大鼠白介素1βIL1β酶聯(lián)免疫分析

大白素β(IL-1β酶免分試盒用明本試劑盒僅供研究使用。檢范：ng/L-40ng/L使目：

96T本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白介素β(IL-1β)含量。實(shí)原本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠白介素β(IL-1β)水平用純化的大鼠白介素β(IL-1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素1β(IL-1β)再與標(biāo)的白介素ββ抗體結(jié)合，形成抗-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB色在酶催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素β(IL-1)正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠白介素ββ)濃度。試盒成

倍縮洗滌液酶標(biāo)試劑酶標(biāo)包被板樣品稀釋液顯色劑A液顯色劑液

20ml×1瓶6ml×1瓶孔×8條6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×瓶

終止液標(biāo)準(zhǔn)品（）標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液說(shuō)明書(shū)封板膜密封袋

×1瓶0.5ml1瓶1.5ml1瓶標(biāo)要．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑辣根過(guò)氧化物酶的HRP活性。操步標(biāo)品的稀釋試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支戶(hù)按下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。ng/Lng/Lng/Lng/L2.5ng/L

標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品

μl的倍準(zhǔn)品加150l標(biāo)品稀釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液

加樣分設(shè)空白（白對(duì)照不加樣品及酶標(biāo)試劑其余各步操作相同準(zhǔn)、待測(cè)樣品孔標(biāo)被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣μl樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測(cè)樣品10l樣品最終稀釋度為倍樣樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

溫：用封板膜封板后置℃溫育3鐘。配：將倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍釋后備用洗：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌，靜置30后棄去，如此重復(fù)次，拍干。加：每孔加入酶標(biāo)試劑μl，空白孔除外。溫：操作同3。洗：操作同5。顯：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，℃避光顯色15分.10.終：孔加終止液μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色11.測(cè)：空白空調(diào)零450nm長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度OD值測(cè)應(yīng)在加終止液后15分以?xún)?nèi)進(jìn)行。操程總：計(jì)以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品OD值標(biāo)準(zhǔn)曲線查相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與O值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式樣的OD值入方程式算出樣品濃度乘稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注事

．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡分后方可使用，酶包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)最好控制在鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。．請(qǐng)次測(cè)定的同做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣D大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)倍后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)（n．封膜只限一次使用，以避免交叉污染。．底物請(qǐng)避光保存。．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為