異養(yǎng)菌測定推選優(yōu)秀ppt

異養(yǎng)菌測定(cèdìng)第一頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)2培養(yǎng)基的配制方法一牛肉膏3g瓊酯15—20g蛋白胨10g氯化鈉5g蒸餾水1000ml方法二如有配好的培養(yǎng)基（成分與方法一相同），取30g培養(yǎng)基于1000ml去離子水中。制備：將上述培養(yǎng)基加熱溶解(róngjiě)（溶解(róngjiě)后如有沉淀，趁熱用四層紗布脫脂棉過濾）趁熱用1mol/L的NaOH溶液調PH值至7.5左右，分裝到三角瓶中，裝液量一般不要超過三角瓶的2/3，依次用脫脂棉、報紙將三角瓶口扎好，于121℃、0.1mPa滅菌20min。

第二頁，共27頁。蓋上上蓋，做水平旋轉以使樣品和培養(yǎng)基充分(chōngfèn)混合。將上述培養(yǎng)基加熱溶解(róngjiě)（溶解(róngjiě)后如有沉淀，趁熱用四層紗布脫脂棉過濾）趁熱用1mol/L的NaOH溶液調PH值至7.將上述培養(yǎng)基加熱溶解(róngjiě)（溶解(róngjiě)后如有沉淀，趁熱用四層紗布脫脂棉過濾）趁熱用1mol/L的NaOH溶液調PH值至7.9/29/20212011/5/27關閉排氣閥后，繼續(xù)加熱，這時壓力表指針開始上升。加水，取出裝料桶，往鍋內加水，加至與擱架相同的位置即可。務必待壓力降至零，再打開鍋蓋，否則高壓鍋內壓力突然降低，會導致培養(yǎng)基或其他液體發(fā)生復沸騰。截一條5cm左右的報紙條(zhǐtiáo)，將其一端折進約3cm寬使成雙層，讓移液管的尖端包進雙層紙內（移液管與紙條(zhǐtiáo)的夾角成30°為宜），然后選擇移液管，使紙條(zhǐtiáo)成螺旋狀地包裹在移液管外面，最后將多余的紙條(zhǐtiáo)打個結，以防散開。裝料，裝入要滅菌的物品，注意(zhùyì)瓶塞不要緊貼桶壁。關閉排氣閥后，繼續(xù)加熱，這時壓力表指針開始上升。異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)第二十五頁，共27頁?，F在移液管上端開口約0.異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)9/29/20212011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)3高溫滅菌本實驗要在無菌條件下進行，所以除去樣品，我們所用到的器皿和試劑，包括(bāokuò)三角瓶、培養(yǎng)皿、移液管、試管、滴管、培養(yǎng)基、生理鹽水等都要預先包裝并滅菌后使用。滅菌方法有：干熱滅菌、加壓蒸汽滅菌、氣體滅菌、間歇滅菌、過濾滅菌、紫外燈滅菌等，我們現在用的是加壓蒸汽滅菌和紫外燈滅菌相結合。第三頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)4滅菌(mièjūn)原理第四頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)5手提式滅菌(mièjūn)鍋的結構第五頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)6滅菌(mièjūn)鍋的使用方法加水，取出裝料桶，往鍋內加水，加至與擱架相同的位置即可。裝料，裝入要滅菌的物品，注意(zhùyì)瓶塞不要緊貼桶壁。加蓋，將蓋上的金屬軟管插入裝料桶的排氣槽中，擺正鍋蓋，使螺口對齊，采用對角螺絲同時擰的方式擰緊螺絲打開排氣閥。排氣，打開加熱電源，待水沸騰后，蒸汽和空氣一起排出從排氣孔排出，待空氣排凈后關閉排氣閥。關閉排氣閥后，繼續(xù)加熱，這時壓力表指針開始上升。升壓，關閉排氣閥后，壓力開始上升。保壓，當壓力表到0.1Mpa時，開始計時，20min后關閉電源，使壓力自然降至零。第六頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)7注意事項使用滅菌鍋時，嚴格按照操作程序進行(jìnxíng)，以免發(fā)生事故。務必待壓力降至零，再打開鍋蓋，否則高壓鍋內壓力突然降低，會導致培養(yǎng)基或其他液體發(fā)生復沸騰。第七頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)8滅菌(mièjūn)前玻璃器皿的包裝1.移液管的包裝現在移液管上端開口約0.5cm處塞一段長約1-1.5cm的普通棉花（不要用脫脂棉，易吸水）松緊要合適，目的(mùdì)是防止用洗耳球吸樣品時污染樣品。第八頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)92.移液管的包扎(bāozā)截一條5cm左右的報紙條(zhǐtiáo)，將其一端折進約3cm寬使成雙層，讓移液管的尖端包進雙層紙內（移液管與紙條(zhǐtiáo)的夾角成30°為宜），然后選擇移液管，使紙條(zhǐtiáo)成螺旋狀地包裹在移液管外面，最后將多余的紙條(zhǐtiáo)打個結，以防散開。第九頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)10培養(yǎng)皿、三角瓶和試管(shìguǎn)的包裝將洗凈的培養(yǎng)皿每10套一組疊在一起用報紙包裹，為防止松開，可用棉線繩扎緊?？赵嚬?、三角瓶的包扎將洗凈的三角瓶或試管口塞上棉塞，外包一層牛皮紙，用棉線繩扎緊瓶口后進行(jìnxíng)加壓蒸汽滅菌，在121℃下滅菌20min。第十頁，共27頁。9/29/20212011/5/27蓋上上蓋，做水平旋轉以使樣品和培養(yǎng)基充分(chōngfèn)混合。9/29/20212011/5/279/29/20212011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)滅菌(mièjūn)前玻璃器皿的包裝9/29/20212011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)9/29/20212011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)11紫外線滅菌(mièjūn)一般(yībān)用于無菌室、無菌箱等滅菌，每次滅菌在20min左右。紫外線只是表面殺菌，不能滲透到內部。注意事項：不能直視汞燈第十一頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)12接種(jiēzhòng)與計數①各取1ml稀釋液分別注入無菌培養(yǎng)皿中，每個稀釋度做3個重復樣；②倒入熔化并冷至45---50℃左右可用手背、鼻尖試不燙為宜，加上述培養(yǎng)基15ml左右，凝固后倒置平板在28—30℃恒溫箱內培養(yǎng)3天，取出進行菌落計數。10.1.3計數方法選30—300菌落計數原則若低于30可以按實際數計(shùjì)，然后求出每毫升異養(yǎng)菌的總數。菌數/1ml=培養(yǎng)皿上的菌數平均值×稀釋倍數第十二頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)13接種(jiēzhòng)步驟如下：第十三頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)14將上蓋打開(dǎkāi)少許第十四頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)15用滅過菌的移液管加入1ml樣品(yàngpǐn)每個稀釋度，（注意都用新的滅過菌的移液管）。第十五頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)16倒入45～50℃的培養(yǎng)基10～15ml第十六頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)17蓋上上蓋，做水平旋轉以使樣品和培養(yǎng)基充分(chōngfèn)混合。第十七頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)18將培養(yǎng)皿倒置，放置28℃～30℃恒溫箱中培養(yǎng)三天(sāntiān)，然后計數。第十八頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)19謝謝(xièxie)??！第十九頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)20循環(huán)(xúnhuán)水中粘泥測定原理操作(cāozuò)結果處理第二十頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)21原理(yuánlǐ)用一定目數的濾網，過濾一定量的循環(huán)水，用過濾得到的生物粘泥的量除以循環(huán)水量(shuǐliànɡ)，以mg/m3表示第二十一頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)22操作步驟1、循環(huán)水流速(liúsù)的測定第二十二頁，共27頁。11/24/20222011/5/27異養(yǎng)菌的測定(cèdìng)23第二十三頁，共27頁。11/24/