標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 25170-2010 畜禽基因組BAC文庫(kù)構(gòu)建與保存技術(shù)規(guī)程》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在為畜禽基因組的細(xì)菌人工染色體（Bacterial Artificial Chromosome, BAC）文庫(kù)構(gòu)建及保存提供一套科學(xué)、規(guī)范的技術(shù)指導(dǎo)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于所有涉及畜禽遺傳資源保護(hù)、開發(fā)和利用的研究機(jī)構(gòu)或個(gè)人。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，BAC文庫(kù)構(gòu)建過程包括但不限于以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：首先是對(duì)目標(biāo)生物樣本進(jìn)行高質(zhì)量DNA提??；其次是通過限制性內(nèi)切酶切割獲得適當(dāng)大小的DNA片段；接著是將這些片段連接到載體上，并轉(zhuǎn)化進(jìn)宿主細(xì)胞中；最后是篩選陽(yáng)性克隆并進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)以形成穩(wěn)定的文庫(kù)。對(duì)于每一步驟，《GB/T 25170-2010》都給出了具體的操作指南和技術(shù)參數(shù)要求，比如推薦使用的試劑種類、反應(yīng)條件設(shè)置等，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性和可重復(fù)性。

此外，該標(biāo)準(zhǔn)還詳細(xì)規(guī)定了如何對(duì)已構(gòu)建好的BAC文庫(kù)進(jìn)行長(zhǎng)期保存。這涉及到適宜的存儲(chǔ)介質(zhì)選擇（如甘油凍存）、溫度控制以及定期復(fù)蘇檢測(cè)等內(nèi)容，目的是保證文庫(kù)在長(zhǎng)時(shí)間存放后仍能保持其完整性和活性。同時(shí)，也強(qiáng)調(diào)了記錄管理的重要性，要求對(duì)每個(gè)環(huán)節(jié)的信息都要有詳盡準(zhǔn)確的文檔記載，以便于后續(xù)查詢使用。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2010-09-26 頒布
  • 2011-03-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS6502030

B40..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T25170—2010

畜禽基因組BAC文庫(kù)構(gòu)建與

保存技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationoffarmanimalsgenomeBAClibrary

constructionandpreservation

2010-09-26發(fā)布2011-03-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T25170—2010

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC274)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人關(guān)偉軍馬月輝劉長(zhǎng)青潘春留劉洪坤甫亞斌余露露

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T25170—2010

畜禽基因組BAC文庫(kù)構(gòu)建與

保存技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了畜禽基因組文庫(kù)構(gòu)建方法

BAC。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬牛羊馬驢雞鴨鵝等畜禽的基因組文庫(kù)構(gòu)建與保存

、、、、、、、BAC。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內(nèi)容或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)然而鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。,。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。

31

.

基因組文庫(kù)genomelibrary

用重組技術(shù)將某種生物細(xì)胞的核的全部片段隨機(jī)地連接到載體上再轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)乃?/p>

DNADNA,

主細(xì)胞中通過細(xì)胞增殖而形成的各個(gè)片段的無(wú)性繁殖系的總集

,。

32

.

細(xì)菌人工染色體bacterialartificialchromosomeBAC

,

以大腸桿菌致育因子為基礎(chǔ)利用現(xiàn)代重組技術(shù)體外人工合成的具有容納高分子量外源

,DNA

的特性載體

DNA。

33

.

DNA連接DNAligation

在連接酶催化下靶片段與載體相鄰的端磷酸與端羥基之間形成磷酸二酯

DNA,DNADNA5’3’

鍵的過程

。

34

.

感受態(tài)細(xì)胞competentcells

在特定條件下細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變?cè)试S外源進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的特殊狀態(tài)下的受體細(xì)胞

,DNA。

35

.

電轉(zhuǎn)化electrotransformation

在高壓脈沖的作用下將外源導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞的過程

,DNA。

36

.

脈沖場(chǎng)凝膠電泳pulsefieldgelelectrophoresisPFGE

,

利用脈沖場(chǎng)電泳系統(tǒng)電場(chǎng)方向周期性交替變化的功能而分離和鑒定生物大分子的技術(shù)

。

37

.

重組體recombinant

兩種以上不同來(lái)源的

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