傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗(yàn)證

第第頁(yè)傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗(yàn)證15.1試驗(yàn)環(huán)境

試驗(yàn)在干凈度10000級(jí)下的局部干凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，全過(guò)程嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境定期按《醫(yī)藥工業(yè)干凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行干凈度驗(yàn)證。

次操作開頭前，開紫外燈照耀1小時(shí)。

5.2培育基的制備

5.2.1養(yǎng)分瓊脂培育基

配方：

養(yǎng)分瓊脂培育基粉31.0g

純化水1000mL

配制：

依據(jù)需要量稱取養(yǎng)分瓊脂培育基粉置相宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至7.1±0.2，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

5.2.2改良馬丁瓊脂培育基

配方：

改良馬丁瓊脂培育基粉42.0g

純化水1000mL

配制：

依據(jù)需要量稱取改良馬丁瓊脂培育基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

5.2.3養(yǎng)分肉湯培育基

配方：

養(yǎng)分肉湯培育基20g

純化水1000mL

配制：

稱取養(yǎng)分肉湯培育基20克，加1000mL純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

5.2.4改良馬丁培育基

配方：

改良馬丁培育基粉28.0g

純化水1000mL

配制：

依據(jù)需要量稱取改良馬丁培育基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于相宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

5.3方法驗(yàn)證試驗(yàn)

5.3.1輻照強(qiáng)度測(cè)定

5.3.1.1開啟紫外燈5min后，用中心波長(zhǎng)為253.7nm的紫外線強(qiáng)度測(cè)定儀在燈管下方垂直1m的中心處測(cè)量其輻照度值（uW/cm2）。

5.3.1.2測(cè)量時(shí)，電壓應(yīng)穩(wěn)定在220V。

5.3.1.3一般型或低臭氧型直管紫外線燈（30W），在燈管下方垂直1m的中心處，新燈管的輻照度值應(yīng)≥90uW/cm2。使用中的燈管的輻照度值應(yīng)≥70uW/cm2，低于此值者應(yīng)予更換。

5.3.2照耀劑量

表面消毒接受的照耀劑量，應(yīng)達(dá)殺滅目標(biāo)微生物所需。對(duì)大腸桿菌，照耀劑量應(yīng)達(dá)到7.5×103uW·s/cm2,對(duì)金黃色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢桿菌應(yīng)達(dá)到2.53×104uW·s/cm2。

5.3.2.1照耀劑量計(jì)算：

照耀劑量（uW·s/cm2）＝紫外燈管強(qiáng)度（uW/cm2）×?xí)r間（s）

5.3.3細(xì)菌及其芽孢和真菌殺滅效果的測(cè)定

5.3.3.1菌液的制備

接種菌種名稱

接種培育基

培育條件

金黃色葡萄球菌新奇培育物

養(yǎng)分肉湯培育基

30～35℃培育18～24小時(shí)

大腸桿菌新奇培育物

枯草芽孢桿菌新奇培育物

白色念珠菌新奇培育物

改良馬丁培育基

23～28℃培育24～48小時(shí)

金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌培育后，將菌液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。

5.3.3.2將滅菌載體平放于滅菌平皿內(nèi)，個(gè)載體滴注定量菌懸液，（載體回收菌量達(dá)5×105～5×106cfu/片），涂勻，放37℃培育箱烘干。開啟紫外燈5min后，將16個(gè)染菌玻片平放于滅菌平皿內(nèi)，水平放于適當(dāng)距離照耀，于4個(gè)不同間隔時(shí)間（15min、30min、45min、60min）各取出4個(gè)染菌玻片，分別投入4個(gè)盛有5mL洗脫液試管中，振打80次。

5.3.3.3經(jīng)適當(dāng)稀釋后，取1mL洗脫液，作平板傾注，個(gè)染菌玻片接種兩個(gè)，細(xì)菌放30～35℃培育48小時(shí)作活菌計(jì)數(shù)，真菌放23～28℃培育72小時(shí)作活菌計(jì)數(shù)。

5.3.3.4陽(yáng)性對(duì)比，除不做照耀處理外，取4個(gè)染菌玻片，分別投入4個(gè)盛有5ml洗脫液試管中，振打80次。余按7.4.2.3同樣操作。

5.3.3.5計(jì)算殺滅率

殺滅率（％）＝（陽(yáng)性對(duì)比回收菌數(shù)－試驗(yàn)組回收菌數(shù)）/陽(yáng)性對(duì)比回收菌數(shù)×100％

5.3.3.6判定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)指示菌殺滅率≥99.9％判為消毒合格。

6驗(yàn)證結(jié)果記：附件1.試驗(yàn)菌數(shù)量測(cè)定原始記

7再驗(yàn)證周期傳遞窗構(gòu)造或紫外燈管放置置發(fā)生轉(zhuǎn)變時(shí)。

8相關(guān)SOP文件編號(hào)

文件名稱

020231

微生物試驗(yàn)室管理

020233

物品進(jìn)出微生物檢驗(yàn)室

020342

微生物檢驗(yàn)區(qū)的清潔消毒

020343

培育基的配制

020344

細(xì)菌的接種、傳代和保存

020377

高壓滅菌

021267

微生物數(shù)量的測(cè)定

9QA職責(zé)QA必需參加驗(yàn)證的評(píng)審階段；

QA必需批閱最終報(bào)告（包括草案）；

QA批閱者不應(yīng)是參加實(shí)施的其他QA人員。

10修改事項(xiàng)在實(shí)施過(guò)程中，假如方案需要修改，必需提交書面的報(bào)告，闡述修改的緣由，修改的內(nèi)容，并經(jīng)過(guò)驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人及QA