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獲得轉(zhuǎn)基因生物的過程?☆選修3☆現(xiàn)代生物科技專題基因工程的基本操作程序考綱考情基因工程操作的基本程序1.目的基因的獲取途徑(1)直接分離:從自然界已有的物種中分離,如從基因文庫中獲取。(2)人工合成目的基因常用的方法有:①已知核苷酸序列的較小基因,直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成,不需要模板。②以RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成。3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
4.目的基因的檢測(cè)與鑒定(1)分子水平檢測(cè)①導(dǎo)入檢測(cè):DNA分子雜交技術(shù),即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段作探針檢測(cè)。(2)個(gè)體生物學(xué)水平鑒定:對(duì)轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)行抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)。(2010年北京海淀區(qū)抽查)下圖是含某目的基因的DNA片段,據(jù)圖回答下列問題。(1)根據(jù)圖示可知,若用EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶切割,則此DNA片段可有_____個(gè)限制酶切割位點(diǎn),切割后共有____種____個(gè)切割末端。(2)EcoRⅠ限制酶切割后形成的末端是_____末端,在圖中用筆標(biāo)出切割部位。(3)如果要將用EcoRⅠ限制酶切割形成的目的基因片段導(dǎo)入受體細(xì)胞,一般需要_____作載體。其應(yīng)具備的特點(diǎn)有:_____、___、___。(4)E·coliDNA連接酶連接目的基因和載體時(shí)連接的是圖中____(填字母)部位的化學(xué)鍵?!敬鸢浮?/p>
(1)3
2
6(不計(jì)算原有的)(2)黏性(3)質(zhì)粒至少有一個(gè)切割位點(diǎn)能自我復(fù)制含標(biāo)記基因(4)X(1)將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反應(yīng)管中有________種DNA片段。(2)圖中②表示HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程,此過程可獲得________種重組質(zhì)粒;如果換用BstⅠ與BamHⅠ酶切,目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得________種重組質(zhì)粒。(3)目的基因插入質(zhì)粒后,不能影響質(zhì)粒的________?!窘馕觥?/p>
本題重點(diǎn)考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)的相關(guān)知識(shí),需特別注意基因工程的步驟、DNA的復(fù)制、基因工程的操作工具等知識(shí)。本題需特別注意圖示過程,從中獲取有效信息,然后結(jié)合課本知識(shí)即可正確解答?!敬鸢浮?/p>
(1)4
(2)2
1
(3)復(fù)制(4)DNA水解酶(5)表面無相應(yīng)的特異性受體(6)抗性B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)1.(2009年浙江高考題)下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是(
)A.目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物D3.(2011年上海高考題)科學(xué)家已能運(yùn)用基因工程技術(shù),讓羊合成并分泌人的抗體。相關(guān)敘述正確的是() ①該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異 ②DNA連接酶把目的基因與運(yùn)載體粘性末端的堿基對(duì)連接起來 ③蛋白質(zhì)中的氨基酸序列可為合成目的基因提供資料 ④受精卵是理想的受體 ⑤該羊的產(chǎn)生要用到核移植技術(shù) ⑥該羊的產(chǎn)生要用到胚胎移植技術(shù) A.①②③④ B.③④⑥ C.②③④⑤ D.①③④⑥B4.(2012年廣東高考題)科學(xué)家通過基因工程的方法,能使馬鈴薯塊莖含有人奶蛋白。以下有關(guān)該基因工程的敘述錯(cuò)誤的是(
)A.采用反轉(zhuǎn)錄的方法得到的目的基因有內(nèi)含子B.基因非編碼區(qū)對(duì)于目的基因在塊莖中的表達(dá)是不可缺少的C.馬鈴薯的葉肉細(xì)胞可作為受體細(xì)胞D.用同一種限制酶處理質(zhì)粒和含有目的基因的
DNA,可產(chǎn)生黏性末端而形成重組DNA分子A5.(2009年上海高考題)人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的P53基因,生物技術(shù)可對(duì)此類基因的變化進(jìn)行檢測(cè)。(3)已知限制酶E識(shí)別序列為CCGG,若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P53基因部分區(qū)域(見上圖),那么正常人的會(huì)被切成個(gè)片段;而患者的則被切割成長度為____對(duì)堿基和____對(duì)堿基的兩種片段。(4)如果某人的P53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后,共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對(duì)的四種片段,那么該人的基因型是____(以P+表示正常基因,P-表示異?;??!敬鸢浮?/p>
(1)從細(xì)胞中分離通過化學(xué)方法人工合成(2)見下圖基因堿基對(duì)的替換(基因突變)(3)3
460
220(4)P+P-6.(2008年山東高考題)為擴(kuò)大可耕地面積,增加糧食產(chǎn)量,黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后,構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的____處,DNA連接酶作用于___處。(填“a或“b”)(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_____法。(3)由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用_____技術(shù),該技術(shù)的核心是_____和_____。(4)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的_____作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè),又要用_____方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性?!敬鸢浮?/p>
(1)a
a(2)基因槍(花粉管通道)(3)植物組織培養(yǎng)脫分化(去分化)再分化(4)耐鹽基因(目的基因)一定濃度鹽水澆灌的(移栽到鹽堿地中)7.(2010·福建理綜,32節(jié)選)紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白,可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限,目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO),其簡(jiǎn)要生產(chǎn)流程如下圖。請(qǐng)回答:(1)圖中①所指的是________技術(shù)。(2)圖中②所指的物質(zhì)是________,③所指
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