標準解讀
GB/T 17999.8-1999是一項中華人民共和國國家標準,全稱為《SPF雞 試管凝集試驗》。該標準詳細規(guī)定了使用無特定病原體(Specific Pathogen Free,簡稱SPF)雞進行試管凝集試驗的方法、操作步驟、結(jié)果判斷以及實驗條件控制等方面的要求,旨在為獸醫(yī)學(xué)研究、禽類疾病診斷及疫苗效果評估提供統(tǒng)一的檢測技術(shù)規(guī)范。
標準內(nèi)容概覽:
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范圍:明確了標準適用的對象為SPF雞,規(guī)定了利用試管凝集試驗檢測其血清中抗原或抗體的具體方法。
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規(guī)范性引用文件:列出了執(zhí)行該標準時需要參考的其他相關(guān)國家標準或國際標準文獻。
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術(shù)語和定義:對試管凝集試驗相關(guān)的專業(yè)術(shù)語進行了界定,確保讀者對標準中的概念有準確理解。
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試劑與材料:詳細說明了試驗所需的各種試劑、抗原制備、雞血清處理及試管等實驗材料的選擇標準和準備方法。
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儀器設(shè)備:列舉了進行試管凝集試驗所必需的實驗室儀器和設(shè)備,如恒溫水浴鍋、離心機、顯微鏡等,并對其性能要求做了簡要描述。
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試驗方法:
- 樣品采集與處理:規(guī)定了如何從SPF雞采集血液并制備血清。
- 試驗步驟:詳細闡述了包括抗原稀釋、血清稀釋、抗原與血清混合、孵育、觀察凝集反應(yīng)等具體操作流程。
- 結(jié)果判定:根據(jù)凝集現(xiàn)象的有無及程度,制定了判斷陽性、陰性或不確定結(jié)果的標準。
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試驗條件與環(huán)境控制:指明了試驗過程中應(yīng)控制的溫度、濕度等環(huán)境條件,以保證試驗結(jié)果的準確性與可重復(fù)性。
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質(zhì)量控制:提出了實施質(zhì)量控制的措施,包括使用已知陽性和陰性對照血清進行驗證,確保試驗的有效性。
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安全注意事項:強調(diào)了在操作過程中應(yīng)采取的安全措施,以防止生物危害和化學(xué)試劑的不當(dāng)使用。
實施意義:
本標準的制定與實施,為SPF雞相關(guān)疾病的診斷、疫苗效果監(jiān)測及動物健康狀態(tài)評估提供了科學(xué)、統(tǒng)一的實驗方法,有助于提升實驗數(shù)據(jù)的可靠性和可比性,促進獸醫(yī)科研及禽類養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展。
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文檔簡介
TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T17999.8-1999SPF雞試管凝集試驗SPFchicken--Tubeagglutinationtest1999-11-10發(fā)布2000-04-01實施國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布
GB/T17999.8-1999用血清平板凝集試驗監(jiān)測雞白痛沙門氏菌感染,結(jié)果難以判定時,可用試管凝集試驗(TA)進行復(fù)檢·為此本標準規(guī)定了SPF雞試管凝集試驗。SPF雞微生物學(xué)質(zhì)量控制國家系列標準,包括SPF雞微生物學(xué)監(jiān)測總則和9種SPF雞微生物學(xué)檢測方法。本標準為《SPF雞試管凝集試驗》。SPF雞微生物學(xué)檢測方法還包括以下部分:GB/T17999.1—1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗;GB/T17999.2—1999SPF雞血清中和試驗;GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗;GB/T17999.4—1999SPF雞瓊脂擴散試驗;GB/T17999.5—1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗;GB/T17999.6—1999SPF雞旺敏感試驗;GB/T17999.7—1999SPF雞雞白痛沙門氏菌檢驗:GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗。本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部、國家科學(xué)技術(shù)部提出本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)司歸口本標準起草單位:中國獸藥監(jiān)察所、農(nóng)業(yè)部實驗動物中心本標準主要起草人:張學(xué)琴、陳德威、趙立紅
中華人民共和國國家標準GB/T17999.8—-1999SPF雞試管凝集試驗SPrchicken-Tubeagglutinationtest1范圍本標準規(guī)定了試管凝集試驗所用試劑、材料,操作程序及結(jié)果判定等本標準適用于SPF雞感染雞白痛沙門氏菌或雞傷寒沙門氏菌后的抗體監(jiān)測.原理同血清平板凝集試驗·亦是細菌性抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合后·在適量電解質(zhì)參與下,經(jīng)過一段時間出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,只是結(jié)果判定以凝集價表示3試劑和材料3.1抗原:試管凝集試驗用雞白南-雞傷寒抗原(含菌10億/ml)3.2陽性、陰性血清。3.33被檢血清。3.40.5%石炭酸生理鹽水:石炭酸58氯化鈉8.5g:蒸餡水1000mL:混合溶化.6.897Pa20min消毒備用。3.5常規(guī)血清學(xué)試驗用品。4操作程序4.1每份被檢血清需要5支小試管(口徑8mm~10mm)。第1管加石炭酸生理鹽水1.8mL.其余管各加1mL.4.2第1管加被檢血清0.2mL.與石炭酸生理鹽水混勺(使成1:10稀釋).取1mL移至第2管.混勾后連續(xù)倍比稀釋至第4管最后從第4管內(nèi)吸出1mL齊去。如此各管血清最后稀釋依次為1:20.1:40.1:80.1:160.1:320。4.3各管加入抗原液1mL。4.4振蕩混勻后,置37C感作24h,觀察結(jié)果4.5每次試驗須設(shè)三種對照各一份。4.5.1抗原對照;在試管中加抗原液1mL,再加0.5%石炭酸生理鹽水1mL.4.5.2陽性血清對照:陽性血清稀釋至原來效價,每管加入抗原液1mL..4.5.3陰性血清對照:操作方法同被檢血清。4.5.4全部試管振蕩后,置
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