法醫(yī)-第十章親子鑒定

第10章親子鑒定Paternity

Testing

思考題：1、親子鑒定的原理是什么？2、法醫(yī)學(xué)常用的遺傳標(biāo)記有哪些？3、計(jì)算父權(quán)排除幾率和父權(quán)指數(shù)的法醫(yī)學(xué)意義是什么？4、如何評(píng)價(jià)Y染色體和線粒體DNA遺傳標(biāo)記在親子鑒定中的應(yīng)用價(jià)值？起源回顧１歷史記載三國(guó)時(shí)期滴骨法宋代（1247年）宋慈《洗冤集錄》滴骨認(rèn)親２文學(xué)戲劇秦劇《三滴血》描繪的合血法３上世紀(jì)初(1901年)

LandsteinerABO４Southern技術(shù)1980WhymanandwhiteRFLP技術(shù)５ＤＮＡ指紋1985

Jeffery

DNAfingerprint６基因掃描1990STRbasedPCR

親子鑒定（identificationindisputedpaternity）是指應(yīng)用醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和人類學(xué)的方法檢測(cè)遺傳標(biāo)記，并依據(jù)遺傳學(xué)理論進(jìn)行分析，從而對(duì)被檢者之間是否存在生物學(xué)親緣關(guān)系所作的科學(xué)判定。

親子鑒定的類型常見(jiàn)于：1涉及民事糾紛的親子鑒定（1）涉及婚生或非婚生子女撫育責(zé)任或財(cái)產(chǎn)繼承的訴訟案；（2）懷疑產(chǎn)院調(diào)錯(cuò)嬰兒的訴訟案。2涉及刑事案件的親子鑒定（1）強(qiáng)奸案或違法性犯罪案件對(duì)嬰兒（或胎兒）親生父親的確定；（2）碎尸案中的身源認(rèn)定；（3）殺嬰、拐騙兒童等案件中孩子身源的認(rèn)定。3涉及行政事務(wù)的親子鑒定（1）移民涉外公證；（2）失散親人親緣關(guān)系的認(rèn)定；（3）計(jì)劃外生育責(zé)任人的確認(rèn)及其子女戶籍的注冊(cè)。最常見(jiàn)：父權(quán)鑒定（paternitytesting)親子鑒定的依據(jù)

妊娠期限非遺傳特征性交及生育能力遺傳特征（主要）親子鑒定的依據(jù)遺傳性狀（或遺傳特征）是生物體表現(xiàn)的一切形態(tài)特征、生理特征和代謝類型的統(tǒng)稱。單純遺傳特征人類的遺傳性狀復(fù)雜遺傳特征法醫(yī)遺傳標(biāo)記（geneticmarker）產(chǎn)物水平遺傳標(biāo)記血液細(xì)胞表面的遺傳標(biāo)記（紅細(xì)胞型、白細(xì)胞型、血小板型）血液蛋白質(zhì)的遺傳標(biāo)記（紅細(xì)胞酶型、血清酶型、血清型）DNA水平遺傳標(biāo)記DNA序列多態(tài)性DNA長(zhǎng)度多態(tài)性分析單基因遺傳特征是親子鑒定最可靠、最基本和最常用的方法。親代基因型組合子代基因型aa×aaaa×bbaa×abbb×bbbb×abab×abaaabaa，abbbbb，abaa，bb，ab親子鑒定原理

親子鑒定的基本原理有以下兩點(diǎn)：①在肯定孩子的某個(gè)等位基因必須來(lái)自生父，而假設(shè)父親并不具有這個(gè)基因的情況下，可以排除其親子關(guān)系。②在肯定孩子的某個(gè)等位基因必須來(lái)自生父，而假設(shè)父親具有這個(gè)基因的情況下，不能排除其親子關(guān)系。

染色體

父親給一半

母親給一半chromosomefromfatherchromosomefrommother基因組DNA信息傳遞TheMonkandhispeas

AnAustrianmonk,GregorMendel自由組合律分離率根據(jù)遺傳標(biāo)記排除父權(quán)

血型組合母親孩子生父基因可以排除父權(quán)不能排除父權(quán)aa×aaabbaa、abaa×abbaabb、abab×aaabbaa、abbb×bbbaabb、abbb×ababbaa、abab×bbbaabb、abab×aba、b-aa、bb、ab親子鑒定應(yīng)具備的條件1、鑒定人的資格①必須具備相應(yīng)的遺傳學(xué)和分子生物學(xué)等學(xué)科的知識(shí)，②熟練掌握相應(yīng)的檢驗(yàn)技術(shù)，③由具有一定工作經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行解釋和判斷，④并按照國(guó)際公認(rèn)的判斷標(biāo)準(zhǔn)作出相應(yīng)的結(jié)論。2、鑒定機(jī)構(gòu)的條件①必須是具有相應(yīng)規(guī)模和相應(yīng)儀器設(shè)備的單位；②實(shí)驗(yàn)所用方法必須可靠、操作規(guī)范、分型標(biāo)準(zhǔn)；③試劑必須達(dá)到規(guī)定的純度要求、特異性良好；④儀器必須性能良好、穩(wěn)定。此外，目前認(rèn)為開(kāi)展親子鑒定工作的實(shí)驗(yàn)室，所檢測(cè)遺傳標(biāo)記的累積非父排除率至少應(yīng)在99.95﹪以上。3、被鑒定人的要求①必須認(rèn)真核對(duì)被檢者身份；②原則上應(yīng)由檢驗(yàn)者直接從被檢者身上采集檢驗(yàn)標(biāo)本，嚴(yán)格避免將被檢者或血液樣品等調(diào)錯(cuò)；③被檢者在近期內(nèi)不能接受輸血，避免他人的血液成分干擾檢驗(yàn)結(jié)果；④充分了解被檢者是否患有某種特殊疾病。

親子鑒定的血液遺傳標(biāo)記，

一般應(yīng)具備以下條件：1、表現(xiàn)為簡(jiǎn)單的遺傳性狀，遺傳關(guān)系清楚，經(jīng)家系調(diào)查證明符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律。2、具有遺傳多態(tài)性，基因頻率分布較均勻，父權(quán)排除率高。3、在相應(yīng)地區(qū)、民族中該血型系統(tǒng)的基因頻率分布情況已有準(zhǔn)確調(diào)查結(jié)果。4、血型個(gè)體發(fā)生早，不易受年齡、疾病及其他因素影響。5、檢驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，結(jié)果明確可靠。

紅細(xì)胞型

（等位基因決定的紅細(xì)胞表面抗原的差異）主要檢測(cè)方法：型特異性抗體與相應(yīng)抗原的血清學(xué)反應(yīng)（如凝集試驗(yàn)、凝集抑制試驗(yàn)和Coomb試驗(yàn)等）。血型系統(tǒng)染色體定位等位基因抗原種類抗原性質(zhì)表型（基因型）ABO型9ABOA抗原B抗原H抗原糖脂A型（AA、AO）B型（BB、BO）AB型（AB）O型（OO）MN型4MNM抗原N抗原糖蛋白M型（MM）MN型（MN）N型（NN）P型6P1P2P1抗原P抗原糖蛋白P1型（P1P1、P1P2）P2型（P2P2）Rh型1RHDRhceRHCcRHcERHCED抗原c抗原C抗原e抗原E抗原膜內(nèi)鑲嵌蛋白ccdeeCcdeeCcDeeccdEeCCdEECcDEECcdeeccDeeCCDeeCcdEeccDEeCCDEeCcdEEccDEECCDEEback遺傳標(biāo)記紅細(xì)胞血型ABO，Ph,MN,Kell,Deffy，ABO血型的分型

正試驗(yàn)

反試驗(yàn)分型

抗A抗BA型紅細(xì)胞B型紅細(xì)胞＋－－＋A型－＋＋－B型＋＋－－AB型－－＋＋O型

現(xiàn)采一童耳血，應(yīng)用抗A及抗B抗體檢測(cè)，未見(jiàn)凝集反應(yīng)，可疑父未見(jiàn)凝集反應(yīng)，已知其母為AB型，此童可否為此被檢父母之子？為什么？現(xiàn)采一童耳血，應(yīng)用抗A及抗B抗體檢測(cè)，未見(jiàn)凝集反應(yīng)，可疑父未見(jiàn)凝集反應(yīng)，已知其母為AB型，此童可否為此被檢父母之子？為什么？母：AB基因型：AB;HH或AB;Hh子：O或Oh

基因型：OO;HH(Hh)

或AB(AO\BO\AA\BB);hh父：O或Oh

基因型：OO;HH或OO;Hh

或AB(AO\BO\AA\BB);hh注：Oh代表孟買型。紅細(xì)胞酶型酶譜技術(shù)（zymogramtechnique）血型系統(tǒng)生理功能染色體定位等位基因表型紅細(xì)胞酸性磷酸酶（EAP型）正磷酸單酯＋水磷酸＋醇2EAPaEAPbA型BA型B型酯酶D（ESD型）酯＋水脂肪酸＋醇13ESD1ESD21型2-1型2型葡糖磷酸變位酶1（PGM1亞型）葡糖-1-磷酸

葡糖-6-磷酸1PGM11＋PGM11－PGM21＋PGM21－PGM11＋型PGM11＋1－型PGM11－型PGM12＋1＋型PGM12＋1－型PGM12－1＋型PGM12－1－型PGM12＋型PGM12＋2－型PGM12－型乙二醛酶Ⅰ（GLOⅠ）甲基乙二醛S-乳酸谷胱甘肽6GLOⅠ1GLOⅠ21型2-1型2型谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT型）丙氨酸丙酮酸GPTα-酮戊二酸谷氨酸16GPT1GPT21型2-1型2型back遺傳標(biāo)記同工酶型PGM，EsD，GIOI，ACP，AK，ADAEsD分型示意圖人類遺傳標(biāo)記——同工酶的多態(tài)性

血清蛋白型（polymorphismofserumprotein）又稱血清型（serumtypes）血型系統(tǒng)生理功能染色體定位等位基因表型結(jié)合珠蛋白（Hp型）Hp和Hb結(jié)合成復(fù)合物，使Hb中的鐵得以儲(chǔ)存和再利用16Hp1Hp21型2-1型2型維生素D結(jié)合蛋白（Gc亞型）結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)維生素D極其代謝產(chǎn)物4Gc1FGc1SGc21F型1F1S型1S型2-1F型2-1S型2型轉(zhuǎn)鐵蛋白（TfC亞型）參與鐵的吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)，并與鋅的吸收有關(guān)3TfC1TfC2C1型C2C1型C2型α

1－抗胰蛋白酶（PiM亞型）維持蛋白酶與蛋白酶抑制物之間的平衡，保護(hù)組織免受蛋白水解酶的分解14PiM1PiM2PiM3M1型M2M1型M3M1型M3M2型M2型M3型間-α-胰蛋白酶抑制劑（ITIH1型）抑制多種絲氨酸蛋白水解酶活性3ITIH11ITIH12ITIH131型2-1型2型3-1型3型3-2型

back遺傳標(biāo)記蛋白型Hp，Gc,Bf,Tf,a-TA,C2,C4Hp（結(jié)合珠蛋白分型）1人類遺傳標(biāo)記——蛋白質(zhì)多態(tài)性

白細(xì)胞型主要是指人類白細(xì)胞抗原（humanleukocyteantigen，HLA）又稱為移植抗原或組織相容性抗原系統(tǒng)，是迄今發(fā)現(xiàn)的最復(fù)雜的人類遺傳標(biāo)記。HLA---6號(hào)染色體---約1000個(gè)基因座主要HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ。HLA-Ⅰ--HLA-A、B、C、E、F、G、H及JHLA-Ⅱ--DR、DQ、DP特征：?jiǎn)伪缎瓦z傳，高度的遺傳多態(tài)性back遺傳標(biāo)記白細(xì)胞血型HLA-A，-B，-C，-D，-DP，-DQ，-DR。具有活性的淋巴細(xì)胞死亡的淋巴細(xì)胞表面抗原多態(tài)性微量細(xì)胞毒試驗(yàn)

DNA水平的遺傳標(biāo)記DNA的結(jié)構(gòu)與功能結(jié)構(gòu)：四種脫氧核糖核酸（簡(jiǎn)稱核苷酸）通過(guò)磷酸二酯鍵聚合而成的多核苷酸鏈。核苷酸由磷酸、脫氧核糖和堿基（A、G、C、T）。功能：把遺傳信息從親代傳給子代。DNA多態(tài)性的分子學(xué)基礎(chǔ)多態(tài)性：DNA區(qū)域中等位基因（或片段）存在兩種或兩種以上形式，其本質(zhì)是生物體在進(jìn)化過(guò)程中DNA的核苷酸排列順序改變的結(jié)果。DNA多態(tài)性可分為序列多態(tài)性（sequencepolymorphism）和長(zhǎng)度多態(tài)性（lengthpolymorphism）

序列多態(tài)性在兩條同源染色體上，同源DNA序列長(zhǎng)度相等，但個(gè)別核苷酸不同而產(chǎn)生的個(gè)體差異。主要原因是單個(gè)堿基的替代，這種多態(tài)性也稱為單核苷酸多態(tài)性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）。堿基替代包括轉(zhuǎn)換和顛換兩種。HLA基因區(qū)有極為復(fù)雜的高度可變序列。例如：HLA-DQA1區(qū)段有239bp，其中序列變異的位置有27個(gè)。線粒體DNA-D環(huán)變異區(qū)，約占mtDNA5﹪～7﹪的D-環(huán)區(qū)表現(xiàn)出的極大的結(jié)構(gòu)多態(tài)性和穩(wěn)定的由母系遺傳的特征，為個(gè)人識(shí)別和母系單親的親子鑒定提供了條件。

長(zhǎng)度多態(tài)性是指由于片段插入、缺失或重復(fù)序列數(shù)目變異所致的DNA長(zhǎng)度的個(gè)體差異。其中約占整個(gè)基因族20﹪～30﹪的重復(fù)序列是導(dǎo)致DNA長(zhǎng)度多態(tài)性的最常見(jiàn)原因。1、散在重復(fù)序列單拷貝DNA序列以其單體形式散在地分布于整個(gè)基因組中。2、串聯(lián)重復(fù)序列具有特定的重復(fù)單位，各重復(fù)單位頭尾相連形成的重復(fù)序列稱為串聯(lián)重復(fù)序列，又稱衛(wèi)星DNA。由于結(jié)構(gòu)分布上的不同，衛(wèi)星DNA又被分為大衛(wèi)星DNA，中衛(wèi)星DNA，小衛(wèi)星DNA，微衛(wèi)星DNA。小衛(wèi)星DNA，微衛(wèi)星DNA具有極高的多態(tài)性，是用于親子鑒定的重要遺傳標(biāo)記。3、倒位重復(fù)序列重復(fù)單位是互補(bǔ)序列，并在同一條DNA鏈上呈反向排列的重復(fù)序列稱為倒位重復(fù)序列。倒位重復(fù)序列根據(jù)兩個(gè)互補(bǔ)拷貝之間是否存在間隔序列，又可分為有間隔重復(fù)序列和無(wú)間隔重復(fù)序列兩種形式。小衛(wèi)星DNA（minisatelliteDNA）是由許多長(zhǎng)度為7～70bp的串聯(lián)重復(fù)單位組成的DNA序列，重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在不同個(gè)體間有極大差異，重復(fù)次數(shù)少至數(shù)次，多至數(shù)千次，故又稱為可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列（variablenumberoftandemrepeats，VNTRs）。在構(gòu)成上，小衛(wèi)星DNA最大的特點(diǎn)是同一小衛(wèi)星的各個(gè)重復(fù)單位內(nèi)含有一個(gè)約10～15bp長(zhǎng)的保守序列，即核心序列；不同的DNA之間其核心序列有極高的同源性，在低雜交強(qiáng)度條件下可以相互雜交。以核心序列為探針進(jìn)行限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析時(shí)，能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)位點(diǎn)小衛(wèi)星DNA多態(tài)性，這便是多位點(diǎn)DNA指紋圖分析的理論基礎(chǔ)之一。小衛(wèi)星DNA重復(fù)單位的重復(fù)數(shù)目遵循孟德?tīng)栠z傳規(guī)律遺傳。

微衛(wèi)星DNA（microsatelliteDNA）是一類更簡(jiǎn)單的寡核苷酸串聯(lián)重復(fù)序列，重復(fù)單位為2～6bp，重復(fù)次數(shù)在10～60次左右，又被稱為短小串聯(lián)重復(fù)序列（shorttandemrepeats，STRs）。STR分布廣泛，在人類基因組中約存在著5萬(wàn)～10萬(wàn)個(gè)。STR實(shí)質(zhì)上也是一種VNTR，同樣具有極高的多態(tài)性，亦按孟德?tīng)栠z傳規(guī)律遺傳。SourcesofBiologicalEvidenceBloodSemenSalivaUrineHairTeethBoneTissueBriefHistoryofForensicDNATyping1980-RayWhitedescribesfirstpolymorphicRFLPmarker1985-AlecJeffreysdiscoversmultilocusVNTRprobes1985-firstpaperonPCR1988-FBIstartsDNAcasework1991-firstSTRpaper1995-FSSstartsUKDNAdatabase1998-FBIlaunchesCODISdatabaseBasisofDNAProfilingThegenomeofeachindividualisunique(withtheexceptionofidenticaltwins)andisinheritedfromparentsProbesubsetsofgeneticvariationinordertodifferentiatebetweenindividuals(statisticalprobabilitiesofarandommatchareused)DNAtypingmustbeperformedefficientlyandreproducibly(informationmustholdupincourt)CurrentstandardDNAtestsDONOTlookatgenes–little/noinformationaboutrace,predisposaltodisease,orphenotypicalinformation(eyecolor,height,haircolor)isobtainedChangingTechnologiesParadigmShift:RestrictionFragment-LengthPolymorphismstoShortTandemRepeatsFiveRFLPprobesprovidealmostexclusiveidentity(~1in109individuals)RFLPrequiresaminimumof25ngofrelativelyundegradedDNA(1000-20,000basepairs)ShortTandemRepeats(STRs)onlyrequire~1ngDNAthatcanbepartiallydegradedDiscriminationpower:5RFLPprobesequals~12STRlociDNAUseinForensicCasesMostarerapecases(>2outof3)LookingformatchbetweenevidenceandsuspectMustcomparevictim’sDNAprofileMixturesmustberesolvedDNAisoftendegradedInhibitorstoPCRareoftenpresentChallengesWhichSuspect,AorB,cannotbeexcludedfrompotentialperpetratorsofthisassault?HumanIdentityTestingForensiccases--matchingsuspectwithevidencePaternitytesting--identifyingfatherHistoricalinvestigationsMissingpersonsinvestigationsMassdisasters--puttingpiecesbacktogetherMilitaryDNA“dogtag”ConvictedfelonDNAdatabasesSampleObtainedfromCrimeSceneorPaternityInvestigationBiologyDNAExtractionDNAQuantitationPCRAmplificationofMultipleSTRmarkersTechnologySeparationandDetectionofPCRProducts(STRAlleles)SampleGenotypeDeterminationGeneticsComparisonofSampleGenotypetoOtherSampleResultsIfmatchoccurs,comparisonofDNAprofiletopopulationdatabasesGenerationofCaseReportwithProbabilityofRandomMatchStepsinDNASampleProcessingSourcesofBiologicalEvidenceBloodSemenSalivaUrineHairTeethBoneTissueBloodstainOnlyaverysmallamountofbloodisneededtoobtainaDNAprofileDNAintheCellTargetRegionforPCRchromosomecellnucleusDoublestrandedDNAmoleculeIndividualnucleotidesShortTandemRepeats(STRs)therepeatregionisvariablebetweensampleswhiletheflankingregionswherePCRprimersbindareconstant7repeats8repeatsAATGHomozygote=bothallelesarethesamelengthHeterozygote=allelesdifferandcanberesolvedfromoneanother170bp195bpDifferentprimersetsproducedifferentPCRproductsizesforthesameSTRalleleTCATrepeatunitIn32cyclesat100%efficiency,1.07billioncopiesoftargetedDNAregionarecreatedPCRCopiesDNAExponentiallythroughMultipleThermalCyclesOriginalDNAtargetregionThermalcycleThermalcycleThermalcycleMultiplexPCROver10MarkersCanBeCopiedatOnceSensitivitiestolevelslessthan1ngofDNAAbilitytoHandleMixturesandDegradedSamplesDifferentFluorescentDyesUsedtoDistinguishSTRAlleleswithOverlappingSizeRangesAnExampleForensicSTRMultiplexKitD3FGAvWA5-FAM(blue)D13D5D7NED(yellow)AD8D21D18JOE(green)GS500-internallanestandardROX(red)AmpFlSTR?ProfilerPlus?KitavailablefromPEBiosystems(FosterCity,CA)9STRsamplifiedalongwithsex-typingmarkeramelogenininasinglePCRreaction100bp400bp300bp200bpSizeSeparationColorSeparationAvailableKitsforSTRAnalysisKitsmakeiteasyforlabstojustaddDNAsamplestoapre-mademix13CODIScorelociProfilerPlusandCOfiler(PEAppliedBiosystems)PowerPlex1.1and2.1(PromegaCorporation)IncreasedpowerofdiscriminationCTT(1994):1in410SGMPlus?(1999):1in3trillionPowerPlex?16(2000):1in2x1017ABIPRISM?310GeneticAnalyzer

AutomatedgelpouringAutomatedsampleinjectionCapillaryelectrophoresiswithmulti-colordetectioncapabilitiesABIPrism310GeneticAnalyzercapillarySyringewithpolymersolutionAutosamplertrayOutletbufferInjectionelectrodeInletbufferClose-upofABIPrism310SampleLoadingAreaAutosamplerTraySampleVialsElectrodeCapillarySeeTechnologysectionformoreinformationonCEamelogeninD19D3D8TH01VWAD21FGAD16D18D2amelogeninD19D3D8TH01VWAD21FGAD16D18D2TwodifferentindividualsDNASize(basepairs)Resultsobtainedinlessthan5hourswithaspotofbloodthesizeofapinheadprobabilityofarandommatch:~1in3trillion

HumanIdentityTestingwithMultiplexSTRsSimultaneousAnalysisof10STRsandGenderIDAmpFlSTR?SGMPlus?kitSTRgenotypingisperformedbycomparisonofsampledatatoallelicladdersMicrovariantalleleSTRAlleleFrequencies05101520253035404567899.310Caucasians(N=427)Blacks(N=414)Hispanics(N=414)TH01Marker*Proc.Int.Sym.Hum.ID(Promega)1997,p.34NumberofrepeatsFrequencyFBI’sCODISDNADatabaseCombinedDNAIndexSystemUsedforlinkingserialcrimesandunsolvedcaseswithrepeatoffendersLaunchedOctober1998Linksall50statesRequires>4RFLPmarkersand/or13coreSTRmarkersCurrentbacklogof>600,000samples13CODISCoreSTRLociwithChromosomalPositionsCSF1POD5S818D21S11TH01TPOXD13S317D7S820D16S539D18S51D8S1179D3S1358FGAVWAAMELAMEL親子鑒定結(jié)果的評(píng)估排除親權(quán)關(guān)系肯定親權(quán)關(guān)系單親親子鑒定結(jié)果的評(píng)估排除親權(quán)關(guān)系排除父權(quán)的類型（根據(jù)血型遺傳規(guī)律）1、直接排除2、間接排除直接排除有爭(zhēng)議的可疑父親與孩子中至少有一個(gè)為雜合子時(shí)，若他們之間的遺傳標(biāo)記違反遺傳規(guī)律，排除親子關(guān)系則為直接排除。

直接排除父權(quán)例DNA分型是直接檢測(cè)染色體上的基因，由于各類DNA多態(tài)性位點(diǎn)的雜合度均較高，每個(gè)位點(diǎn)的等位基因又為共顯性，故在沒(méi)有基因突變、分型差錯(cuò)的前提下，只要受檢者之間的DNA分型違反孟德?tīng)栠z傳規(guī)律，可以認(rèn)為都是直接排除。母親孩子可疑父親例1A型AB型A型例2A型O型AB型

間接排除有爭(zhēng)議的可疑父親和孩子由表型推測(cè)均為純合子時(shí)，如他們之間的遺傳標(biāo)記違反遺傳規(guī)律，排除親子關(guān)系則為間接排除。例：MN系統(tǒng)檢測(cè)時(shí)，孩子為M型，可疑父親為N型，推測(cè)孩子和可疑父親的基因型分別為MM和NN，可疑父親因不能提供必須的M基因而排除其與孩子的親子關(guān)系。間接排除是根據(jù)檢測(cè)的陰性結(jié)果推測(cè)某基因位點(diǎn)為純合子，由于某些血型系統(tǒng)存在O基因、無(wú)效基因等，可能將含有這些基因的雜合子誤推測(cè)為純合子，故作出結(jié)論時(shí)應(yīng)慎重。

排除父權(quán)的原則1、只有一個(gè)遺傳標(biāo)記（無(wú)論是血型遺傳標(biāo)記還是單基因位點(diǎn)DNA遺傳標(biāo)記）違反遺傳規(guī)律，不能輕易作出否定結(jié)論，必須加測(cè)其他系統(tǒng)，因?yàn)閷?duì)于不是生父的男子，隨著檢測(cè)項(xiàng)目的增加必定還有其他遺傳標(biāo)記可排除親子關(guān)系。若增加檢測(cè)項(xiàng)目，排除遺傳標(biāo)記不再增加，則可考慮原來(lái)排除的那個(gè)遺傳標(biāo)記是由突變或非典型遺傳方式造成的，此時(shí)若親子關(guān)系相對(duì)機(jī)會(huì)已超過(guò)公認(rèn)的親權(quán)認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)，則可作出認(rèn)定結(jié)論。2、有2個(gè)遺傳標(biāo)記排除，要根據(jù)具體情況分析。2個(gè)血型遺傳標(biāo)記，如ABO、HLA違反遺傳規(guī)律，則可作出排除結(jié)論；1個(gè)血型遺傳標(biāo)記直接排除，1個(gè)DNA遺傳標(biāo)記排除，且可疑父與孩子均為雜合子，則可否定可疑父為生父；2個(gè)DNA遺傳標(biāo)記排除需慎重對(duì)待，宜加測(cè)遺傳標(biāo)記后再具體分析，加測(cè)標(biāo)記數(shù)目要考慮CCE值達(dá)到0.9997以上，結(jié)論較為穩(wěn)妥。3、有3個(gè)及3個(gè)以上遺傳標(biāo)記排除，則可作出排除親子關(guān)系的結(jié)論。因?yàn)榧僭O(shè)DNA單一基因位點(diǎn)突變率為0.002，三個(gè)位點(diǎn)同時(shí)突變?cè)斐慑e(cuò)誤排除概率僅為4×10－9。排除案例：位點(diǎn)毛先生毛某1毛某2VWA15，1814，1614，17TPOX8，118，118，11THO16，66，99，9D16S53911，119，119，9D21S1128，33.229，3029，29D18S5119，2213，1913，19D8S117913，1515，2615，16D5S81811，1110，1212，12D13S3178，911，1212，13D7S8208，1011，1211，12CSF1PO11，1210，1210，12D3S135816，1912，1712，19FGA23，2422，2619，22

肯定親權(quán)關(guān)系

在親子鑒定中，根據(jù)多個(gè)血型系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的遺傳關(guān)系分析，親代與子代的遺傳標(biāo)記不違反孟德?tīng)栠z傳定律，則他們之間可能存在親生關(guān)系，但并不等于一定是親生關(guān)系，因?yàn)殡S機(jī)男子也可能攜有與生父相同的基因。經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遺傳標(biāo)記，假定為父親的男子不能被排除父權(quán)的情況下，計(jì)算概率后如同時(shí)滿足下列兩項(xiàng)指標(biāo)，可以認(rèn)定假定父親的父權(quán)，即可以斷定他是孩子的生物學(xué)父親。1、實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遺傳標(biāo)記的累積非父排除率等于或大于99.99﹪；2、假定父親的累積父權(quán)指數(shù)等于或大于2000，即在前概率相同的條件下，假定父親的相對(duì)父權(quán)機(jī)會(huì)等于或大于99.99﹪。

非父排除率

父權(quán)排除概率（excludingprobabilityofpaternity，EPP）又稱非父排除概率，指通過(guò)某一個(gè)遺傳標(biāo)記系統(tǒng)的檢測(cè)，在100個(gè)被誤控的可疑父中能將不是生父的被控父親排除的概率。它是衡量一個(gè)遺傳標(biāo)記系統(tǒng)排除非父能力的客觀標(biāo)準(zhǔn)。各個(gè)遺傳標(biāo)記系統(tǒng)非父排除概率的大小取決于該系統(tǒng)的遺傳方式，等位基因的數(shù)目以及各等位基因在群體中的頻率分布。親子鑒定一般使用多個(gè)遺傳標(biāo)記系統(tǒng)，因此求得每個(gè)系統(tǒng)的非父排除概率后尚須求得多個(gè)系統(tǒng)的累積非父排除概率（cumulativechanceofexclusion，CCE）。假設(shè)每個(gè)遺傳標(biāo)記系統(tǒng)是互相獨(dú)立的，而不同遺傳標(biāo)記系統(tǒng)的非父排除率分別為P1、P2、P3…PK，則累積非父排除率為：CCE=1-（1-P1）（1-P2）（1-P3）…（1-PK）。實(shí)驗(yàn)室所檢測(cè)遺傳標(biāo)記的累積非父排除概率可作為衡量親子鑒定實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

父權(quán)指數(shù)及計(jì)算父權(quán)指數(shù)（paternityindex，PI）又稱親子關(guān)系指數(shù)，是假設(shè)父提供生父基因成為孩子生父的可能性與隨機(jī)男子提供生父基因成為孩子生父可能性的比值，表示假設(shè)父為孩子生父的機(jī)會(huì)比隨機(jī)男子為孩子生父的機(jī)會(huì)大多少倍，是一項(xiàng)重要的親子關(guān)系參數(shù)。

PI=X/YX：假設(shè)父作為生父應(yīng)提供所需基因的幾率Y：隨機(jī)男子作為生父應(yīng)提供所需基因的幾率父權(quán)指數(shù)是兩個(gè)條件概率的比值，是一個(gè)典型的似然比，是以分型結(jié)果不違反遺傳規(guī)律作為條件，假設(shè)父是孩子生父的概率與一個(gè)隨機(jī)男子是孩子生父的概率之比。計(jì)算父權(quán)指數(shù)，是以特定的母子血型組合為參照，根據(jù)母、假設(shè)父提供必須基因的機(jī)會(huì)，比較假設(shè)父與隨機(jī)男子作為生父的機(jī)會(huì)。1、根據(jù)表型推測(cè)遺傳必需基因的機(jī)會(huì)根據(jù)遺傳學(xué)知識(shí)，純合子基因型頻率為組成基因頻率的平方，親代遺傳該基因的概率為100﹪；雜合子基因型頻率為組成基因頻率乘積的2倍，親代遺傳其中1個(gè)基因的概率為1/2。但如果根據(jù)表現(xiàn)型推測(cè)基因型中可能含有隱性基因，則應(yīng)分別計(jì)算遺傳顯性基因和隱性基因的機(jī)會(huì)。表10-10例舉了ABO血型系統(tǒng)不同表型遺傳相應(yīng)等位基因的幾率。2、計(jì)算父權(quán)指數(shù)的具體步驟（1）根據(jù)母子組合，確定來(lái)自父母的必需基因，即生父和生母基因。（2）確定母親遺傳生母基因的機(jī)會(huì)（f）。（3）確定隨機(jī)男子提供生父基因的機(jī)會(huì)（g），一般使用相應(yīng)的基因頻率。（4）確定假設(shè)父提供生父基因的機(jī)會(huì)（c）。（5）計(jì)算隨機(jī)男子成為生父的機(jī)會(huì)，Y=f×g。（6）計(jì)算假設(shè)父成為生父的機(jī)會(huì)，X=f×c。（7）計(jì)算父權(quán)指數(shù)，PI=X/Y=f×c/f×g。PI值的具體計(jì)算例見(jiàn)表10-11。

表10-11PI值計(jì)算例案例表型必需基因f隨機(jī)男人成為生父的機(jī)會(huì)（Y=f×g）被控父成為生父的機(jī)會(huì)（X=f×c）PI孩子母親被控父母親生父1BAABOB11×0.2556=0.25561×0.5=0.51.962ABABBABBA×0.2556+0.5×0.20920.5×0.596+0.5×01.280.23240.2983BBABBB或O0.4040.596×0.25560.596×0.50.87OB0.5960.596×0.5352+0.404×0.25560.596×0+0.404×0.50.57480.54BOBOB11×0.2556=0.25561×0.596=0.5960.23

父權(quán)相對(duì)機(jī)會(huì)及計(jì)算父權(quán)相對(duì)機(jī)會(huì)（relativechanceofpaternity，RCP）又稱親子關(guān)系相對(duì)機(jī)會(huì)，是以百分比形式來(lái)表示PI值。RCP=PI/（PI＋1）×100﹪=X/（X＋Y）×100﹪PI理論值可接近無(wú)窮大，RCP理論值可非常接近100﹪，但不能達(dá)到100﹪。RCP作為衡量親生關(guān)系可能性大小的指標(biāo)，按統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)RCP達(dá)到95﹪，已具有肯定親生關(guān)系的意義。但究竟達(dá)到多大，才能肯定親生關(guān)系，國(guó)際上尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。Martin等以PI≥400，RCP≥99.75﹪作為肯定父權(quán)的標(biāo)準(zhǔn)。80年代國(guó)際上常用標(biāo)準(zhǔn)為RCP≥99.73﹪判定有親子關(guān)系（表10-12）。EvettIW等（1998）提出的標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表10-13。表10-12父權(quán)相對(duì)機(jī)會(huì)和親子關(guān)系表10-13EvettIW（1998）的判定標(biāo)準(zhǔn)RCP值（﹪）意義RCP（﹪）意義≥99.73可能肯定有親子關(guān)系50～80不可能肯定是否有親子關(guān)系99～99.73極可能有親子關(guān)系10～50傾向排除親子關(guān)系95～99非?？赡苡杏H子關(guān)系5≤W≤10不大可能有親子關(guān)系90～9