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食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測定
農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心(呼和浩特)內(nèi)容概述定義測定方法及原理凱氏定氮法各種測定方法優(yōu)缺點(diǎn)其他蛋白質(zhì)的測定方法蛋白質(zhì)定義蛋白質(zhì)組成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸,氨基酸通過脫水縮合成肽鏈,由一條或多條肽鏈組成的生物大分子稱為蛋白質(zhì),也叫真蛋白或純蛋白。粗蛋白粗蛋白不僅包括蛋白質(zhì)這一物質(zhì),還包括含氮的全部物質(zhì),是一種既包括真蛋白又包括非蛋白的含氮化合物,后者又可能包括游離氨基酸、尿素、硝酸鹽和氨等。全蛋白蛋白質(zhì)中如果包含了所有的必需氨基酸,這種蛋白質(zhì)便叫作全蛋白。
檢測原理檢測原理食品中蛋白質(zhì)的測定-凱氏定氮法樣品的處理稱樣:固體樣品0.2-2g、半固體樣品2-5g或液體樣品10-25g,精確至0.0001g.消化:加入催化劑和20mL(一般10mL也可以)硫酸,進(jìn)行消化,直至澄清透明。蒸餾后滴定:蒸餾時堿要過量,儀器密封性好,滴定用0.05mol/L硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。結(jié)果計(jì)算及精密度。牛奶中蛋白質(zhì)的測定-改進(jìn)凱氏定氮法用過氧化氫和硫酸消化測定牛奶中蛋白質(zhì)
消化過程用30%的過氧化氫代替凱氏催化劑進(jìn)行蛋白質(zhì)測定是非常快速和環(huán)保(無重金屬)的方法。測定:稱量約8g均質(zhì)樣品倒入樣品管中(可稱取5g,精確到0.0001g),加入20mL(一般10mL也可以)硫酸,凱氏消化。在凱氏消化完全回流后拿下冷卻,在漏斗中加入10ml左右的H2O2,然后繼續(xù)消化,反復(fù)此步驟,直到消化完全(此法用奶粉質(zhì)控樣做過比對).凱氏定氮法操作注意事項(xiàng)4、消化酸量小,樣品消化不完全,測定結(jié)果偏低;酸量大,在上機(jī)過程中與堿中和后酸過量,游離胺不能被蒸餾出來5、回收率的測定單純的采用硫酸銨/磷酸二氫銨質(zhì)控—簡單快速,不需要消化,但只能保證儀器測定的部分,而不能對前處理的消化過程進(jìn)行質(zhì)量體系保證。采用標(biāo)準(zhǔn)麥粉/標(biāo)準(zhǔn)乳粉質(zhì)控—需要消化進(jìn)行測定,對前處理和儀器測定部分全程進(jìn)行質(zhì)量保證。6、硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定。
食品中蛋白質(zhì)的測定-分光光度法優(yōu)點(diǎn):適用于各種食品中蛋白質(zhì)的測定(總氮的量);靈敏度高(0.1mg氮);缺點(diǎn):無法分辨非蛋白氮(NPN)消化過程達(dá)數(shù)小時產(chǎn)生大量有害氣體危害操作員健康干擾物較多?糧油檢驗(yàn)植物油料粗蛋白質(zhì)的測定?GB\T14489.2-2008檢測同食品蛋白,消化時加硫酸8ml,蒸餾時加氫氧化鈉80ml,不用轉(zhuǎn)移定容,直接蒸餾,滴定用0.1mol/L硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。也可以轉(zhuǎn)移定容再吸取25ml溶液進(jìn)行蒸餾滴定。?水果蔬菜產(chǎn)品粗蛋白質(zhì)的測定方法?GB\T8856-1988檢測同食品蛋白,消化時加硫酸15ml,蒸餾時加氫氧化鈉100ml,不用轉(zhuǎn)移定容,直接蒸餾,滴定用0.05mol/L硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。?谷物和豆類氮含量測定和粗蛋白質(zhì)含量計(jì)算凱氏法?
GB\T5511-20
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