腦脊液常規(guī)操作規(guī)程

關(guān)于腦脊液常規(guī)操作規(guī)程第1頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六常規(guī)檢測內(nèi)容包括：一般性狀的檢查、潘迪氏試驗、白細(xì)胞計數(shù)與分類、革蘭氏染色、抗酸染色、墨汁負(fù)染色。第2頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六一般性狀檢查主要觀察顏色（無色、白色、紅色、黃色、綠色、黑色等），透明度（透明、微渾、渾濁、膿樣等），凝塊（無、有或薄膜形成、膠凍狀）。第3頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六1、紅色：

如標(biāo)本為均勻紅色血性腦脊液，為區(qū)別蛛網(wǎng)膜下腔出血或穿刺性損傷，應(yīng)：

(1)將血性腦脊液試管離心5min(1500r／min)，如上層液體呈淡紅色或黃色，隱血試驗陽性，多為蛛網(wǎng)膜下腔出血，呈黃色說明出血的時間已超過4h。如上層液體澄清無色，紅細(xì)胞均沉管底，多為穿刺損傷所致的新鮮出血。

(2)紅細(xì)胞在滲透壓較血漿高的腦脊液中5min后，即可出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象，因此紅細(xì)胞皺縮現(xiàn)象不能用以鑒別陳舊性或新鮮出血。

常見顏色變化及臨床意義第4頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六2、黃色：除陳舊性出血外，在腦脊髓腫瘤所致腦脊液滯留時，也可呈黃色。黃疸患者的腦脊液也可呈黃色。但前者呈黃色透明的膠凍狀。3、膿樣：由于白(膿)細(xì)胞增多，可見于各種化膿性細(xì)菌引起的腦膜炎，應(yīng)立即直接涂片進(jìn)行革蘭染色檢查細(xì)菌。4、綠色：可見于綠膿桿菌、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌引起的腦膜炎。5、褐或黑色：見于侵犯腦膜的中樞神經(jīng)系統(tǒng)黑色素肉瘤。第5頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六蛋白定性試驗(潘迪氏法)實驗原理：腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合，可形成不溶性蛋白鹽而下沉，產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。所需試劑：5%的苯酚溶液：取純苯酚25ml，加蒸餾水至500ml，用力振搖，置37℃溫箱內(nèi)1～2天，待完全溶解后，置棕色瓶內(nèi)保存。第6頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六試驗方法：取潘（迪）氏試劑2～3ml于小試管內(nèi)，用毛細(xì)滴管滴入腦脊液1～2滴，襯以黑背景，立即觀察結(jié)果。結(jié)果判斷：陰性：清晰透明，不顯霧狀；極弱陽性（±）：微呈白霧狀，在黑色背景下才能看到；弱陽性（+）：灰白色云霧狀；陽性（2+）：白色渾濁；強陽性（3+）：白色濃絮狀沉淀；最強陽性（4+）：白色凝塊。第7頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六白細(xì)胞總數(shù)非血性標(biāo)本：于小試管內(nèi)滴入1%冰醋酸1-2滴，轉(zhuǎn)動試管，使壁內(nèi)沾有冰醋酸后傾去，滴入標(biāo)本3-4滴，數(shù)分鐘后充入計數(shù)池計數(shù)，計數(shù)10個大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。白細(xì)胞數(shù)/L=10個大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)×106。如白細(xì)胞較多，可計數(shù)一大格內(nèi)的細(xì)胞×10×106。血性標(biāo)本用1%的冰醋酸稀釋后計數(shù)，并用以下公式校正：每升中白細(xì)胞數(shù)=每升中白細(xì)胞末校正數(shù)-每升中紅細(xì)胞數(shù)×每升血液中白細(xì)胞數(shù)/每升血液中紅細(xì)胞數(shù)。（EDTA-K2抗凝？）（上機？）第8頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六成人腦脊液內(nèi)無紅細(xì)胞，白細(xì)胞極少，其參考范圍：成人：(0-8)×106/L；兒童為（0-15）×106/L，新生兒為（0-30）×106/L。如白細(xì)胞達(dá)（10-50）×106/L為輕度增加，（50-100）×106/L為中度增加，200×106/L以上顯著增加。如超過300×106/L時外觀可變?yōu)闇啙?。?頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六白細(xì)胞分類1、直接分類法：白細(xì)胞計數(shù)后，將低倍鏡換為高倍鏡，直接在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計數(shù)單個核細(xì)胞(包括淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞)和多核細(xì)胞，應(yīng)數(shù)100個白細(xì)胞，并以百分率表示。若白細(xì)胞少于100個，應(yīng)直接寫出單核、多核細(xì)胞的具體數(shù)字。2、染色分類法：如直接分類不易區(qū)分細(xì)胞時，可將腦脊液離心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清l滴，推片制成均勻薄膜，置室溫或37℃溫箱內(nèi)待干，進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分類。如見有不能分類的細(xì)胞，應(yīng)另行描述報告，如腦膜白血病或腫瘤時。第10頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六正常腦脊液中白細(xì)胞主要為單個核細(xì)胞，多為淋巴細(xì)胞及大單核細(xì)胞，兩者之比約為7：3，偶見內(nèi)皮細(xì)胞：軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細(xì)胞、室管膜細(xì)胞、脈絡(luò)膜細(xì)胞等。

正常腦脊液單個核細(xì)胞：約95%，多型核細(xì)胞：約5%。第11頁，共13頁，2022年，5月20日，2點11分，星期六紅細(xì)胞總數(shù)1、對澄清的腦脊液可混勻后用滴管直接滴入計數(shù)池，計數(shù)10個大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)，其總和即為每μl的細(xì)胞數(shù)。2、渾濁或帶血的腦脊液可用血紅蛋白吸管吸取混勻的腦脊液20μl，加入含紅細(xì)胞稀釋液0.38m1的小試管內(nèi)，混勻后滴入計