標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 5522-1985 糧食、油料檢驗　過氧化氫酶活動度測定法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn)，專門用于測定糧食和油料中過氧化氫酶的活性。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了從樣品準(zhǔn)備到最終結(jié)果計算的一系列步驟，以確保檢測過程的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

首先，在樣品制備方面，需要將待測樣品研磨成細(xì)粉，并通過一定目數(shù)的篩子篩選，保證顆粒大小均勻，便于后續(xù)實驗操作。對于不同的糧食或油料種類，可能還需要采取特定的預(yù)處理措施來提高酶活性測定的準(zhǔn)確性。

接下來是提取液制備階段，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要求，使用適量的緩沖溶液與樣品混合，經(jīng)過充分?jǐn)嚢韬箅x心分離得到上清液作為過氧化氫酶的提取物。這里所使用的緩沖溶液類型及其pH值等參數(shù)均需嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)給出的具體條件執(zhí)行。

然后進(jìn)入關(guān)鍵的酶活測定環(huán)節(jié)，采用分光光度計測量在特定波長下反應(yīng)體系吸光度的變化情況。通過向含有底物（如過氧化氫）的溶液中加入一定量的酶提取液，并記錄一段時間內(nèi)吸光度隨時間變化的數(shù)據(jù)，可以間接反映出過氧化氫酶催化分解過氧化氫的速度快慢，進(jìn)而計算出其相對活性單位。

最后，依據(jù)實驗數(shù)據(jù)及標(biāo)準(zhǔn)提供的公式進(jìn)行計算，得出每克干物質(zhì)中含有多少單位的過氧化氫酶活性。需要注意的是，在整個實驗過程中都必須嚴(yán)格遵守實驗室安全規(guī)范以及正確操作儀器設(shè)備，同時做好詳細(xì)的實驗記錄，以便于后期分析比較不同批次之間的差異性。


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  • 1985-11-02 頒布
  • 1986-07-01 實施
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GB/T 5522-1985糧食、油料檢驗過氧化氫酶活動度測定法_第1頁
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UDC（633.1+633.85).001.4X10中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB5522—85糧食、油料檢驗過氧化氫酶活動度測定法InspectionofgrainandoilseedsMethodsfordeterminationofhydrogenperoxidaseactivity1985-11-02發(fā)布1986-07-01實施家標(biāo)唯局國批準(zhǔn)

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)糧食、油料檢驗過氧化氫酶活動度測定法GB5522-85中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復(fù)興門外三里河北街16號郵政編碼：100045電話：63787337、637874471986年5月第一版2006年3月電子版制作書號：155066·1-23816版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報電話：010）68533533

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)UDC（633.1+633.85.001.4糧食、油料檢驗GB5522-85過氧化氫酶活動度測定法lnspectionofgrainandoilseedsMethodsfordeterminationofhydrogenperoxidaseactivity本標(biāo)準(zhǔn)適用于商品糧食過氧化氫酶活動度的測定儀器和用具1.1恒溫水浴鍋;1.2電爐：1.3離心機(jī)或吸濾裝置；1.4推形瓶：100mli1.5量筒：10、15m1g1.6移液管：5、10，20m11.7研缽：1.88滴定管、細(xì)口瓶、漏斗等。2試劑2.113%過氧化氫溶液：取30%過氧化氫溶液3ml加水稀釋至30ml2.2：10%硫酸溶液；2.30.1N高錳酸鉀溶液;2.4pH7.7索倫遜磷酸鹽緩沖液：甲甲液，稱取礁酸氫二鈉11.876g溶于11水中。乙液，稱取磷酸二氫鉀9.078g溶于11水中。臨用時，甲、乙液按9：1混合。2.5石英砂或用干凈的玻璃片研制成的細(xì)砂。3操作方法3.1過氧化氫酵的提取：稱取試樣（能換算成無水試樣1g），放入研缽中，加少量細(xì)砂，量取緩沖被50ml，先倒出5～10m1于研體中研磨試樣，然后經(jīng)漏斗倒入館形瓶中，用剝余的緩沖液洗凈研體和漏斗，再把洗液倒入錐形瓶內(nèi)，振搖后靜置2～3h，用吸濾法或離心沉淀法獲得透明的提取液。3.2酶活動度的測定：搖勾提取液，吸取20ml注入錐形瓶中，加入20ml水和3ml39過氧化氫溶液，在室溫下放置15～30mia，加入5m110%硫酸溶液，搖勾，用0.1N高錳酸鉀溶液滴定剝余的過氧化氫，記下用去的高錳酸鉀溶液廷升數(shù)（Y,）。3.3對照試驗；吸取20ml提取液注入錐形瓶中，置于沸水浴中加熱5mia，或用直接煮沸法破壞過氧化氫酶。加20ml水和3ml3%過氧化氫溶液于錐形瓶中，在室溫下放置15～30min，再加入10%碗酸5ml

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