間超過 4d 的，不宜運(yùn)輸發(fā)眼后期（孵化積溫 280d320d

11、）的卵。裝箱前參照附錄 B.1 計測卵數(shù)。運(yùn)途中要防止劇烈震動。箱內(nèi)溫度保持在 51，可安全運(yùn)輸 5 晝夜。當(dāng)運(yùn)輸時間長或氣溫高時，應(yīng)適時檢查箱內(nèi)冰塊融化和溫度情況并及時補(bǔ)充冰塊。運(yùn)抵卵移入出膜孵化槽時，要經(jīng)調(diào)溫使箱內(nèi)溫度與孵化槽水溫相近，防止溫差大于 3。孵化稚魚的管理采用反沖式平列槽或直流式出膜飼育槽進(jìn)行出膜孵化和孵化稚魚飼育。平列槽與出膜飼育槽構(gòu)造見附錄 C.2 與 C.3。將發(fā)眼卵放入平列槽的出膜孵化盤或直流式出膜飼育槽內(nèi)，加蓋遮光。每只孵化盤放卵(苗)8000 粒(尾),每萬粒（尾）注水量 5L/min6L/min。直流式出膜飼育槽每平方米放養(yǎng) 2 萬粒（尾），每萬粒（尾）注水量 5

12、L/min6L/min。排出水溶解氧應(yīng)達(dá) 6.5 /L 以上。及時清除死卵死苗，保持水流暢通。稚魚全部孵出后第 3d4d，將直流式出膜飼育槽內(nèi)的河卵石清除。待稚魚上浮后，在原槽內(nèi)進(jìn)行開食馴飼。使用平列槽的，待稚魚上浮后，即在孵化盤內(nèi)進(jìn)行開食馴飼。3DB11/T 157.32008附錄A（規(guī)范性附錄） 等滲液的配方三鹽等滲液將氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣 3 種鹽依次溶于水中，配比見附表 A.1。表 A.1三鹽等滲液配比成分配比氯化鈉（Nacl）90.4g氯化鉀（Kcl）2.4g氯化鈣（Cacl2H2O）2.6g水（H2O）10.0L單鹽等滲液將食用鹽溶于水中，配比見附表 A.2。表 A.2單鹽等滲液

13、配比成分配比食用鹽（氯化鈉Nacl）95 g98g水10.0L4DB11/T 157.32008附錄B（規(guī)范性附錄）虹鱒魚卵計數(shù)和受精率計算虹鱒魚卵計數(shù)將吸水膨脹后的卵或發(fā)眼卵逐個排列在受精卵計數(shù)尺上，先測出 20cm 長度的卵粒數(shù)，查表 B.1，得平均卵徑和每升容積的卵粒數(shù)，再乘以卵的實際升數(shù)，即得實際的卵數(shù)。表 B.1虹鱒魚卵計數(shù)對照表20cm卵數(shù)(粒)283032343638404244464850平均卵徑mm7. 146. 666. 255. 885. 555. 265. 004. 764. 544. 344. 164. 0卵數(shù)(粒/L)320040004900580069008000

14、94001080012500144001640018400受精率計算鑒別液的配制鑒別液a和鑒別液b的配方如下表B.2所示。表B.2 鑒別液a、b的配方鑒別液a的配方鑒別液b的配方福爾馬林5ml福爾馬林3ml甘油6ml酒精6ml冰 乙 酸4ml冰 醋 酸1ml蒸 鎦 水85ml胚體計算法孵化積溫達(dá)100d時，取一定數(shù)量的卵放入鑒別液a中，經(jīng)5min后，可看到白色線條狀胚體的卵即為受精卵。根據(jù)受精卵所占的比例（二次觀察平均值），計算出受精率。四細(xì)胞期計算法日均水溫10條件下，授精后10h12h，將20粒卵浸入鑒別液b中，10min后置實體顯微鏡（40倍） 下觀察。在卵的一端，4個細(xì)胞大小、形狀相同

15、的為受精卵。細(xì)胞大小相差很大、呈不規(guī)則排列的，分辨不出細(xì)胞個數(shù)的是未受精卵。根據(jù)二次觀測的受精卵數(shù)平均值計算受精率。5DB11/T 157.32008附錄C（資料性附錄） 孵化設(shè)備示意圖溢流桶式孵化器示意圖1、供水管2、集水漏斗3、注水管4、孵化桶蓋5、孵化桶6、孵化網(wǎng)盆桶高 29.0cm，內(nèi)口徑 30.0cm。穿過桶蓋正中安裝一注水管，管長 34.7cm，孵化網(wǎng)盆孔徑 4 mm1.2mm，孵化網(wǎng)盆內(nèi)口徑 24.9cm，盆高 11.0cm，盆口沿卡在孵化桶內(nèi)壁上。盆底距桶底 6.5cm，距桶口沿 22.0cm， 盆底至桶口沿之間是裝受精卵的空間。孵化用水通過集水漏斗注入注水管，從上至下通過注水管下端的三角口注入桶底，又從下至上通過孵化網(wǎng)盆內(nèi)的受精卵后從桶口周邊溢出。反沖式稚魚出膜孵化及開食馴飼槽（平列槽）示意圖6DB11/T 157.320081、平列槽2、孵化盤3、孔徑為 2 毫米的過水篩4、排水管此槽為玻璃鋼槽。槽口長 300cm，寬 42cm。槽底長 298 cm，寬 40 cm。槽高 17cm。槽后部有一直徑 5cm 可