高中生物校本課程微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課件

微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的基礎(chǔ)知識(shí)微生物病毒真菌原生動(dòng)物原核生物

結(jié)構(gòu)簡單,個(gè)體多數(shù)十分微小(光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到)，繁殖迅速課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)三.純化大腸桿菌四.菌種保存一.培養(yǎng)基二.無菌技術(shù)課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一.培養(yǎng)基2.分類：a、根據(jù)物理性質(zhì)分固體培養(yǎng)基——用于微生物的分離計(jì)數(shù)液體培養(yǎng)基——常用于工業(yè)生產(chǎn)課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一.培養(yǎng)基3.分類：b、根據(jù)化學(xué)成分分合成培養(yǎng)基——成分明確天然培養(yǎng)基——成分不明確c、根據(jù)用途分選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基

分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基

分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基

分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基

分離自養(yǎng)型微生物加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基

分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)二.無菌技術(shù)利用較為溫和的化學(xué)或物理方法,殺死物體中的部分微生物(不包括芽孢和孢子)1.消毒以強(qiáng)烈的化學(xué)或物理方法消滅體內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子。2.滅菌a.煮沸消毒法:100℃煮沸5-6minb.巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15minc.化學(xué)藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾靈等進(jìn)行皮膚消毒;氯氣消毒水源d.紫外線消毒……常用消毒的方法：課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)三.純化大腸桿菌一).培養(yǎng)基配制與滅菌二).接種、培養(yǎng)—純化大腸桿菌三).結(jié)果分析與評價(jià)倒平板操作的討論用手觸摸錐形瓶，溫度下降到剛剛不燙手時(shí)即可開始倒平板。

通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止凝結(jié)在皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)二).純化大腸桿菌1.原理在適宜環(huán)境下，單個(gè)細(xì)菌能迅速生長增殖形成一個(gè)細(xì)胞群體－－菌落課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)二).純化大腸桿菌2.方法:平板劃線法、稀釋涂布平板法1.原理在適宜環(huán)境下，單個(gè)細(xì)菌能迅速生長增殖形成一個(gè)細(xì)胞群體－－菌落課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)3.平板劃線法

通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。二).純化大腸桿菌課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)注意事項(xiàng):

a.在操作的第一步、劃線之前以及劃線操作結(jié)束時(shí)都要灼燒接種環(huán)？避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端。及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者4.稀釋涂布平板法

將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)。二).純化大腸桿菌系列稀釋操作101102103104105106課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)5.培養(yǎng)觀察

將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基放入37度恒溫箱中培養(yǎng)

12h和24h后，分別觀察記錄二).純化大腸桿菌

1.未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長？如果有菌落生長，說明了什么？無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則，說明培養(yǎng)基有雜菌，需要重新制備。

2.在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上，能否觀察到獨(dú)立的菌落？它們的大小、形狀、顏色相似？

如果接種成功的話，在培養(yǎng)基的表面可觀察到大小、形狀、顏色相似的菌落。三).結(jié)果分析與評價(jià)

1.試管低溫臨時(shí)保存

將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成菌落后，置于4OC的冰箱中保存（每隔3～6個(gè)月要重新接種培養(yǎng)后再保存）。