液相色譜法與幾種檢測器

液相色譜法與幾種檢測器的學(xué)習(xí)組員：李歡歡、戴雅吉、郭宣宣施香琴、馬婷婷2內(nèi)容介紹液相色譜法的簡單介紹檢測器的原理及應(yīng)用范圍應(yīng)用實例及發(fā)展參考資料3液相色譜法：簡單的說就是用液體作為流動相的色譜法。1903年俄國化學(xué)家M.C.茨維特首先將液相色譜法用于分離葉綠素。4液相色譜法的分離機制液相色譜法的分離機理是基于混合物中各組分對兩相親和力的差別。5根據(jù)固定相的不同，液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。應(yīng)用最廣的是以硅膠為填料的液固色譜和以微硅膠為基質(zhì)的鍵合相色譜。根據(jù)固定相的形式液相色譜法可以分為柱色譜法、紙色譜法及薄層色譜法。按吸附力可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜。6常用的液相色譜儀高效液相色譜儀由輸出泵、進樣裝置、色譜柱、梯度沖洗裝置、檢測器及數(shù)據(jù)處理和微機控制單元組成。7常見的幾種檢測器的原理及應(yīng)用范圍

檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號。分類：A.選擇性檢測器：組分性質(zhì)1.紫外可見吸收檢測器(UVD)2.熒光檢測器(FD)

B.通用型檢測器：總體性質(zhì)3.蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）4.電化學(xué)檢測器(ED)5.示差折光檢測器(RID)

8檢測器一1.紫外可見吸收檢測器(ultraviolet－visibledetector，UVD)是HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。特點：靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質(zhì)檢測限可達(dá)1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯(lián)使用。但是只能用于檢測有紫外吸收的物質(zhì)，且流動相的選擇有一定限制，流動相的截止波長必須小于檢測波長。9檢測器二熒光檢測器(fluorescencedetector，F(xiàn)D)

熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進行熒光檢測。特點：其最小檢測濃度可達(dá)0.1ng／ml，適用于痕量分析；一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級，但其線性范圍不如紫外.10檢測器三

ELSD是一種通用型檢測器，定量依據(jù)為峰面積（峰高）或其比值的對數(shù)與進樣量或濃度的對數(shù)成正比。

原理：首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。

應(yīng)用范圍包括：碳水化合物，藥物，脂類，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化劑，營養(yǎng)滋補品，及組合分子庫等。111213141516應(yīng)用實例及發(fā)展高效液相色譜熒光檢測法檢測雞蛋中阿莫西林殘留雞蛋經(jīng)乙腈提取，飽和二氯甲烷萃取，水楊醛酸性條件下沸水浴衍生化后，以0.01mol/L的磷酸二氫鉀溶液(A)和乙腈溶液(B)為流動相，流速為1.0mL/min，熒光檢測激發(fā)波長為354nm,發(fā)射波長為445nm。阿莫西林在5.0～800ng/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，本方法線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.9997。分析：所建立的方法簡便、快速、靈敏度高，適用于雞蛋中阿莫西林殘留的高靈敏度檢測。17HPLC-UV-ELSD法同時測定青蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量

用HPLC-UV-ELSD法同時測定青蒿藥材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。采用NucleodurC18色譜柱(250mm×4.6mm,5μmID);以乙腈-0.1%乙酸水(50∶50)為流動相;紫外檢測波長209nm,蒸發(fā)光散射檢測器漂移管溫度50℃。分析：青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸能夠達(dá)到很好分離。本法簡單、準(zhǔn)確、快速,可同時測定青蒿藥材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。18進步與期待：如今更強調(diào)的是多種檢測器聯(lián)用來達(dá)到更好的分析分離效果，比如LC-MS,GC-MS,GC-LC等等。希望我們能在學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)上有更好的創(chuàng)新，學(xué)以致用。19參考資料1、中藥制劑分析第二版蔡寶昌2、謝愷丹,陳學(xué)森,徐東等.高效液相色譜熒光檢測法檢測雞蛋中阿莫西林殘留[J].食品科學(xué),2012,33(22):264-268.3、張