山東濟南、濟南2023年高三下學期第六次檢測生物試卷含解析

2023學年高考生物模擬試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚，將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．某農田棄耕一段時間后，逐漸出現(xiàn)雜草、灌木及小型動物。不列有關敘述正確的的是（）A．由于灌木叢較高，灌木遮擋草本植物，導致群落對光的利用率減少B．經過漫長的演替過程，該地必然能形成森林群落C．群落演替過程中，各影響因素常處于動態(tài)變化中，適應變化的種群數(shù)量增長或維持，不適應變化的種群數(shù)量減少甚至被淘汰D．為加速群落演替，可構建人工林以縮短演替時間，對生物多樣性的形成有積極作用2．在真核細胞中，生物膜系統(tǒng)的存在對細胞的生命活動有重要作用，下列關于生物膜系統(tǒng)的說法錯誤的是（）A．生物膜系統(tǒng)創(chuàng)造細胞微環(huán)境，利于提高新陳代謝效率B．核膜的存在使得蛋白質的合成速率變慢C．細胞中所有生物膜的組成成分和基本結構相同D．高爾基體邊緣膨大脫落的小泡可以成為溶酶體3．下列關于實驗操作的分析，正確的是（）A．撕取洋蔥鱗片葉內表皮細胞，用臺盼藍和蔗糖溶液處理后無法觀察到質壁分離現(xiàn)象B．觀察誘導植物染色體數(shù)目變化時，低倍鏡找到染色體數(shù)目改變的細胞后換高倍鏡觀察C．將淀粉溶液和淀粉酶混勻后，滴加HCl或NaOH溶液用于研究pH對酶活性的影響D．檢測酵母菌數(shù)量時，靜置培養(yǎng)液再取樣，計數(shù)時不宜統(tǒng)計所有壓在方格界線上的菌體4．禽流感病毒中H5亞型能突破種間屏障感染人類，科研人員擬在新型流感疫苗研發(fā)中對人流感病毒H3亞型和禽流感病毒H5亞型進行共預防。取兩種病毒的RNA逆轉錄分別獲得H5基因和H3基因，利用基因工程技術構建含有這兩種基因的重組DNA，分三次每次間隔10天對小鼠進行肌肉注射，測得其體內針對H5蛋白和H3蛋白的抗體濃度迅速增加。下列敘述錯誤的是（）A．肌肉注射后，細胞通過胞吞吸收重組DNAB．H5基因和H3基因均能在實驗小鼠體內表達C．新型流感疫苗使小鼠同時產生了兩種抗體，說明該實驗小鼠沒有發(fā)生非特異性免疫D．使用上述兩種病毒分別刺激離體的實驗小鼠脾臟淋巴細胞后效應T細胞數(shù)量快速增加，說明新型流感疫苗誘導小鼠產生了細胞免疫5．如圖為某人血糖調節(jié)的部分過程，抗體1和抗體2都能與相關受體結合導致調節(jié)異常。下列說法正確的是A．葡萄糖和胰島素作用于相關細胞都是通過與細胞內受體結合完成的B．兩種抗體都能引起血糖濃度升高，這在免疫學中稱為自身免疫缺陷病C．兩種抗體引起血糖升高都可以通過注射胰島素緩解癥狀D．由圖看出糖尿病并不都是胰島素分泌不足造成的6．生物體的生命活動受到多種因素的影響。在其它因素保持穩(wěn)定且適宜時，如圖所示曲線最有可能用來表示（）A．動物的呼吸速率隨O2含量的變化B．植物的凈光合速率隨光照強度的變化C．酶促反應速率隨底物濃度的變化D．CO2跨膜運輸速率隨兩側CO2濃度差的變化二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）在日益發(fā)展的果蔬飲料產業(yè)中，胡蘿卜汁受到消費者的喜愛，其生產工藝流程如圖。原料→清洗→去皮→切片→熱處理→打漿→酶處理→調配→均質脫氣→殺菌→成品回答下列問題。（1）胡蘿卜素可用于治療因缺乏維生素A引起的夜盲癥，原因是___________。（2）打漿后可用固定化果膠酶處理果汁提高澄清度，原因是___________；與直接使用酶相比，固定化酶的優(yōu)點有_________（答出1點即可），固定化酶技術常用的方法有_________________。（3）技術人員研究了不同方法進行去皮和熱處理對胡蘿卜素含量的影響，結果如下表。處理方法去皮方法熱處理方法堿液去皮熱水去皮復合磷酸鹽去皮熱水檸檬酸預煮醋酸預煮抗壞血酸預煮胡蘿卜素保存率（%）1．82．93．94．54．45．73．3①為測定胡蘿卜素的含量，先采用________法提取胡蘿卜素，較適宜用來提取胡蘿卜素的溶劑是___________（填“乙醇”或“石油醚”），不選擇另一種溶劑的理由是______________。②據(jù)實驗結果，制作胡蘿卜汁過程中較宜選用的去皮和熱處理方法分別是____________________。8．（10分）科學家研發(fā)出抗HPV的單克隆抗體可高效準確檢測出HPV，從而及時監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生?；卮鹣铝袉栴}：（l）單克隆抗體具有的主要優(yōu)點是______。單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術有______（答出兩點）。（2）將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞進行融合時，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外（只考慮兩兩融合），可能還有______，出現(xiàn)多種類型細胞的原因是______，誘導動物細胞融合時，常用的誘導因素有______（答出三點）等。（3）據(jù)報道，科學家從某些無限增殖細胞的細胞質中分離出了無限增殖調控基因（prG），該基因能激發(fā)動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。請據(jù)此設計兩種制備單克隆抗體的新思路：①______；②______。9．（10分）（1）紅細胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，該過程中對采集到的新鮮血液要進行洗滌和粗分離，洗滌紅細胞用的試劑是________，其目的是______________。紅細胞破裂后，需用離心的方法分離血紅蛋白溶液，離心后位于第_______層的液體是血紅蛋白水溶液。血紅蛋白提取液的純化過程是采用________方法。（2）下圖1表示制備固定化酵母細胞的有關操作，圖中的X溶液的作用是_________。在制備海藻酸鈉與酵母細胞的混合液時，應將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，才能加入已活化的酵母細胞，目的是防止___________________________________。（3）為了探究某加酶洗衣粉中堿性蛋白酶含量與洗滌效果的關系，某同學通過實驗獲得如上圖2所示的結果。由圖可知，加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量是________%，本實驗的自變量是______________________．10．（10分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉基因大腸桿菌作為微生物農藥，做了相關研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質粒，得到重組質粒，再將重組質粒置于經_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質粒和_________分別導入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產物的生物活性，研究者將上述各組表達產物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產物的生物活性大小。（4）作為微生物農藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產物而不是轉蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。11．（15分）回答下列問題：（1）早期的地球生態(tài)系統(tǒng)是兩極生態(tài)系統(tǒng)，只有生產者和分解者。后來出現(xiàn)了第三極_____，一方面使生態(tài)系統(tǒng)更加穩(wěn)定，另一方面對植物的進化產生了重要的影響，這是因為第三極具有的作用有_________________________________________________________________。（2）種群增長的“J型曲線模型建立的前提是食物充足、______________這樣的種群就沒有環(huán)境阻力和自然選擇。如果再加上種群足夠大、個體間隨機交配，并且沒有遷入遷出和基因突變，那么這個種群將__________________________。（3）塞罕壩生態(tài)系統(tǒng)的重建是恢復生態(tài)學的典例。恢復生態(tài)學的理論依據(jù)是___________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

棄耕農田上的演替過程：草本階段→灌木階段→喬木階段；群落演替的根本原因在于群落內部，所以不遭受外界干擾因素時也會發(fā)生演替；隨著群落演替的進行，植物類型逐漸增加，分層現(xiàn)象會更加明顯，光能利用率提高，但能量傳遞效率不變，保持在10%～20%之間。【詳解】A、隨著草本植物演替至灌木階段，群落結構變得復雜所以群落對光的利用率增加，A錯誤；B、能否演替至森林階段還取決于環(huán)境，如果是在干旱的地方，只能演替至草本或者灌木階段，B錯誤；C、群落演替過程中，由于群落內部存在著生存斗爭，所以各影響因素常處于動態(tài)變化中，適應變化的種群數(shù)量增長或維持，不適應變化的種群數(shù)量減少甚至被淘汰，C正確；D、人工林結構簡單，不利于生物多樣性的形成，D錯誤。故選C?！军c睛】本題考查群落的演替的知識，識記其基本內容即可。2、C【解析】

生物膜系統(tǒng)包括細胞器膜、細胞膜和核膜等。作用：細胞膜使細胞具有一個相對穩(wěn)定的內部環(huán)境，并在細胞與外部環(huán)境進行物質運輸、能量轉換和信息傳遞的過程中起著決定性的作用；廣闊的膜面積為多種酶提供了大量的附著位點，有利于許多化學反應的進行；將細胞器分開，使細胞內同時進行的多種化學反應互不干擾，使生命活動高效、有序地進行?！驹斀狻緼、細胞膜使細胞具有一個相對穩(wěn)定的內部環(huán)境，生物膜將細胞器分開，使細胞內同時進行的多種化學反應互不干擾，提高新陳代謝效率，A正確；B、真核生物必須要在細胞核內將DNA轉錄成mRNA，通過核孔進入細胞質基質才能被翻譯成蛋白質，使得蛋白質的合成速率變慢，B正確；C、各種膜的主要組成成分是蛋白質和脂質，以磷脂雙分子層為基本骨架，蛋白質覆蓋、貫穿或鑲嵌其中，但不完全相同，如細胞膜外有糖蛋白，而其它膜結構沒有，C錯誤；D、高爾基體邊緣膨大脫落形成小泡，這些小泡有的成為溶酶體，分布在細胞質中；有的作為分泌顆粒，運到其他細胞器，或逐漸移向細胞膜，與細胞膜融合后將所含的內容物釋放到細胞外，D正確。故選C。3、B【解析】

1、當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分就透過原生質層進入到外界溶液中，由于原生質層比細胞壁的伸縮性大，當細胞不斷失水時，液泡逐漸縮小，原生質層就會與細胞壁逐漸分離開來，即發(fā)生了質壁分離；2、低溫誘導染色體數(shù)目加倍實驗：低溫誘導染色體數(shù)目加倍實驗的原理：低溫能抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向細胞兩極，從而引起細胞內染色體數(shù)目加倍；該實驗的步驟為選材→固定→解離→漂洗→染色→制片；該實驗采用的試劑有卡諾氏液（固定）、改良苯酚品紅染液（染色），體積分數(shù)為15%的鹽酸溶液和體積分數(shù)為95%的酒精溶液（解離）。3、探究酵母菌種群數(shù)量的變化實驗中，實驗流程為：（1）酵母菌培養(yǎng)（液體培養(yǎng)基，無菌條件）→（2）振蕩培養(yǎng)基（酵母菌均勻分布于培養(yǎng)基中），滴加培養(yǎng)液時，應先加蓋玻片，再在蓋玻片的邊緣滴加培養(yǎng)液→（3）觀察并計數(shù)→重復（2）、（3）步驟（每天計數(shù)酵母菌數(shù)量的時間要固定）→繪圖分析。【詳解】A、臺盼藍可以將死細胞染色，不能將活細胞染色，而細胞壁具有全透性；所以撕取洋蔥鱗片葉內表皮細胞，用臺盼藍和蔗糖溶液處理后，細胞如果是獲得，并且蔗糖溶液濃度大于細胞液濃度，可以觀察到藍色范圍變大，說明細胞發(fā)生了質壁分離，A錯誤；B、觀察誘導植物染色體數(shù)目變化時，低倍鏡找到染色體數(shù)目改變的細胞后換高倍鏡觀察，B正確；C、研究pH對酶活性的影響，需要先對酶和底物分別調節(jié)pH后再混合，C錯誤；D、檢測酵母菌數(shù)量時，需要將培養(yǎng)液振蕩搖勻再取樣，計數(shù)時壓在線上的菌種，按照記上不記下，記左不計右的原則，D錯誤。故選B。【點睛】本題綜合考查教材實驗，需要考生識記實驗的原理、材料、操作步驟、結果及結論。4、C【解析】

1、體液免疫過程為：（1）感應階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞，再由T細胞呈遞給B細胞；（2）反應階段：B細胞接受抗原刺激后，開始進行一系列的增殖、分化，形成記憶細胞和漿細胞；（3）效應階段：漿細胞分泌抗體與相應的抗原特異性結合，發(fā)揮免疫效應。2、細胞免疫過程為：（1）感應階段：吞噬細胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細胞；（2）反應階段：T細胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細胞和效應T細胞，同時T細胞能合成并分泌淋巴因子，增強免疫功能。（3）效應階段：效應T細胞發(fā)揮效應。【詳解】A、重組DNA是大分子，肌肉注射后，存在于組織液中，細胞通過胞吞吸收大分子，A正確；B、因體內針對H5蛋白和H3蛋白的抗體濃度迅速增加，說明是H5基因和H3基因在實驗組小鼠細胞內均表達產生的蛋白質作為抗原刺激機體產生體液免疫的結果，B正確；C、注射疫苗后，小鼠非特異性免疫和特異性免疫都有發(fā)生，C錯誤；D、使用病毒刺激分離的實驗小鼠脾臟淋巴細胞，效應T細胞增加明顯，說明此前疫苗已引發(fā)細胞免疫產生記憶T細胞，D正確。故選C。5、D【解析】

由圖可知，抗體1通過作用于葡萄糖受體，引起胰島B細胞對血糖濃度變化不敏感；抗體2通過作用于組織細胞上胰島素受體而導致胰島素不能發(fā)揮作用。【詳解】A、葡萄糖和胰島素的受體均位于細胞膜上，A錯誤；B、兩種抗體都能引起血糖濃度升高，屬于自身免疫病，B錯誤；C、抗體2引起血糖升高不可以通過注射胰島素緩解癥狀，C錯誤；D、由圖看出糖尿病并不都是胰島素分泌不足造成的，如后者是由于組織細胞對胰島素不敏感造成的，D正確。故選D。6、C【解析】

1、真正光合速率=凈光合速率+呼吸速率。2、酶促反應速率隨反應物濃度的變化存在飽和現(xiàn)象。3、題圖反應的是某一生命活動的速率隨某種影響因素的增大逐漸達到飽和狀態(tài)。4、O2濃度的增加可以抑制無氧呼吸，促進有氧呼吸?！驹斀狻緼、動物細胞在無氧的時候可以進行無氧呼吸，在氧氣充足的條件下進行有氧呼吸，所以其呼吸速率隨著O2的變化規(guī)律是先降低后升高，在低氧的條件最低，A錯誤；B、植物凈光合速率=總光合速率-呼吸速率，光照強度為零時，總光合速率為零，但呼吸速率不為零，曲線不應該起始于原點，B錯誤；C、酶促反應速率隨反應物濃度的升高而不斷升高，當反應物濃度達到一定后存在飽和現(xiàn)象，C正確；D、CO2跨膜運輸?shù)姆绞绞亲杂蓴U散，其速率與跨膜兩側CO2濃度差成正比，不會達到飽和狀態(tài)，D錯誤。故選C?！军c睛】本題需要考生理解曲線的變化規(guī)律，結合選項中的各個生理過程及影響因素進行解答，A選項中需要理解隨著O2濃度的增加無氧呼吸不斷降低，有氧呼吸不斷增加，所以最低點在低氧的條件下。二、綜合題：本大題共4小題7、β--胡蘿卜素在人體內可被氧化成兩分子的維生素A，果膠酶可使果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸既能與反應物接觸，又能與產物分離（酶可被反復利用；提高酶的穩(wěn)定性）化學結合法、物理吸附法萃取石油醚乙醇是水溶性有機溶劑，萃取過程能與水混溶而影響萃取效果復合磷酸鹽去皮和抗壞血酸預煮【解析】

1.果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶等。2.果膠酶在果汁制作中的作用；①分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層；使果膠水解。為半乳糖醛酸。②提高水果的出汁率，并使果汁變得澄清。3.胡蘿卜素，從胡蘿卜中提取出的橘黃色物質包括多種結構類似物，統(tǒng)稱為胡蘿卜素。胡蘿卜素的化學分子式中包含多個碳碳雙鍵，根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為a、β、γ三類，β一胡蘿卜素是其中最主要的組成成分。一分子的β--胡蘿卜素在人或動物的小腸、肝臟等器官被氧化成兩分子的維生素A，因此，胡蘿卜素可以用來治療因缺乏維生素A而引起的各種疾病，如夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等。【詳解】（1）胡蘿卜素中主要是β一胡蘿卜素，β一胡蘿卜素在人體內可被氧化成兩分子的維生素A，因此胡蘿卜素可用于治療因缺乏維生素A引起的夜盲癥。（2）由分析可知，果膠酶能分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層；使果膠水解為半乳糖醛酸，因此，能提高出汁率和澄清度；固定化酶既能與反應物充分接觸，而且還可以與產物分離，并且還能反復使用，固定化酶技術常用的方法有化學結合法和物理吸附法。（3）①因為胡蘿卜素化學性質穩(wěn)定，不溶于水，易溶于石油醚等有機溶劑，因此，提取胡蘿卜素常采用萃取法，石油醚的沸點較高，且不與水互溶，因此石油醚較適宜用來提取胡蘿卜素，而乙醇易揮發(fā)且與水互溶，因此不用乙醇作為萃取劑。②據(jù)實驗結果可知，胡蘿卜在復合磷酸鹽去皮方法中的保存率最高，而且用抗壞血酸預煮獲得的胡蘿卜素的保存率也是最高的，因此，制作胡蘿卜汁過程中較宜選用的去皮和熱處理方法分別是復合磷酸鹽去皮和抗壞血酸預煮，從而獲得較多的胡蘿卜素?！军c睛】熟知胡蘿卜素和果膠酶的基本知識與用途是解答本題的關鍵，掌握固定化酶技術的方法與優(yōu)點以及胡蘿卜素的提取原理是解答本題的另一關鍵！8、特異性強、靈敏度高動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合骨髓瘤細胞自身融合細胞、淋巴細胞自身融合細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%聚乙二醇、滅活病毒、電刺激通過基因工程向漿細胞內導入prG，并讓其表達將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中進行培養(yǎng)【解析】

單克隆抗體制備流程：

（1）對小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠產生免疫反應；

（2）得到相應的B淋巴細胞；

（3）將小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選；

（4）在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜種細胞才能生長（這種雜種細胞的特點是既能迅速大量繁殖又能產生專一的抗體）

（5）對上述雜交瘤細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經多次篩選，就可獲得足量的能分泌所需抗體的細胞；

（6）最后，將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內增殖，這樣，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體?！驹斀狻?1)單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高的優(yōu)點。單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術有動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合。

(2)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞進行融合時，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外（只考慮兩兩融合），可能還有融合的具有同種核的細胞（B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞），出現(xiàn)多種類型細胞的原因是細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%，誘導動物細胞融合時，常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。

(3)據(jù)報道，科學家從某些無限增殖細胞的細胞質中分離出了無限增殖調控基因(prG)，該基因能激發(fā)動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。請據(jù)此設計兩種制備單克隆抗體的新思路：

①通過基因工程向漿細胞中導入prG并讓其表達；②將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中進行細胞培養(yǎng)?！军c睛】本題考查了單克隆抗體的制備過程和動物細胞培養(yǎng)等相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力。9、生理鹽水去除血漿蛋白3凝膠色譜法使海藻酸鈉與酵母混合液凝聚成凝膠珠防止因溫度過高導致酵母細胞失活1．6堿性蛋白酶含量【解析】

依題圖可知，血紅蛋白提取液的純化方法是凝膠色譜法。制備固定化酵母細胞的有關操作中，X溶液是CaCl2溶液。為了探究某加酶洗衣粉中堿性蛋白酶含量與洗滌效果的關系實驗中，自變量是堿性蛋白酶含量。以此相關知識解答?！驹斀狻浚?）因為要利用紅細胞提取細胞內的血紅蛋白，所以需要洗去細胞外的血漿蛋白，所用試劑是生理鹽水，以保證細胞結構和形態(tài)的完整性。紅細胞破裂離心后，第3層的液體是血紅蛋白水溶液，根據(jù)蛋白質分子量大小的原理來純化蛋白質的方法是凝膠色譜法。（2）圖中的X溶液是CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉與酵母混合液凝聚成凝膠珠。海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，才可以防止因溫度過高導致酵母細胞失活。（3）依題圖2可知，加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的含量是1．6%時，去污力最強。橫軸是堿性蛋白酶的含量，所以本實驗的自變量是堿性蛋白酶含量。【點睛】本題文重在考查學生通過識圖獲取有效信息的能力，并且能識記相關實驗的基礎知識，能用生物學語言解釋相關問題。10、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質粒、空質粒（pET質粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質的結構基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質。（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因導入受體細胞1、轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉化方法：將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是農桿菌轉化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因導入動物細胞：最常用的方法是顯微注射技術．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因導入微生物細胞：原核生物作為受體細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉化過程。3、重組細胞導入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術。2、其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是從轉基因生物中提取蛋白質，用相應的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學水平的鑒定，如轉基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。【詳解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質粒，得到重組質粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質粒的導入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經過4次PCR技術后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實驗中的對照原則，若要比較新蛋白A的表達效率是否提高，則需設置三組實驗實驗變量的處理分別為：僅含新蛋白質A的重組質粒，僅含蛋白A的重組質粒和空白對照（僅含空質粒，以排除空質?？赡墚a生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質粒和含有蛋白A基因的重組質粒、空質粒（pET質粒）分別導入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質，用抗原——抗體雜交方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白