酶解法制備葡萄糖酸鈣

酶法制備葡萄糖酸鈣

月餅小分隊(duì)：白朋綱楊夢(mèng)雪姜昌熊張雪冰鈣是體內(nèi)含量最大的無(wú)機(jī)物，為維持人體神經(jīng)，肌肉，骨骼系統(tǒng)，細(xì)胞膜和毛細(xì)血管通透性正常功能所必需。

葡萄糖酸鈣在中國(guó)和許多國(guó)家的藥典里都有收藏，是一種我們比較熟悉的的藥物，葡萄糖酸鈣常常被用來(lái)做補(bǔ)鈣劑。它有利于人體骨質(zhì)的形成，對(duì)青少年骨骼發(fā)育有促進(jìn)作用,同時(shí)由于它是一種抗過(guò)敏溶解度高，生理活性大的鈣營(yíng)養(yǎng)藥，可以治療生理性缺鈣癥和血鈣引起的手足抽搐、痙攣等癥，以及治療軟骨、佝僂等缺鈣癥。發(fā)酵法：營(yíng)養(yǎng)鹽和黑霉菌種子營(yíng)養(yǎng)液，進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)酵液加石灰乳中和，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，結(jié)晶得到粗品，經(jīng)精制得到葡萄糖酸鈣。（生產(chǎn)成本較高，純化工藝較復(fù)雜

）

試驗(yàn)原理（1）α-淀粉酶(EC3.2.1.1)又稱(chēng)液化型淀粉酶，它作用于淀粉時(shí)，隨機(jī)的從淀粉分子內(nèi)部切開(kāi)α-1,4糖苷鍵，使淀粉水解成糊精和一些還原糖。（2）糖化酶（EC3.2.1.3）又稱(chēng)葡萄糖淀粉酶，它作用于淀粉時(shí)，從淀粉分子的非還原端開(kāi)始逐個(gè)地水解α-1,4糖苷鍵，生成葡萄糖和一些低聚糖，且糖化酶還有一定的水解α-1,6糖苷鍵和α-1,3糖苷鍵的能力(C6H10O5)n

+nH2OnC6H10O6α-淀粉酶糖化酶試驗(yàn)原理（3）葡萄糖氧化酶（EC1.1.3.4）是一種糖蛋白，它能夠特異性的氧化β-D-葡萄糖生成中間產(chǎn)物D-葡萄糖酸-δ-內(nèi)酯和過(guò)氧化氫，并發(fā)生非酶促反應(yīng)水解為葡糖酸。（4）過(guò)氧化氫酶（EC1.1.1.1.6）它以過(guò)氧化氫作為專(zhuān)一的底物，催化過(guò)氧化氫分解為水和氧氣保護(hù)酶受到過(guò)氧化氫的毒害。4C6H12O6+3O2+2H2O4C6H12O7+2H2O2葡萄糖氧化酶2C6H12O7+CaCO3Ca(C6H11O7)2+CO2+H2O2H2O22H2O+O2過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)器材500ML燒杯，PH試紙，

玻璃棒，水浴鍋，

電爐，石棉網(wǎng)，溫度計(jì)，

濾紙，

漏斗，電子天平，

量筒等常用試驗(yàn)用器材試驗(yàn)試劑淀粉，a-淀粉酶，

糖化酶

，

葡萄糖氧化酶

，

過(guò)氧化氫酶

，NaOHNa2CO3

，CaCO3，CaCl2，

碘液，活性炭等等操作步驟一，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)配置5個(gè)梯度濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液各取1mL分裝于五支試管中設(shè)置一個(gè)空白組分別加入2mLDNS試劑沸水浴中2min后取出加蒸餾水至15mL測(cè)定吸光值，獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)操作步驟

45g淀粉+150ml水?dāng)嚢?/p>

Na2CO3調(diào)節(jié)pH=6--6.4

加入a-淀粉酶，72℃加熱攪拌15min

再加熱至90℃30min

淀粉糊化加熱到沸騰10min，酶失活二，液化冷卻至55-60℃加入糖化酶調(diào)節(jié)ph=4.5于60-65℃恒溫水浴糖化3-4h加入活性炭，在80℃攪拌30min抽濾，得到透明糖液測(cè)量葡萄糖含量三，糖化操作步驟四，雙酶氧化葡萄糖+CaCO3(過(guò)量)加過(guò)氧化氫酶和葡萄糖氧化酶35℃攪拌反應(yīng)，通過(guò)pH判斷反應(yīng)進(jìn)行的程度反應(yīng)結(jié)束，加活性炭脫色獲得葡萄糖酸鈣溶液操作步驟試驗(yàn)結(jié)果吸光值1.4142.6822.8912.