傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗證

第第頁傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗證15.1試驗環(huán)境

試驗在干凈度10000級下的局部干凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，全過程嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。單向流空氣區(qū)、工作臺面及環(huán)境定期按《醫(yī)藥工業(yè)干凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行干凈度驗證。

次操作開頭前，開紫外燈照耀1小時。

5.2培育基的制備

5.2.1養(yǎng)分瓊脂培育基

配方：

養(yǎng)分瓊脂培育基粉31.0g

純化水1000mL

配制：

依據(jù)需要量稱取養(yǎng)分瓊脂培育基粉置相宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至7.1±0.2，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

5.2.2改良馬丁瓊脂培育基

配方：

改良馬丁瓊脂培育基粉42.0g

純化水1000mL

配制：

依據(jù)需要量稱取改良馬丁瓊脂培育基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

5.2.3養(yǎng)分肉湯培育基

配方：

養(yǎng)分肉湯培育基20g

純化水1000mL

配制：

稱取養(yǎng)分肉湯培育基20克，加1000mL純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

5.2.4改良馬丁培育基

配方：

改良馬丁培育基粉28.0g

純化水1000mL

配制：

依據(jù)需要量稱取改良馬丁培育基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

5.3方法驗證試驗

5.3.1輻照強度測定

5.3.1.1開啟紫外燈5min后，用中心波長為253.7nm的紫外線強度測定儀在燈管下方垂直1m的中心處測量其輻照度值（uW/cm2）。

5.3.1.2測量時，電壓應(yīng)穩(wěn)定在220V。

5.3.1.3一般型或低臭氧型直管紫外線燈（30W），在燈管下方垂直1m的中心處，新燈管的輻照度值應(yīng)≥90uW/cm2。使用中的燈管的輻照度值應(yīng)≥70uW/cm2，低于此值者應(yīng)予更換。

5.3.2照耀劑量

表面消毒接受的照耀劑量，應(yīng)達(dá)殺滅目標(biāo)微生物所需。對大腸桿菌，照耀劑量應(yīng)達(dá)到7.5×103uW·s/cm2,對金黃色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢桿菌應(yīng)達(dá)到2.53×104uW·s/cm2。

5.3.2.1照耀劑量計算：

照耀劑量（uW·s/cm2）＝紫外燈管強度（uW/cm2）×?xí)r間（s）

5.3.3細(xì)菌及其芽孢和真菌殺滅效果的測定

5.3.3.1菌液的制備

接種菌種名稱

接種培育基

培育條件

金黃色葡萄球菌新奇培育物

養(yǎng)分肉湯培育基

30～35℃培育18～24小時

大腸桿菌新奇培育物

枯草芽孢桿菌新奇培育物

白色念珠菌新奇培育物

改良馬丁培育基

23～28℃培育24～48小時

金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌培育后，將菌液進(jìn)行活菌計數(shù)。

5.3.3.2將滅菌載體平放于滅菌平皿內(nèi)，個載體滴注定量菌懸液，（載體回收菌量達(dá)5×105～5×106cfu/片），涂勻，放37℃培育箱烘干。開啟紫外燈5min后，將16個染菌玻片平放于滅菌平皿內(nèi)，水平放于適當(dāng)距離照耀，于4個不同間隔時間（15min、30min、45min、60min）各取出4個染菌玻片，分別投入4個盛有5mL洗脫液試管中，振打80次。

5.3.3.3經(jīng)適當(dāng)稀釋后，取1mL洗脫液，作平板傾注，個染菌玻片接種兩個，細(xì)菌放30～35℃培育48小時作活菌計數(shù)，真菌放23～28℃培育72小時作活菌計數(shù)。

5.3.3.4陽性對比，除不做照耀處理外，取4個染菌玻片，分別投入4個盛有5ml洗脫液試管中，振打80次。余按7.4.2.3同樣操作。

5.3.3.5計算殺滅率

殺滅率（％）＝（陽性對比回收菌數(shù)－試驗組回收菌數(shù)）/陽性對比回收菌數(shù)×100％

5.3.3.6判定標(biāo)準(zhǔn)對指示菌殺滅率≥99.9％判為消毒合格。

6驗證結(jié)果記：附件1.試驗菌數(shù)量測定原始記

7再驗證周期傳遞窗構(gòu)造或紫外燈管放置置發(fā)生轉(zhuǎn)變時。

8相關(guān)SOP文件編號

文件名稱

020231

微生物試驗室管理

020233

物品進(jìn)出微生物檢驗室

020342

微生物檢驗區(qū)的清潔消毒

020343

培育基的配制

020344

細(xì)菌的接種、傳代和保存

020377

高壓滅菌

021267

微生物數(shù)量的測定

9QA職責(zé)QA必需參加驗證的評審階段；

QA必需批閱最終報告（包括草案）；

QA批閱者不應(yīng)是參加實施的其他QA人員。

10修改事項在實施過程中，假如方案需要修改，必需提交書面的報告，闡述修改的緣由，修改的內(nèi)容，并經(jīng)過驗證小組負(fù)責(zé)人及QA